199791. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-[6-(N-cikloalkil-alkil-karbamoil)-indol-1-il-metil]-3-alkoxi-benzoesav-származékok és az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199791 B 2 A vizsgálatok eredményeit az I. táblázatban foglaljuk össze. I. táblázat Hatóanyag (a példa száma) Koncentráció %-os gátlás 1. 1 mikrontól 80 2. 1 nanomól 51 4. 1 mikrontól 57 5. 100 nanomól 53 6. 1 nanomól 43 7. 1 nanomól 33 8. 1 nanomól 27 9. 10 nanomól 77 Megismételtük a fenti kísérleteket úgy, hogy görcskeltőként leukotrién helyett l,5xl0‘3 mól bárium-kloridot (aspecifiks görcskeltő) használtunk őxlO-6 mól indometacin jelenlétében. A kísérletek eredményei azt mutatták, hogy a vizsgált vegyületek az aspecifikus sima izom-depresszánsokkal ellentétben szelektív leukotrién-antagonista hatással rendelkeznek. Az (I) általános képletű vegyületek leukotrién-antagonista hatását in vivo körülmények között tengerimalacokon vizsgáltuk. A tengerimalacokat előkezeltük a vizsgálandó hatóanyaggal, majd 15-60 perc elteltével a tengerimalacok szájában LTD4-et tartalmazó aeroszolt fújtunk be (a görcskeltést 3 ml 30 |ig/ml koncentrációjú LTD4-oldattal kezdtük), és feljegyeztük azt az időpontot, amikor az állatok légzése a leukotrién hatására már megváltozik (például néhéz légzés lép fel). A mért időtartamokat feljegyeztük, és összehasonlítottuk az előkezeletlen tengerimalacokon mért időtartamokkal. Ebben a kísérletben a vizsgált (I) általános képletű vegyületek orális vagy intramuszkuláris adagolás, illetve belélegeztetés esetén egyaránt körülbelül 100 mg/kg-os vagy annál lényegesen kisebb dózisban jelentősen késleltették a leukotrién okozta légzési rendellenességek beállítását Káros mellékhatásokat a minimális hatásos dózis nagy többszörösével végzett kezelés esetén sem észleltünk. így például a 8. példa szerint előállított vegyület 2 mmól/kg-os orális dózisban már hatásos volt, és még 30 mmól/kg- os orális dózisban beadva sem idézett elő toxikus tüneteket. A találmányt az oltalmi kör korlátozása nélkül a következő példákban részletesen ismertetjük. Amennyiben a példákban mást nem közlünk,- a műveleteket szobahőmérsékleten (18-25 "C-on) végeztük;- az oldószereket forgó bepárlókészülékben, 600- 4000 Pa (4,5-30 Hgmm) nyomáson, legföljebb 60 °C hőmérsékletű fürdőről pároltuk le;- a gyorskromatografálást Merck Kieselgel Art 9385 típusjelű szilikagélen, az oszlopkromatografálást Merck Kieselgel Art 7734 típusjelű szilikagélen (az E. Merck, Darmstadt, német szövetségi köztársasági cég gyártmányai) végeztük; a vékonyrétegkromatografálásához 0,25 mm vastagságú, GHLF Art 21521 típusjelű lemezeket (az Analtech, Newark, Delaware, amerikai egyesült államokbeli cég gyártmány) használtunk;- a reakciók menetét rendszerint vékonyrétegkromatografálással követtük, és a reakcióidőket csak tájékoztatás céljából közöljük;- a példákban megadott olvadáspont-értékek korrigálaüan adatok; egyes esetekben a termékek polimorf módosulatok formájában képződhetnek, ekkor az azonos kémiai szerkezetű anyagok olvadáspontja eltér egymástól;- valamennyi végtermék vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint lényegében tiszta volt, és a termékek NMR-spektruma és elemzési adatai megfeleltek a várt szerkezetnek;- a hozam-adatokat csupán tájékoztatás céljából közöljük, mert nem törekedtünk a maximális hozam elérésére;- az NMR-spektrumokat a példákban feltüntetett frekvencián és oldószerekben vettük fel, a kémiai eltolódás-értékeket 8 skálán ppm egységekben, tetrametil-szilán belső standardra vonatkoztatva adtuk meg. I. példa 4-[6-(N-ICiklopentil-metill-karbamoil)-3-(2-IN-metil-karbamoill-etil)-indol-l-il-metil]-3-metoxi-benzoesav előállítása Nyomásálló edényben 75 ml kondenzált metilamint, 0,3 g 4-[6-(N- /ciklopentil-metil/-karbamoil)- 3-(2-/metoxi-karbonil/-etil)- indol-1 -U-metil]-3-metoxi-benzoesavat és 0,07 g 4-(dimetil- amino)-piridint mérünk be, és az elegyet 24 órán át keveijük. Ezután az amint elpárologtatjuk. A maradékot vízben oldjuk, és az oldatot 10 térfogat %-os vizes sósavoldattal megsavanyítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük és vízzel mossuk. 0,26 g (89 %) fehér, porszerű, 274-275 ”C-on olvadó cím szerinti terméket kapunk. Elemzés a C28H33N3O5.0.1 H2O képlet alapján számított: C: 68,13 %, H: 7,15 %, N: 8,51 %; talált: C: 67,83 %, H: 6,75 %, N: 8,46 %. A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: (a) 4,46 g 4-metil-3-nitro-benzoesav-metil-észter 23 ml N,N- dimetil-formamiddal készített oldatához 8,18 g N,N-dimetil- fomamid-dimetil-acetált adunk, és az elegyet 2 órán át 130 °C-on tartjuk. Az oldószert lepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 5,58 g (98 %) vörös, porszerű E-[4-(2-/dimetil- amino/vinil)-3-nitro-benzoesav]-metil-észtert kapunk. NMR-spektrum vonalai (80 MHz, CDCI3): 2,98 (s, 6H, N(CH3)2), 5,90 (d, 1H, CHN), 7,14 (d, 1H, CHCHN), 7,45 (d, 1H, H5-Ar), 7,90 (dd, 1H, H6-Ar), 8,47 (d, 1H, H2-Ar) ppm. (b) 5,58 g E-[4-(2/dimetil-amino/-vinil)-3-nitro-benzoesav]- metil-észter 100 ml tetrahirofuránnal készített oldatát 1,1 g 10 tömeg %-os palládium/csontszén katalizátorjelenlétében 3,45 bár nyomáson 30 percig hidrogénezzük. A katalizátort diatómaföldön keresztül kiszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk, és az oldatot 10 térfogat %-os vizes sósavoldattal, vízzel, végül vizes nátrium-klorid oldattal mossuk. Az oldatot magnézium-szulfát fölött szárítjuk, majd bepároljuk. 3,32 g (85 %) fehér, szilárd indol-6-karbonsav-metil- észtert kapunk. NMR-spektrum vonalai (80 MHz, CDCI3): 3,92 (s, 3H, OCH3), 6,57 (m, 1H, H3-indol), 7,32 (t, 1H, H2- indol), 7.10 (d, 1H, H4-indol), 7,32 (t, 1H, H2- indol), 7,87 (dd, 1H, H5-indol), 8,16 (széles s, 1H, H7-indol) ppm. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
