199792. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új indol-karboxamid-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199792 B 2 Példa száma Dózis Idő meghosszabbodás mg/kg (%) 2,5 mg/kg 34% 5 mg/kg 83%. 35 5 0,5 mg/kg 28%. 1 mg/kg 43% 2,5 mg/kg 71% 5 mg/kg 91% 5 6 5 mg/kg 54% 10 mg/kg 99% 7 2,5 mg/kg 12%. 10 5 mg/kg 43%. 10 mg/kg 125% 9 1 mg/kg 25% 2,5 mg/kg 59%. 15 10 1 mg/kg 47%. 5 mg/kg 116% 11 2,5 mg/kg 42%. 20 5 mg/kg 76%. 10 mg/kg 173% 13 1 mg/kg 21% 2,5 mg/kg 50% 25 14 1 mg/kg 34%. 2,5 mg/kg 57%. 5 mg/kg 156%. 30 15 1 mg/kg 29%. 2,5 mg/kg 86% 16 1 mg/kg 49% 2,5 mg/kg 83% 35 17 1 mg/kg 50% 2,5 mg/kg 90% 5 mg/kg 167%. 5 18 2,5 mg/kg 62% 5 mg/kg 142% 10 mg/kg 193% 10 19 2,5 mg/kg 67% 5 mg/kg 127% 10 mg/kg 203% 20 5 mg/kg 44% 15 10 mg/kg 61% 21 2,5 mg/kg 53%. 5 mg/kg 19% 20 4) Kalcium antagonista hatás vizsgálata in vitro Patkányok farkvégi artériáit spirál alakban bevágtuk és nyomásmérőcsöhöz kötve 37°C hőmérsékleten, 25 ml Krebs nátrium- hidrogén-karbonát oldatban tartottuk, amely még a következő adalékokat tartalmazta: 120,8 mmól NaCl, 5,9 mmól KC1, 1,2 mmól MgCb, 1,2 mmól NaH2P04, 15,5 mmól NaHCOs, 12.6 mmól glükóz. Az oldatot 95% 02/5% CO2 keverékkel öblítettük. a készítményt a következő, K+-ionokat 100 mmól koncentációban tartalmazó oldattal depolarizáltuk: 26.7 mmól NaCl, 100 mmól KC1, 1,2 mmól MgCb, 1,2 mmól NaH2P04, 15,5 mmól NaHC03, 12,6 mmól glükóz. Ezután CaCl2-ot adagoltunk hozzá 250 |il mennyiségben, hogy növekvő koncentrációjú (0,1-3 mmól) Ca2+ ionokat tartalmazó oldatokat nyerjünk. Feljegyeztük az artériák kontrakcióját és a kontrol szériát is így állítottuk be. A műveletet a Ca2+ionokat tartalmazó sorozattal megismételtük minden 15 percben és a készítményeket minden művelet után négyszer mostuk. Amikor állandó választ kaptunk, a Ca2+-ionokat tartalmazó oldatokkal a műveletet tovább folytattuk a vizsgálandó vegyületek különböző koncentrációjának jelenlétében addig, amíg stabil választ kaptunk. Az artériák kontrakciója a sima-izom sejtekbe bejutó Ca2+- ionok koncentrációjától függ és a sima-izom K+-ionok általai végzett depolarizációja és a presynaptikus szintnél felszabaduló noradrenalin határása megy végbe. 6-OH-dopaminnal denervált artériák esetében végzett ismételt műveletnél a noradrenalin specifikus hatása eliminálódik. A kapott eredményeket IC50 értékben fejeztük ki, amely azt a vizsgálandó vegyület koncentrációját jelöli, amelynél a K+-ionok által okozott kontrakció 50%-os mértékben gátolt. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze, és ezekből kitűnik, hogy a találmány szerinti vegyületeknek igen jó kalcium-antagonista hatása van. Példa szám IC50 1*M 15 1 2,5 3 8 4 1,8 5 3,9 20 6 6,3 7 8,8 8 9 9 0,44 13 8,4 25 19 0,25 20 2,8 22 3 5) Akut toxicitás vizsgálata A letális dózis (LDo) meghatározását különböző találmány szerinti vegyületek esetében egereken végeztük orális adagolásnál. Az LDo érték azt a maximális dózist jelenti, amelynél 8 nap alatt az egerek elpustzultak. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze. Példa száma LDo (J-g/kg 1 >400 5 3 80 5 100 6 >400 7 80 17 200 10 19 400 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
