199870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusellenes hatású purin-arabinozid származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199870 B 2 cm-es oszlopon kromatografáljuk, miután a pH-t 10,5-re állítottuk be tömény ammónium-hidroxiddal. Az oszlopot 7%-os vizes n-propanollal cluáljuk és a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 25 ml vízzel extraháljuk és a szűrletet centrifugálással választjuk el a szilárd anyagoktól. A felső rétegből szobahőmérsékleten történő pihentetés után 2-amino-6-metoxi-purin-9-/?-D-arabino-furanozid kristályok válnak ki, ezt vákuumban szárítjuk és így 0,327 g kívánt terméket kapunk. Elemanalízis a CuH^^C^ összegképletre: számított: C: 44,44, H: 5,09, N: 23,56%, talált: C: 44,49, H: 5,13, N: 23,52%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 210 °C. 8. példa 9-/?-D-Arabino-furanozil-6-n-propoxi-9H-purin előállítása 1 g (5,6 mmól) 6-n-propoxi-purint (Sigma Chemicals, St. Louis, Mo, US terméke) összekeverünk 10,1 mmól uracil-arabinozid 545 ml 7 térfogat% n-propanolt tartalmazó 10 mmólos kálium-foszfáttal készített oldatával. Tisztított uridin-foszforilázt (680 nemzetközi egység) és purin-nukleozid-foszforilázt (12000 nemzetközi egység) adunk az elegyhez és a reakcióelegvet 35 °C-on keverteljük. Az elegyet 58 nap elteltével szűrjük és a szűrletet 3 °C-on tároljuk 20 órán keresztül. A kapott csapadékot centrifugálással elválasztjuk, 30 lérfogat%-os vizes n-propanolban oldjuk és Dowex-l-formát gyantát tartalmazó oszlopon (2,5x5 cm) kromatografáljuk, miután a pH-t tömény ammónium-hidroxiddal 10,5- re állítottuk be. Az oszlopot 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk és a terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot n-propanolban oldjuk és BioRad P —2-t tartalmazó oszlopon (5x90 em-es) kromatografáljuk. Az oszlopot 30 térfogat%-os vizes n-propanollal eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot ezután vízben oldjuk és BioRad P - 2-t tartalmazó oszlopon kromatografáljuk (5x90 cm-es). Az oszlopot vízzel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és liofilizálás után 0,758 g 6-n-propoxi-purin-9-j3-D-arabino-furanozidot kapunk, amelyet monohidrátként analizálunk. Elemanalízis a CJ3H18N4O5 x IH2O összegképletre: számított: C: 47,56, H: 6,14, N: 17,06%, talált: C: 47,63, H: 6,13, N: 17,11%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. Op.: 147- -149 °C. 9. példa 9-(5-Q-Bcnzoil-ft-D-arabino-furanozil)-6- -metoxi-9H-purin előállítása 0,283 g (1,0 mmól) 3. példában előállított 9-/3- -D-arabino-furanozil-6-metoxi-9H-purint 5 ml vízmentes dimetil-acetamidban oldunk és 4sC-ra hűtünk. 0,155 g (1,1 mmól) benzoil-kloridot adunk hozzá. A reakcióelegyet 24 órán keresztül argonatmoszférában kevertetjük és lassan szobahőmérsékletig hagyjuk melegedni. Szobahőmérsékleten újabb 1,1 ekvivalens benzoil-kloridot adunk hozzá és a keverést további 24 órán keresztül folytatjuk. A reakciót 50 ml jeges vízre történő öntéssel befagyasztjuk, a reakcióelegyet CHCl3-mal (3x30 ml) extraháljuk és a szerves fázisokat magnézium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, a maradékot gyorskromatográfiával tisztítjuk szilikagélen (25,0 g, 2,5x15 cm). A kloroformot lépcsőzetesen kloroform/aceton 1:1 arányú keverékével váltjuk fel. Azokat a frakciókat, amelyek Rpértéke 0,21 (szilikagélen kloroform/aceton 1:1 arányú keverékével) egyesítjük és így 92 mg kívánt terméket kapunk. Olvadáspont: 202-204 °C. Elemanalízis a Ci8HigN406 összegképletre: számított: C: 55,96, H: 4,70, N: 14,50%, talált: C: 56,04, H: 4,74, N: 14,40%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. 10, példa 6-Metoxi-9-[5-0-(4-metil-fenil-szulfonil)-/?-D-arabino-furanozill-9H-purin előállítása 0,312 g (1,63 mmól) frissen átkristályosított 4- -toluol-szulfonil-kloridot és 0,308 g (1,09 mmól) 3. példában előállított 9-/v-D-arabino-furanozil-6-metoxi-9H-purint 25 ml vízmentes acetonitrilben szuszpendálunk és jégfürdőn 3 “C-ra hűtjük. Ekkor 5 ml piridint adunk az elegyhez a nukleozid oldására. Az oldatot argon atmoszférában 3 °C-on egy órán keresztül kevertetjük, majd 42 órán keresztül -15 °C-on tartjuk. A reakciót 3 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal fagyasztjuk be. Mintegy 10 ml-re bepároljuk, majd 95%-os etanollal együttesen desztilláljuk. A maradékot a lehető legkevesebb szilikagélen abszorbeáljuk és szilikagél gyorskromatografáló oszlophoz adjuk (25,0 g, 2,5x15 cm) CH2Cl2/MeOH 15:1 arányú keverékében. 450 ml ilyen oldószerrel eluálunk, majd 550 ml CH2Cl2/MeOH 10:1 arányú keverékével. Három UV-ben abszorbeáló anyagot kapunk így. Azokat a frakciókat, amelyek egy Rf = 0,42-es anyagot tartalmaznak (szilikagélen C^C^/MeOH 10:1 arányú keverékében) egyesítjük és tovább tisztítjuk három egymás utáni szilikagéles preparatív kromatografáló lemezen, először CH2Cl2/MeOH 10:1 arányú keverékét használjuk, majd a másik két lemezen aceton/CH2Cl2 1:1 arányú keverékét). így 88 mg átlátszó üvegszerű terméket kapunk, amely a kívánt anyag. Olvadáspont 177—181 °C. Elemanalízis a Cjg^üN^^SxO.ló^O öszszegképletre: számított: C: 49,23, H: 4,66, N: 12,76%, talált: C: 49,28, H: 4,71, N:12,71%. Az NMR és a tömegspektroszkópiai adatok összhangban vannak a szerkezettel. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
