199866. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fluor-citidin-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199866 B 2 Sarcoma 180, Meth A fibrosarcoma 6s UV 2237 fibrosarcoma ellen kifejtett tumorellenes hatás összehasonlító vizsgálata A találmányunk szerinti eljárással előállítható új vegyületek egyik képviselője (1. példa) tumorellenes hatását három patkány- ill. egértumor modellen hasonlítjuk össze az S’-dezoxi-5-fluor-uridin és 5’-dezoxi-5-fluor-citidin aktivitásával. Egerekbe szubkutáns módon Sarcoma 180-t, Meth A fibrosarcomát, illetve UV 2237 fibrosarcomát fecskendezünk a 0. napon. Az egereknek a teszt-vegyületet naponta hétszer orálisan adagoljuk az 1. naptól. A hatékonyságot a tumorral való beoltás utáni 14. napon mért adatok alapján, terápiás hányados segítségével fejezzük ki |EDmax/ED50; ahol EDmax a maximális tumorgátlást előidézd dózis]. Az eredményeket az 5. táblázatban foglaljuk össze. 5. táblázat Sarcoma 180, Meth A fibrosarcoma és UV 2237 fibrosarcoma ellen kifejtett tumorellenes hatás összehasonlító vizsgálata Teszt- Terápiás hányados-vegyület S180 Meth A UV 2237 példa sorszáma 1. 5’-dezoxi-5-fluor-2,3 2,0 4,8-citidin 5’-dezoxi-5-fluor-2,0 1,2 1,0-uridin 2,4 1,1 1,6 Akut toxicitás Az (1) általános képletű vegyületek egyes képviselőinek (1., 5., 9., 24., 34., 46. és 47. példa) akut toxicitását egéren orális adagolás mellett határozzuk meg. A teszt szerint kapott LD50 minden esetben 2000 mg/kg feletti érték. Eljárásunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk. Referencia példa a) 245 mg 5’-dezoxi-5-fluor-citidint, 354 mg tercier butil-dimetil-szilil-kloridot és 284 mg Példa R sorszáma imidazolt 1,5 ml dimetil-formamidban oldunk. A reakcióelegyet nitrogén-atmoszférában 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd vízbe öntjük és etil-acetáttal extraháljuk. Az 5 extraktumot vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. 431 mg 2’,3’-bisz-0-(tercier butil-dimetil-szilil)- 5’-dezoxi-5-fluor-citidint kapunk. MS 473 (M+). b) 490 mg 5’-dezoxi-5-fluor-citidin, 418 mg p- 10 -toluol-szulfonsav-monohidrát és 984 /il 2,2-dimetoxi-propán 10 ml acetonnal képezett oldatát szobahőmérsékleten másfél órán át keverjük. Az oldathoz 900 mg nátrium-hidrogén-karbonátot adunk és az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán 15 át keverjük. A kiváló csapadékot szűrjük és acetonnal mossuk. Az egyesített szűrleteket vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagéloszlopon végzett kromatografálással és diklórmetán/metanol eleggyel történő eluálással tisz- 20 títjuk. 570 mg 5’-dezoxi-5-fluor-2’, 3’-0-izopropilidén-citidint kapunk. MS 286 (MH + ). A pikrát 169-171 °C-on olvad. 1. példa a) 9,46 g, az a) referencia példa szerint előál-25 lított 2’,3’-bisz-0-(tercier butil-dimetil-szilil)-5’dezoxi-5-fluor-citidint, 3,48 g vajsavanhidridet és 2,93 g 4-(dimetil-amino)-piridint 150 ml metilén-kloridban oldunk. A reakcióelegyet egy éjjelen át keverjük, majd vízzel mossuk, vízmentes 30 nátrium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. 9,75 g N4-butiril-2’,3’-bisz-0-(tercier butil-dimetil-szilil)-5’-dezoxi-5-fluor-citidin kapunk. MS 544 (MH + ). b) 9,75 g, az a) bekezdés szerint előállított ve-35 gyületet 80 ml tetrahidrofuránban oldunk, amely 80 millimól tetrabutil-ammónium-fluoridot tartalmaz. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten másfél órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagél- 40 oszlopon végzett kromatografálással, etil-acetát/ /metanol eleggyel történő eluálással, majd metanolos átkristályosítással tisztítjuk. 4,5 g N4-butiril-5’-dezoxi-5-fluor-citidint kapunk. Op.: 156- —157 °C; MS 316 (MH+). 45 2-3. példa 50 Az 1. példában ismertetett eljárással analóg módon az alábbi (I), (V) általános képletű vegyületeket állítjuk elő: Op. °C Átkrist. MS oldószer 2. acetil 157-159 etanol 288 (MH + ) 3. 3,4,5-trimetoxi-benzoil 170-171 etil-acetát és etanol 440 (MH + ) 7
