200342. lajstromszámú szabadalom • Enzimatikus eljárás L-2-amino-4-(hidroxi-metil-foszfinil)-vajsav előállítására

HU 200342 B

fugáitok. A felülúszót eldobtok, és a maradék sejtet sejtmintaként félretettük.

3. Enámatikus reakciók

A mikrokémcsövekben kapott sejtmintákhoz 5 hozzáadtunk 20 pl trixz-hidroklorid-puffer-oldatot (1 mid, pH « 8,0), 20 pl vizes OMPB-oldatot (koncentráció 200 mg/ml, pH * 8,0), 40 jtl vizes amino-donor-oldatot és 120 (iJ vizet (amino-donor-10

19

IV. Táblázat

Termelt L-AMPB mennyisége

(mg/ml)

Alkalmazott mikroorganizmus (baktérium)

Glu

Asp

Alá

Bacillus subtilis (ATCC 6633)

3.0

1.9

2.2

Micrococcus luteus (ATCC 9341)

2.6

0.2

03

Staphylocooccus aureus 209P (ATCC 6538)

3.2

0.6

03

Escherichia coli (ATCC 10798)

93

4.2

33

Pseudomonas aeruginosa (ATCC 10145)

83

33

3.8

Pseudomonas cepacia (ATCC 17759)

9.6

2.4

3.0

Serratia marcescens (ATCC 13880)

93

1.8

1.6

Corynebacterium glutamicum (ATCC 13032)

23

03

0.4

V. Táblázat

Termelt L-AMPB mennyisége (mg/ml)

Glu Asp Alá

0.9 1.2 12.1 12.1 2.4 2.7 22 1.6

VI. Táblázat

Alkalmazott mikrooganizmus (Actinomyceták)

Termelt L-AMPB mennyisége (mg/ml)

Glu Asp Alá

Streptomyces albus (IFO 13014) (ATCC 3004)

7.4

1.0

03

Streptomyces griseus (IFO 12875) (ATCC 23345)

83

1.7

1.9

Streptoveridllium cinnamoneum (IFO 12852) (ATCC 11874)

10,6

6.0

2.2

Streptomyces morookaensis (IFO 13416) (ATCC 19166)

63

73

33

Nocardia mediterránéi (ATCC 21271)

8.1

2.6

1.6

Nocardiop&is dassonvillei (JCM 3237)

63

13

13

Saccharopolyspora hirsuta (JCM 3170) (ATCC 27875)

3.7

0.8

0.9

Vn. Táblázat

03 0.2

0.9 0.4

6.1 4.0

6.1 4.0

13 0.8

12 0.7

13 0.4

0.8 02

Alkalmazott mikroorganizmus (élesztő)

Saccharomyces cerevisiae (ATCC 9763) Candida Albicans (IÁM 4888)

Candida albicans (IÁM 4829) Cryptococcus neoformans (IÁM 4829) Cryptococcus neoformans (IÁM 4772) Debaryomyces hansenü (IÁM 4356) Trigonopsis variábilis (IÁM 4443) Hansenula schneggi (IÁM 4269)

ként 1 mói/ad nátrium-L-ghitamátot, nátrium-L- aszpartátot vagy L-alanint alkalmaztunk). A kapott elegyet 37 ”C-on 24 óra hosszat állni hagytuk. Ezután a reakdóelegyet 12000 fordulat/perc sebességgel 3 percig centrifugáltuk, és a kapott felülúszó oldatban aminoeav elemzővel meghatároztuk az LAMPB-tartalmaL A vizsgálatok eredményét IV-X. táblázatban foglaltuk össze.

20

Alkalmazott mikroorganizmus (Actinomyceták)

Streptomyces viridochromogenes (IFO13347) (ATCC 14925) Streptomyces pilosus (IFO 12807) (ATCC 19797)

Termelt L-AMPB mennyisége (mg/ml)

Glu Asp Alá

93

1.4

1.6

0.1

1.1

0.1

11