200181. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kéntartalmú triciklikus laktámok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 200181 B 7. Példa 4S-transz-133,4,6,8,12b-oktahidro-7-metilén-6- oxo-pirido[2,1 -a] [2]benzazepin-4-karbonsav [(VI) általános képletű vegyület] A 6. példa címében szereplő vegyületből 32 mg-ot (0,11 mmól) 1 ml metanolban oldunk, és 0,22 ml 1 mólos lítium-hidroxid-oldatot (0,22 mmól) adunk hozzá. Az oldatot szobahőmérsékleten, nitrogén-atmoszférában 20 órán át keverjük. Areakcióelegyet 10 ml vízzel hígítjuk, mryd 1x10 ml edl-acetáttal extraháljuk. A kapott vizes oldatot IN sósav-oldattal megsavanyítjuk, majd 3x7 ml metilén-kloriddal extraháljuk. A meülén-kloridos eXtraktumokat összeöntjük, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk, Így 21 mg-ot kapunk a cím szerinti vegyületből, kitermelés: 66%. ’H NMR 5 (CDCb): 7,40-7,10 (komplex, 4H), 5,75 (s, 1H), 5,30 (t, 5=3Hz, 1H), 530 (dd, J.=4Hz, Jb=2Hz), 3,98 (d,J=15Hz.lH), 3,85 (d, J=15Hz, 1H), 23-2,3 (komplex, 4H); 13C ’H NMR 8 (CDCb): 17,77, 17,94, 24,43, 25,18, 38,11, 50,84, 52,40, 120,12, 124,73, 126,09, 12730, 12932, 137,03, 138,03,142,72,171,34,174,45. ft" példa [4S-(4a, 7a,12bß]-7-[(benzoil-tio-metil)]- 133,4,6,7,8,,12b-oktahidró-6-oxo-pirido[2,l-a] [2]be nzazepin-4-karbonsav [(I) általános képletű vegyület] A 7. példa címében szereplő vegyületből 115 mgot (0,42 mmól) 7 ml metanolban oldunk, és szobahőmérsékleten, nitrogén-atmoszférában hozzáadunk 59 mg (0,42 mmól) tiobenzoesavat és 65 mikroliter (0,47 mmól) trietil-amint. A reakcióelegyet 24 órán át keverjük - ezen idő alatt a reakció még nem megy teljesen végbe-, az oldatot 1 ml-re bepároljuk, majd további 60 mikroliter (0,43 mmól) trietil-amint és 7 csqpp tiobenzoesavat adunk hozzá. További 24 órás keverés után a reakciót feleslegben adagolt IN sósavoldattal befagyasztjuk, majd etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos oldatot egyszer átmossuk sós vízzel, majd vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Bizonyos mennyiségű tiobenzoesav visszamarad, ezt Kugelrohr-desztillációval távolítjukl el (60 *0933 Pa). Adesztillálási maradékot -190 mg (110%) nyers, cím szerinti vegyület- hűlni hagyjuk, majd nagynyomású folyadékkromatográfiával (73 mm x 250 mm-es, 10 mikron szemcsenagyságú p-porosilból álló oszlop, eluensként 03% ecetsav, 5% izopropanol, 943% hexán,; áramlási sebesség 4 mixere) tisztítjuk, így a cím szerinti vegyületből 35 mg-ot kapunk, kitermelés: 20%. *H NMR 5 (CDCb): 8,00 d, J=7Hz, 2H), 7,60 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 735-7,05 (komplex m, 4H), 535 (m, 1H), 535 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 330-335 (komplex, d, J=10Hz, 1H), 235 (komplex, d, J=10Hz, 1H), 2,00 (komplex, m, 2H), 1,80 (komplex, m,2H). A tiobenzoesavat tiOecetsawal helyettesítve a 8. példa szerinti eljárással állíthatjuk elő a következő vegyületet: [4S-(4a,7a,12bß]-13,3,4,6,7,8„12b-oktahklro-7-[(acetil-tio)-nietil]-6-oxo-pirido[2,1 -a] [2]b epza7epin-4-karborsav. A 8. példa szerinti eljárást követve és a 7. példa címében szereplő