199870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusellenes hatású purin-arabinozid származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
t HU 199870 B 2 2-metoxi-etanolban oldunk és 0,87 g palládium-kloridhoz adagolunk. Az elegyet Parr készülékben előredukáljuk. Ezután 50 psi-nél 30 percig hidrogénezzük, az első 15 perc után a hidrogénatmoszférát cseréljük. A katalizátort cellil ágyon történő szűréssel eltávolítjuk és metanollal mossuk. A szűrletet Dowex-1 (HCO3) hozzáadásával semlegesítjük. A gyantát szűréssel eltávolítjuk és metanollal mossuk. A szűrletet vákuumban lepároljuk, a maradékot kloroformmal eldörzsöljük. A nyersterméket forróvízzel mossuk, forró metanolban oldjuk, szűrjük, hűtjük és a kivált szilárd anyagot gyűjtjük. Forróvízből történő átkristályosítás után a terméket hidrát formában nyerjük ki. 44,5 mg anyagot kapunk. Olvadáspont: 224-225 °C. Elemanalízis a CHH|4N504C1 x H2O összegképletre: számított: C: 39,58, H: 4,48, N: 20,98%, talált: C: 39,27, H: 5,16, N: 20,83%. 5. példa 9-/?-D-Arabino-furanozil-6-ciklopropil-amino-9H-purin előállítása 0,5 g (2,85 mmól) 6-ciklopropil-amino-purint (amelyet úgy készítünk, hogy a 6-klór-purin (Sigma Chemicals St. Louis, MO USA terméke) klórcsoportját acetonitrilben nukleofil helyettesítési reakcióval ciklopropil-aminra cseréljük) és 1,39 g (5,71 mmól) uracil-arabinazidot (P. F. Torrence és munkatársai: J. Med. Chem. 22(3), 316-319 /1979/) 100 ml 0,04% kálium-azidot tartalmazó 10 mmólos kálium-foszfát oldatban pH = 7,4-nél szuszpendálunk. Tisztított uridinfoszforilázt (6000 nemzetközi egységet) és purin-nukleozid-foszforilázt (8400 nemzetközi egységet) (T. A. Krenitsky és munkatársai: Biochemistry 20, 3615 /1981/ és 4.381.444. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) adagolunk a szuszpenzióhoz és 35 °C-on kevertetjük. 120 óra elteltével a reakcióé le gyet szűrjük és a szűrletet Dowex — 1-hidroxid gyantát tartalmazó oszlopon (2,5x10 cm-es) kromatografáljuk. Az oszlopot 90 térfogat%-os vizes metanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 30 térfogat%-os vizes n-propanolban oldjuk és BioRad P —2 oszlopon (5x90 cm-es) kromatografáljuk. Az oszlopot 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk. A reakcióban képződő csapadékot forró metanolból átkristályosítjuk és 0,0357 g anyagot kapunk, amely az elemzés szerint 6-ciklopropil-amino-purin-9-/?-D- arabino-furanozid monohidrátja. Az álkristályosításból eredő szűrletet BioRad P-2 gyantaoszlopon (5x90 cm-es) a fentiekben leírt módon kromatografáljuk. Mindkét kolonnáról egyesítjük a terméket tartalmazó frakciókat és az oldószert vákuumban lepároljuk. 0,342 g 6-ciklopropil-amino-purin-9-/j-D-arabino-furanozid monohidrátja. Az átkristályosílásból eredő szűrletet BioRad P-2 gyantaoszlopon (5x90 cm-es) a fentiekben leírt módon kromatografáljuk. Mindkét kolonnáról egyesítjük a terméket tartalmazó frakciókat és az oldószert vákuumban le pároljuk. 0,342 g 6-ciklopropil-amino-purin-9-/J-D-arabino-furanozidot kapunk, amely az elemzés szerint 0,8 hidrától és 0,3 CjHgO-t tartalmaz. Elemanalízis a C13H17N504 x IH2O összegképletre: számított: C: 48,00, H: 5,89, N: 21,53%, talált: C: 48,05, H: 5,89, N: 21,55%. Az NMR és a tömegspektroszkópiás adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 215 °C. 6. példa 9-/?-D-Arabino-furanozil-6-etil-(metil)-amino-9H-purin előállítása 6-Etil-(metil)-amino-purint állítunk elő úgy, hogy a 6-klór-purin (Sigma Chemicals, St. Louis, MO, USA terméke) klórcsoportját nukleofil helyettesítési reakcióval 6-etil-(metil)-amino-csoportra cseréljük acetonitrilben. 0,5 g (2,8 mmól) 6-etil-(metil)-amino-purint és 1,38 g (5,6 mmól) uracil-arabinozidot 575 ml 10 térfogat% n-propanolt tartalmazó 10 mmólos kálium-foszfát 0,04%-os kálium-azid oldatban szuszpendálunk pH = 7,4 értéknél. Tisztított uridin-foszforilázt (6000 nemzetközi egység) és purin-nukleozidfoszforilázt (8400 nemzetközi egység) (T.A. Krenitsky és munkatársai: Biochemistry 20, 3615 /1981/ és a 4.381.444. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) adunk az elegyhez és az oldatot 37 °C-on keverteljük. 19 nappal később a reakcióelegyet szűrjük és a szűrletet egy 2,5x13 cm-es Dowex - 1-hidroxid gyantát tartalmazó oszlopon kromatografáljuk. A gyantát 90 térfogat%-os vizes metanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 30 térfogat%-os vizes normál propanolban oldjuk és BioRad P —2 oszlopon (7,5x90 cm-es) kromatografáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és liofilizálás után 0,680 g 6-etil-(metil)-amino-purin-9-/?-D-arabino-furanozidot kapunk. Elemanalízis a C^HiqI^O,} összegképletre: számított: C: 50,48, H: 6,19, N: 22,64%, talált: C: 50,36, H: 6,25, N: 22,52%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 159 #C. 7, példa 9-/3-D-Arabino-furanozil-2-amino-6-metoxi-9H-purin előállítása 2-amino-6-metoxi-purint készítünk úgy, hogy -2-amino-6-klór-purin (Sigma Chemicals St. Louis, MO, USA terméke) klórcsoportját nukleofil helyettesítéssel metanollal és nátrium-hidriddel tetrahidrofuránban metoxiesoportra cseréljük. 1,05 g (6,4 mmól) 2-amino-6-metoxi-purint összekeverünk 1,75 g (7.04 mmól) uracilarabinozid 7 térfogat% n-propanolt tartalmazó 35 ml 10 mmólos kálium-foszfáttal készített oldatával. A pH-t 6,75 értékre állítjuk be. Tisztított purin-nukleozid-foszforilázt (18000 egység) és uridin-foszforilázt (1020 egység) adagolunk az elegyhez és az oldatot 37 °C-on inkubáljuk. 26 nap elteltével a reakcióelegyet szűrjük és a szűrletet Dowex— 1-formát gyantát tartalmazó 2x7 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
