200393. lajstromszámú szabadalom • Biokémiai reakcióedény
1 HU 200393 B 2 ként különösen a bevezetőben említett glikolokat használjuk, amelyeknek szabad -OH csoportjai a leginkább alkalmasak sokrétű megkötési célra. A következőkben példaként enzimek megkötését írjuk le: Ebben az esetben a műanyaghoz kötött glikolok szabad -OH csoportjait ciánbromiddal (BrCN) aktiváljuk. Az -OH csoportok ciánbromiddal reakcióképes imidokarbon-csoportok képződése közben reagálnak. Ezek az elektrofil csoportok kovalensen kötődnek az immobilizálandó enzim nukleofil csoportjaihoz. A megkötendő enzimet olyan puffer-oldatba helyezzük, amelynek pH- ját az enzim pH-optimumára állítottuk be. A fixálás minden további művelet nélkül, egy inkubációs idő alatt megy végbe. Az inkubálás optimális hőmérséklete és időtartama különböző enzimeknél különböző lehet. A nem fixált enzimfölösleget a puffer-oldattal kimossuk. A megkötött enzim mennyiségét úgy határozzuk meg, hogy megmérjük az enzimoldatban az aktivitást a megkötési művelet előtt és után, és figyelembe vesszük a mosáshoz használt puffer-maradék aktivitását is. Az ily módon a műanyagon fixált enzim konzerválása előnyösen liofilizálással (fagyasztó szárítással) történhet. Dyen konzerválásra van szükség, ha az elkészített, reakcióra kész reakcióedényt nem használjuk azonnal fel reakcióra. Az elkészített, liofilizált enzimekkel ellátott reakcióedény felhasználásáig történő tárolásához előnyös a reakcióképes edény falát vákuum alatt tartani. A vákuumban történő tárolás szokásos módszerei használhatók ilyen esetben. Antitestek, hormonok vagy a bevezetőben említett élő sejtek messzemenően hasonló módon köthetők meg. Későbbi radioimmun vagy enzimimmun vizsgálati technikában történő felhasználás esetén a fixálandó ligandok előzőleg radioizotópokkal vagy enzimekkel jelölhetők meg. A találmány szerinti reakcióedények fentiekben leírt kiviteli alakjainak alkalmazása különösen az orvosi laboratóriumi diagnosztika céljait szolgálja (például a fentiekben leírt véralvasztási reakcióban történő alkalmazásét). A biológiai laboratóriumi diagnosztika területén további alkalmazási lehetőségek állnak fenn a legkülönbözőbb célokra. Lehetőség van azonban a találmány nagy előnyökkel történő alkalmazására biotechnológiai eljárásoknál is. Ilyen alkalmazásokra kerülhet sor például a gyógyszer- és élelmiszergyártásban^ valamint biológiai megsemmisítési eljárásoknál is. Elő sejtek különösen ilyen eljárásokban használhatók fel előnyösen ligandok-ként. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Reakcióedény - az edény felületén legalább részben szabadon elhelyezkedő, reakcióképes atomcsoportokkal rendelkező, inkorporált vegyi terméket tartalmazó - hőre lágyuló műanyagból, biospecifikus vegyületekkel végzendő vegyi reakciók elvégzésére, előnyösen orvosi laboratóriumi diagnosztikai célokra, azzal jellemezve, hogy a műanyag egy inert, idegenanyag-mentes műanyag és inkorporált vegyi termékként a műanyaghoz, ennek termoplasztikus formálása előtt, az olvadékba homogénen bekevert, 0,1 és 10 tömeg % közötti poliolt tartalmaz. 2. Az 1. igénypont szerinti reakcióedény, azzal jellemezve, hogy a poliol valamilyen glikol. 3. A 2. igénypont szerinti reakcióedény, azzal jellemezve, hogy a poliol glicerin-glikol. 4. A 3. igénypont szerinti reakcióedény, azzal jellemezve, hogy a glicerin-glikol tömeghányada 1 % alatti. 5 10 15 20 25 30 35 Kiadja az Országos Találmányi Hivatal, Budapest A kiadásért felel: Dr. Szvoboda Gabriella osztályvezető SZÜV LASER GYŐR Felelős vezető: a Számítóközpont igazgatója
