199899. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A 80577 jelű poliéter antibiotikum és ezt tartalmazó takarmány-kompozició előállítására
1 HU 199899 B 2 A "valamely A80577 vegyület" kifejezést itt úgy használjuk, hogy jelöli az A80577 antibiotikumot j(l) képlet] és az A80577 antibiotikum valamely gyógyászat ilag elfogadható bázisos sóját. Az A80577 antibiotikumot az Actinomadura 5 verrucosospora egy A80577-termelő törzsének, az NRRL 18236 törzsnek a tenyészete termeli, ahogyan ezt itt leírjuk. Az antibiotikum süllyesztett aerob körülmények között keletkezik megfelelő tápközegben; ezt a lápközegből különböző, a szakterületen ismert izolálási és tisztítási módszereket alkalmazva nyerhetjük ki. Az A80577-termelő organizmus tenyészetét deponáltuk, így részévé váll a Midwest Area Northern Regional Research Center, Agriculture Research Service, U.S. Department of Agriculture tenyésztörzs gyűjteményének (1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604), ahol ez a köz számára rendelkezésre áll NRRL 18236 deponálási számon. Ennek az organizmusnak a taxonómia tanulmányait Mertz P. Frederick (Lilly Research Laboratories) végezte el. Ezekre a tanulmányokra alapozva az organizmus az Actinomadura nemzetséghez tartozik [Lechevalier és Lechevalier, 1970. Prouser H. által szerkesztett könyvben: "The Actinomycetales", kiadó: VEB Gustav Fischer Verlag, Jena (393-405. oldal)]. Az International Streptomyces Project (ISP) által ajánlott módszereket követjük a Streptomyces fajok jellemzésére [Shirling E.B. és Gottlieb D.: "Methods for Characterization of Streptomyces species', Int. J. Syst. Bacterial. 16(3), 313-340 (1966)]. A melanoid pigment termelést (kromogenicitást az ISP N° 1-gyel (tripton-élesztőkivonan tápközeg); ISP N° 6-lal (peplonélesztőkivonal-vas agar), és ISP N° 7-tel (tirozin agar) határozzuk meg. A keményítő hidrolízist keményítő jelenlétében vizsgálva határozzuk meg jóddal ISP N° 4 (szervetlen só-keményítő agar) lemezeken. A morfológiát optikai fénymikroszkópot alkalmazva tanulmányozzuk. Tapogató elektronmikroszkópot (SEM) alkalmazunk a spóra felületi ornamentika tanulmányozásához. Az ICSS - NBS Centroid Color Charts, 2016. standard mintát (national Bureau of Standards, 1958, U.S. Department of Commerce, Washington, D.C.) és a Color Harmony Manual-t (4. kia- 10 dás, Color Standards Department, Container Corporation of America, Chicago, Illinois, 1958) alkalmazzuk, hogy megjelöljük a színek nevét a hátoldalon illetve a légspóra-tömegen. A diaminopimelinsav (DAP) izomerjeit és a 15 szénhidrátokat a teljes sejtek hidrolizátumaiban Becker és munkatársai kromatográfiás módszereivel |Becker B., Lechevalier M. P., Gordon R.E. és Lechevalier H.A.: "Rapid Differentiation between Nocardia and Streptomyces by Paper 20 Chromatography of Whole-cell Hydrolysates", Appl Microbiol. 12, 421—423 (1964)] és Lechevalier módszereivel [Lechevalier M.P. és Lechevalier H.: "Chemical Composition as a Criterion in the Classification of Aerobic 25 Actinomycètes" Int. J. Syst. Bacteriol. 20, 435- — 443 (1970)] határozzuk meg. Az antibiotikumokra való rezisztenciát ISP N° 2 agar lemezekre oltott tenyészet felületére helyezett antibiotikum érzékenységi korongokkal 30 mérjük. Tenyésztési jellemzők Az A80577 tenyészete jól nő mind komplex, mind meghatározott tápközegeken. A légspóratömeg mérsékelten képződik, és fehér színű. A 35 hátoldal sárgásfehér és halványsárga közti színű. Jellegzetes pigmentek nincsenek. Oldható pigmentek nem figyelhetők meg, kivéve egy halvány sárgásbarna pigmentet néhány tápközegben. Ezeket a tenyésztési jellemzőket az I. Táblázat-40 ban adjuk meg. I. TÁBLÁZAT Az A80577 tenyésztési jellemzői 30 °C hőmérsékleten 18 napos inkubálás után ISP N°2 G: Bőséges R: 88.d.Y Am: Nyom: a fehér Sp: Semmitől l.y Br-ig Czapek tápközeg G: Közepes R: 92, y fehér Am: Közepes: a fehér Sp: Semmi ISP N°3 G: Közepes R: 9^.y fehér Am: Közepes: a fehér Sp: Semmi Paradicsompürézabliszt agar ♦ G: Gyenge R: 88.d.Y Am: Gyenge: a fehér Sp: Semmi ISP N°4 G: Jó R: 92.y fehér Am: a fehér Sp: Semmi Burgonya-sárgarépa agar G: Jó R: 89.p.Y Am: Jó: a fehér Sp: Semmi ISP N°5 G: Bőséges R: 89.p.Y Am: Jó: a fehér Sp: Semmi Jensen agar G: Gyenge R: 92.y fehér Am: Gyenge: a fehér Sp: Semmi 3
