199871. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dezaza-purin-nukleozid-származékok előállítására, valamint eljárás az említett vegyületeket tartalmazó vírusellenes szerek előállítására
1 HU 199871 B 2 és Ott szerint (J. Am. Chem. Soc. 87, /1965/ 178S) alakítjuk át 5’-trifoszfáttá. 29. példa 6- amino-7-dezaza-2’.3’-didehidro-9-béta-D-robt)furanozil-purin-5’-trifoszfát UV spektrum (7,0 pH-jú pufferben): lamb* da1?va)l= 271 nm (epszilon = 13200).-’‘P-NMR-spektrum (d20) = delta -10,57 (d, J ~ 19Hz, P alfa), delta = - 22,19 (t, J = 19Hz, P béta), delta = - 8,39 (d, J = 19Hz, P gamma). 30. példa 7- dezaza-2’,3’-didezoxi-2’,3’-didehidro-9-béta-D-ribofuranozil-purin-ő-on Vékonyrétegkromatográfia (kloroform és metanol 95:5 arányú elegyében): Rf= 0,15. UV spektrum (metanolban): lambdamax = 259, 278 (SH) epszilon = 9600,6100. 31. példa 4-amino-7-(2’-dezoxi-béta-D-treopenlofuranozil)-7H-pirrolo|2,3-d|pirimidin Vékonyrétegkromatográfia (kloroform és metanol 7:3 arányú elegyében): Rf = 0,8. UV spektrum (metanolban), lambdamax= 271 (epszilon = 12500). 32. példa 6-amim)-7-dezaza-2’.3’-didezoxi-3’-fluor-9-béta-D-ribufuranozil-purin-5-trifoszfát UV spektrum (7,0 pH-jú pufferben): lamb^aiaax = 270 nm (epszilon = 16650). 3‘P-NMR-spektrum (d20): delta = -10,66 (d, J = 19Hz, P alfa), delta = -21,71 (t, j = 19Hz, P béta), delta = - 6,60 (d, J = 19Hz, P gamma). dunk 5 ml trimetil-foszfátban és jeges hűtés közben 0-4 ®C hőmérsékleten elegyítjük 0,2 ml (2,2 mmól) foszfor-oxi-trikioriddal. A reakcióelegyet 10-15 óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk, 5 majd jéggel hidrolizáljuk, és lM-os vizes trietilammónium-hidrogén-karbonát oldattal azonnal semlegesítjük. Az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot vízben felvesszük és ioncserélő oszlopra ( DEAE-Sephadex, HCO3-, 10 40x2,5 cm) visszük. Vizes mosás után 1 liter vízzel és 0,5 M trielil-ammónium-hidrogénkarbonáttal lineáris gradiens alkalmazásával eluáljuk. Az egyesített frakciókat csökkentett nyomáson bepároljuk, az olajos maradékot 15 metanollal többször lepároljük a trietil-ammónium-hidrogén-karbonát hidrolizálására. Az elméleti kitermelés 56%-ának megfelelő 5’-monofoszfátot kapunk színtelen, habos anyag formájában. 20 UV-spektrum (7,0 pH-jú pufferben): lambdalftax= 259 nm (epszilon = 13400). “'P-NMR-spektrum (D20/H20 3:1, 100 mM EDTA): delta = 4,65 (s). 34, példa 25 Vírusellenes aktivitás A 2’,3’-didezoxi-nukleozidok N-glikozidos kötésének stabilitása kapcsolatban van a vírusellenes aktivitással. A kötés hidrolízisét 25 °C-nál, három külön- 30 böző töménységű sósavat használva vizsgáltuk. Ehhez az UV-abszorpció (E,) csökkenését 258 nm-nél mértük. Az abszorpció-idő görbén keresztül a hidrolízis sebességi állandóját (k) és a felezési idő értékeket (T/2) a következő egyenlő- 35 ség alapján állapítottuk meg: 33. példa 2-amino-7-dezaza-2’.3'-didezoxi-9-béta-D-ribofuranozil-purin-6-on-5’-monofoszfát-trietil-ammóniumsó 250 mg (1 mmól) 2-amino-7-dezaza-2’,3’-didezoxi-9-béla-D-ribofuranozil-purin-6-onl felolk- l/txln(E0 —E^j/fEt-E^). Az egyenlőségben E0 az abszorpció a t = o időben és E(X)az abszorpció a reakció teljes befejeződése után. TM A 2’,3’-didezoxiadenozint (a) és a 6-amino-8- -aza-7-dezaza-2’,3’-didezoxi-9-béta-D-ribuforanozil-purint (b) hasonlítottuk össze 25 °C-on. 1. Táblázat InHCl______________0,1 n HC1______________0,01 n HC1 T/2 — 1,9 min 31,5 min k — 0,363 min'1 0,022 min'1 T/2 0,83 mn 20,4 min 280,0 min k 0,85 min'1 0,033 min'1 0,0025 min"1 Az I. Táblázat mutatja, hogy a találmány szerinti (b) vegyület több mint tízszer stabilabb, és ezáltal vírus elleni aktivitása nagyobb, mint az (a) vegyületé. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) általános képletű dezaza-purinnukleozid-származékok - mely képletben X nitrogénalom vagy metincsoport, W nitrogénatom vagy a C-R4 általános képletű csoport, melyben R4 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, hidrogénatom, halogénalom, hidroxilcsoport, merkapto-, 1-4 szénatomos aikoxi- vagy aminocsoport, R2 azonos Rügyei, valamint 1 — 4 szénatomos alkil-tio- vagy di(l — 4 szénatomos alkil)-aminoalkil-csoporttal helyettesített aminocsoportot is 55 jelenthet, R3 jelentése hirogénatom vagy 1 — 4 szénatomos alkilcsoport, R5 jelentése hidrogénatom, R6 és R7 jelentése egyaránt hidrogénatom, 60 vagy az R6 és R7 csoportok egyike halogénatom vagy azidocsoport vagy R6 és R7 csoportok egyike hidroxilcsoportot is jelenthet, ha X jelentése metincsoport, vagy Rs és R7 együtt egy további kötést jelenthet a 65 2’- és 3’-helyzetű szénatomok között, és 16