telítetlen metil-észterrel helyettesít7 ve a következő vegyületet állíthatjuk elő: [4S(4a,7a,12bß]-133,4,6,7,8„12b-oktahidro-7-[(benzoil-tio)-metil]-6-oxo-pirido[2,1 -a] [2]benzazepŰH4- karbonsav-metilészter. A 8. példa címében szereplő vegyületet diazo-difenil-metánnal kezelve és a terméket kromatográfiás úton elválasztva [4S-(4ot,7a,12bß]-133.4,6,7,8„12b-oktahidro-7-[(benzoil-tio)-metil]- 6-oxo-pirido[2,l-a][2]benzazepin-4-karbonsav-difenil-metilésztert kapunk. Ha ezt a vegyületet gáztalanított metil-alkoholban, nitrogén-atmoszférában rövid ideig nátrium-metoxiddal kezeljük, majd a terméket kromatográfiás úton elválasztjuk, akkor [4S-(4a,7a,12bß]- 133,4,6,73„12b-oktahidro-7-(merkapto-metil)-6- oxo-pirido[2,l -a] [2]benzazepin-4-karbonsav-difenilmetil-észtert kapunk. 9. Példa [4S-(4a,7a,12bß]-133,4,6,7,8„12b-oktahidn>-7- (merkapto-metil)-6-oxo-pirido[2,1 -a] [2]benzazepin- 4-karbonsav [(I) általános képletű vegyület] A 8. példa címében szereplő vegyületből 27 mg-ot (66 mikrontól) 7 ml, argonnal oxigénmentesített metanolban oldunk, szobahőmérsékleten, argon-atmoszférában 350 mikroliter 1M nátrium-metoxidot adunk hozzá, majd 2 órán át keverjük. Ezután az oldatot IN sósav-oldat feleslegével mesavanyítjuk, majd etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos oldatot vákuumban bepárolva a dm szerinti vegyületet kapjuk, ebből nagynyomású folyadékkromatográfiával (73 mm x 250 mm-es, 11 mikron szemcsenagyságú p-porosilból álló oszlop; eluensként 03% ecetsav, 5% izopropanol, 943% hexán, áramlási sebesség 4 ml/perc) 10 mg tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk, kitermelés: 50%. ’H NMR 8 (CDCb): 735-7,00 (m, 4H), 535 (m, 1H), 530 (m, 1H), 5,75 (m, 1H), 330 (dd, J.=18Hz, Jb=8Hz, 1H), 3,10 (dt, Jd=13Hz, Jt=8Hz, 1H), 2,85 (dd, J«=14Hz, Jb=18Hz, 1H), 230 (komplex, m, 2H), 235 (széles d, J-lOHz, 1H), 2,05-130 (komplex, 2H), 1,85 (dd, J.=8Hz, Jb=10Hz, 1H), 1,80-1,65 (komplex, 2N). 13C ’H NMR 8 (CDCb): 17536, 173,42, 136,90, 13638, 130.68, 127,61, 125,71, 125,06, 50,92, 44,78, 35,77, 2630, 25,15, 15,11, 1637. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek vérnyomáscsökkentő hatását úgy határozhatjuk meg, hogy in vitro enzim-inhibíciós vizsgálatokkal mérjük az ACE inhibicióL Jól használható például a Y. Piquilloud, A. Reinharz és M. Roth ÍBiochem. Bt ophvs. Acta. 206. N26 (1970] leírt módszer, melyben a cardobenzil-oxi-fenil-denil-hisztidinil-leucin hidrolízisét mérjük. In vivo méréseket is végezhetünk, például angiotestin I-gyel kezelt normotenzív (normális vérnyomásé) patkányokon, a J. R. Weeks és J. A. Jones ÍProc. Spc. Exp. Bioi. Med.. 104, 646 (I960)] által leírt módon, vagy egy úgynevezett „high renin rat modellel, például S. Koletzky és munkatársai ÍProc. Spc. Exp. Bioi. Med.. 125,96 (1967)] módszerével Az alábbi táblázat egy, a találmány szerinti eljárással előállított vegyület, mint ACE-inhibitor hatását mutatja. Ezt a hatást egy jól ismert, valamely szubsztrátnak egy termékké történő enzimmel elősegített átalakításának - vagyis az enzim aktivitásának - méré8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
