199861. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetradekanoilcsoporttal helyettesített 1-0-foszfono-D-glükopiranóz-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199861B 2 parenterálisan, előnyösen i.p. beadva napi dózis esetében, osztott dózisokban 2—4-szer naponta egységdózis formájában, amely a bekevert hatóanyagból körülelül 0,025 — 35 mg-ot tartalmaz, vagy a hatóanyagot késleltetett formában tartalmazza. Egy javasolt teljes egyetlen adjuváns dózis legfeljebb 70 mg hatóanyagot tartalmaz. Immunmoduláló hatásukat tekintve az (I) általános képletű vegyületek javalltak adjuvánsokként alkalmazva vakcinákban is. Erre a felhasználásra a javasolt dózis körülelül 0,5 — 100 mg, előnyösen kb. 70 mg, beadva a vakcinálás napján, és megfelelő ismétléssel ugyanebben a dózisban 2—4 héttel ezután. Az (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények a szokásos galenusi eljárásokkal előállíthatók, például a szokásos, gyógyszerészetileg elfogadható hígítókkal vagy hordozókkal végzett keveréssel. A készítmények előállíthatók például injektálható oldatok alakjában. Ezeknek előállítása ugyancsak a találmány oltalmi körébe tartozik. A találmány szerinti eljárás bemutatására — az oltalmi kör korlátozása nélkül — a következő példák szolgálnak. A vegyületek 20 - 50%-os kitermeléssel állíthatók elő. 1. példa 2-Dezoxi-3-Q-[(R)-3-hidroxi-tetradekanoil|-2-[ ( S)-3-hidroxi-tetradekanoil-amido|-l-O-foszfono-q -D-glükopiranóz a) 4,6-0-Benzilidén-3-0-[(R)-3-hidroxi-tetradekanoi!]-2-((S)-3-hidroxi-tetradekanoil-amidoJ-2-dezoxi- 1-O-foszfono-q -D-glükopiranóz 3,9 g 4,6-0-benzilidén-2-[(S)-3-benzil-oxi-tetradekanoil-amido]-2-dezoxi-l-0-foszfono-c*-D-glükopiranózt 2 g (R)-3-benzil-oxi-tetradokánsavat és 50 mg 4-dimetil-amino-piridint 20 ml metilén-dikloridban feloldunk, az oldatot —10 °C-ra lehűtjük, 2 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, és a reakciókeveréket éjszakán át 4 °C-on tartjuk. Ezután a keveréket megszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk, a maradékot kevés toluol-etil-acetát (8:2) keverékben felvesszük és ugyanezzel az oldószerrel kromatografáljuk. Rf = 0,44 (toluol/etil-acetát, 4:1). b) 2-Dezoxi-3-0-[(R)-3-hidroxi-tetradekanoil]-2-[(S)-3-hidroxi-tetradekanoil-amido]-l-0- -foszfono-q -D-glükopiranóz 4.2 g 4,6-0-benzilidén-3-0-[(R)-3-benzil-oxi-tetradekanoil]-2-[(S)-3-benzil-oxi-tetradekano-il-amido]-2-dezoxi-1-O-foszfono-q-D-glükopiranózt tetrahidrofurán és víz 85:15 arányú keverékének 900 ml-ében feloldunk és 1,5 g 10%-os palládium/szén jelenlétében 2 órán át 10 bar nyomáson, 40 °C-on hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, a tetrahidrofuránt lepároljuk és a vizes szuszpenziót liofüizáljuk. Rf*= 0,5 (metilén-diklorid/metanol/ammónia 1:1:1 alsó fázis). A terméket tovább tisztíthatjuk a következőképpen: 10.2 g 2-dezoxi-3-0-((R)-3-hidroxi-tetradckanoil]-2-[(S)-3-hidroxi-tetradekanoil-amido]-l-0--foszfono-q-D-glükopiranózt és 1,7 g Íriszt [trisz(hidroxi-metil)-amino-metán] 150 ml metanolban ultrahang-fürdőben 10 percig 45 #C-on kezelünk. A szuszpenziót centrifugáljuk, és a tiszta felülúszót az üledékről dekantáljuk. Ehhez az oldathoz 20 ml metanolban oldott 1,7 g triszt adunk, az oldatot beoltjuk és szobahőmérsékleten hagyjuk kristályosodni. így a cím szerinti vegyület di-trisz sóját kapjuk. A felülúszót szárazra pároljuk. A maradékot és az üledéket együtt 300 ml kloroform, 600 ml metanol és 240 mj pirogén anyagoktól mentes víz keverékében feloldjuk. Az oldathoz további 300 ml kloroformot és 300 ml 0,1 n sósavat adunk, elővigyázatosan megkeverjük és a fázisokat hagyjuk szétválni. A kloroformos fázist elkülönítjük és szárazra pároljuk. A maradék a nyers 2-dezoxi-3-0-[(R)-3-hidroxi-tetradekanoil]-2- -[(S)-3-hidroxi-tetradekanoil-amido]-l-0-foszfono-q-D-glükopiranózból áll. Az így kapott terméket trisz és metanol jelenlétében a fentiek szerint ultrahanggal kezelünk és centrifugáljuk. Az oldatot Sephadex LH 20 oszlopon kromatografáljuk és metanollal eluáljuk. A megfelelő frakciókat egyesítjük és szárazra pároljuk. így a cím szerinti vegyület monotrisz sóját kapjuk. 5,1 g fenti terméket ultrahang fürdőben 40 ml metanolban 45 °C-on feloldunk, 10 ml metanolban oldott 0,74 g triszt adunk hozzá, az oldatot beoltjuk és kristályosodni hagyjuk először szobahőmérsékleten, majd 4 °C-on. így a cím szerinti vegyület di-trisz sójának további mennyiségeit kapjuk kristályos formában. A felülúszó maradékát és a centrifugálás üledékét további tisztításnak vethetjük alá. 2. példa 3-Dezoxi-2-Q-[(R)-3-hidroxi-tetradekanoin-3-((R)-3-hidroxi-tetradekanoil-amidol-l-0- -foszfono-q -D-glükopiranóz a) 2-0-[(R)-3-Benzil-oxi-tetradekanoil]-3- -[(R)-3-benzil-oxi-tetradekanoil-amido]-3-dezoxi-l-0-dibenzil-foszfono-4,6-0-izopropilidén-a -D-glükopiranóz 4,85 g 2-0-[(R)-3-benzil-oxi-tetradekanoil]-3- -[(S)-3-benzil-oxi-tetradekanoil-amido]-3-dezoxi-4,6-0-izopropilidén-D-glükopiranózt 40 ml vízmentes tetrahidrofuránban feloldjuk, az oldatot — 70 °C-ra lehűtjük és 8 ml 1,6M hexános butil-lítiumot, majd 5 perc múlva ugyanezen a hőmérsékleten 10 ml benzolban oldott 3,8 g dibenzil-foszfor-kloridátot adunk hozzá. Az elegyet - 70 °C-on 10 percig keverjük, 0,3 ml ecetsavat adunk hozzá, és az oldatot kezdeti térfogatának 1/4 részére koncentráljuk. Az oldatot 200 ml metilén-kloriddal hígítjuk, 50 ml vízzel, 50 ml hígított nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 50 ml nátrium-klorid oldattal extraháljuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot toluol/etil-acetát 7:3 arányú keverékével kromatografáljuk. Rf« 0,58 (toluol/etil-acetát, 2:1). b) 3-Dezoxi-2-0-{(R)-3-benzil-oxi-tetradekanoilJ-3-[(R)-3-benzil-oxi-tetradekanoU-amidoJ-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
