199899. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 80577 jelű poliéter antibiotikum és ezt tartalmazó takarmány-kompozició előállítására
1 HU l<W8‘W B 2 LSD; két-farkú l-leszt; szignifikáns P < 0,01 .zinlen; C3 > W% felső konfidencia-határ. Az A80577 vegyületek tipikusan hatásosak a propionát növelésére, és ezáltal javítják a takarmányhasznosítás hatékonyságát, amikor szájon át kérődzőknek adják ezeket 0,01 mg/kg/nap és 1,0 mg/kg/nap közti mennyiségben. A beadás előnyös mennyisége 0,06 mg/kg/nap és 0,35 mg/kg/nap között van. A beadás előnyös módszere az, hogy a vegyületet összekeverjük az állat takarmányával. A kérődző állatokban takarmányhasznosítás növelésére kialakított takarmánykompozíciók tipikusan 0,5 — 50 g A80577 vegyületet tartalmaznak 1 tonna takarmányban, előnyösen 2-15 grammot tonnánként. Amint lentebb leírtuk, az A80577 vegyületek aktívak anaerob baktériumok ellen, beleértve a Clostridium períringenst is. Az A80577 vegyületek ezért előnyösek lehetnek enteritis kezelésében (és megelőzésében is) csirkékben, sertésben, szarvasmarhában és juhban. Az A80577 vegyületek hasznosak lehetnek az enterotoxéma kezelésében is kérődzőkben. Az A80577 vegyüleieket állatoknak orálisan vagy parenterálisan lehet beadni. Az A80577 vegyületek beadásának legpraktikusabb módja a kiszerelés a takarmányadagban. A legkülönbözőbb takarmányokat, beleértve a közönséges száraz takarmányokat, folyékony takarmányokat és szemcsézett takarmányokat, lehet alkalmazni. Bár a beadás előnyös módja a bekeverés az állatok takarmányába, be lehet adni ezeket más módon is, pl. tabletták, folyadékok, pirulák vagy kapszulák formájában. Az egyedi dózis egységek pl. olyan mennyiségű A80577 vegyületet tartalmazzanak, amely a kezelendő állat alkalmas napi dózisának közvetlenül megfelelnek. A gyógyszerek kiszerelésének módszerei az állati takarmányokban jól ismertek. Előnyös módszer koncentrált gyógyszer-premixet készíteni, amelyet viszont a gyógyszerrel ellátott takarmányok kiszerelésére lehet alkalmazni. A tipikus premixek 1 - 200 gramm gyógyszert tartalmaznak 1 font ( 453,6 g) premixre számítva. A premixek lehetnek folyékony vagy szilárd készítmények. Az állatoknak való takarmány végső kiszerelése függ a beadni kívánt gyógyszer mennyiségétől. A kiszerelés, keverés és szemcsézés általános módszereit alkalmazhatjuk az AS0577 vegyületet tartalmazó takarmányok készítéséhez. Az A80577 vegyületeket kiszerelhetjük parenterális beadáshoz is az állatgyógyászati szakterületen megismert módszerekkel. Az A80577 vegyületeket tartalmazó hatékony injektálható kompozíciók lehetnek vagy szuszpenzió, vagy oldott formájúak. Az oldat formában az A80577 vegyületet fiziológiailag elfogadható hordozóban oldjuk fel. Az ilyen hordozók megfelelő oldószert, konzerválószereket, pl. benzil-alkoholt, ha szükséges, és pufferokat tartalmaznak. A hasznos oldószerek közt találjuk pl. az alkoholokat, glikolokat, vagy semleges olajokat, pl. étolajokat vagy nagy mértékben finomított ásványolajokat. 8 Az injektálható szuszpenziós kompozíciókat úgy készítjük el, hogy hordozóként a vegyületet nem oldó anyagot alkalmazunk megfelelő adjuvánssal együtt. A nem-oldó anyag lehet pl. víz vagy glikol, pl. polietilénglikol. Megfelelő, fiziológiailag elfogadható adjuvánsok szükségesek, hogy a vegyületet a szuszpenziós kompozíciókban szuszpendálva tartsuk. Az adjuvánsokat a sűrítő anyagok közül választhatjuk ki, ilyenek pl. a karboximetil-cellulóz, polivinil-pirrolidon, zselatin és az alginátok. Több felületaktív anyag is hasznos a vegyületek szuszpendálására. Lecitin, alkil-fenol-polietilén-oxid adduktok, naftalinszulfonátok, alkil-benzolszulfonátok, és a polioxietilén-szorbitán-észterek hasznos szuszpendáló szerek a folyékony nemoldó anyagokban való szuszpendáláshoz. Több vegyület, amely hat a nem-oldó folyadék hidrofilitására, sűrűségére és felületi feszültségére, segíthet az injektálható szuszpenziók készítésében egyes esetekben. így pl. szilikon habgátlók, glikolok, szorbit, és cukrok hasznos szuszpendáló szerek lehetnek. Abból a célból, hogy teljesebben bemutassuk a jelen találmány szerinti műveleteket, a következő példákat adjuk meg. 1. példa A80577 antibiotikum előállítása Actinomadura verrucosospora törzset alkalmazva A. Actinomadura verrucosospora rázott lombikos fermentációja Actinomadura verrucosospora NRRL 18236 tenyészetét vagy iiofilizett szemcseként vagy folyékony nitrogénben fenntartott szuszpenzióként alkalmazzuk vegetatív tápközeg beoltására; ennek a tápközegnek az összetétele a következő; Vegetatív vagy oltó tápközeg Alkotórész___________________Mennyiség (g/1) Glükóz 10,0 Oldható keményítő 20,0 Enzimmel hidrolizált kazein 5,0 Élesztőkivonat 5,0 CaC03 1,0 Ionmentesített víz 1 literre *N — Z Amine A, Humko-Sheffield Chemical, Norwich, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok. Ferde agarokat vagy lemezeket készítünk 2,5% agar hozzáadásával az oltó tápközeghez. Az inokulált ferde agart 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk, mintegy 10-14 napon át, az érett ferde tenyészetet steril kaccsal lekaparjuk, hogy a spórákat meglazítsuk, és a micéliumfonatot felaprítsuk. Az így kapott meglazított spóra-micélium keverék mintegy 1/4-él használjuk 50 ml első stádiumú olló tápközeg beoltásához. Az inokulált első stádiumú tápközeget 250 ml-es Erlenmeyer lombikban inkubáljuk 30 °C hőmérsékleten mintegy 72 órán át olyan rázógépen, amely 5,08 cm-es körben tér ki, 250 fordulat/perccel. Ezt az inkubáll első stádiumú tápközeget (1,00 ml) alkalmazzuk 50 ml termelő tápközeg beoltására; a termelő tápközeg összetétele az 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
