199786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a magas vérnyomás kezelésére használható peptid-származékok előállítására
1 HU 199786 B 2 hozzácsepegtetjük 1,01 g nátrium-karbonát 10 ml vízzel készült oldatát, és az elegyet további fél órán át erélyesen keverjük. Ezután fél órára jeges fürdóbe hűtjük, a kivált anyagot kiszűrjük, hideg vízzel hétszer, utána hideg etil- acetáttal w ^zer, és végül vízmentes dietil-éterrel kétszer ki ossuk, majd csökkenten, nyomáson, nátrium-hidroxid és foszfor- pentoxid mellett több órán át szárítjuk. Ily módon, fehér színű, kristályos anyag formájában t,32 g terméket kapunk, op.: 182-183 °C. V termék az infravörös, NMR-spektrum, elemi analízis, papír elektroforézis és vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint a cím szerinti vegyület. 3. lépés Na-Benzoil-L-tio-fenil-alanin 1,01 g nátrium-hidrogén-szulfid 25 ml vízmentes • «• ’ • - ’ ' -* '> - . 35-40 °C közötti hőmérsékleten nitrogént buborékoltatunk, és negyedóra alatt hozzáadunk 2,17 g, a 2. lépésben leírt módon kapott terméket. A beadagolás végére a reakcióelegy hőmérséklete körülbelül 20 °C-ra csökken. Ezután az elegyet 20 ”C hőmérsékleten, másfél órán át erélyesen keverjük, majd az etanolt forgó rendszerű desztilláló készüléken, 32 "C hőmérsékleten ledesztilláljuk. A maradékhoz 30 ml vizet adunk, és az oldatot jeges fürdőbe hűtve, 50 %-os kénsavval, pH=2-re savanyítjuk. Az elegyet fél óráig a jeges fürdőben hagyjuk, majd a kivált anyagot kiszűrjük, hideg vízzel többször kimossuk, és éjszakán át csökkentett nyomáson, nátrium-hidroxid és foszforpentoxid mellett szárítjuk. A megszárított anyagot benzol és hexán elegyéből átkristályosítva fehér színű, tűs kristályok formájában 1,45 g terméket kapunk, op.: 108,5-109,5 °C. A termék az infravörös, NMR- spektrum, elemi analízis, papír elektroforézis és vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint a cím szerinti vegyület. 4. lépés 3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-metil--propionsav 285 mg, a 3. lépésben leírt módon kapott termék, és 86,1 ml metakrilsav 2 ml toluollal készült elegyét addig forraljuk, míg a reakció a vékonyréteg-kromatográfiás és papír elektroforézis vizsgálat szerint le nem játszódik. Utána az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken, 35 °C hőmérsékleten, nagymértékben csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az olajos maradékot benzol és n-hexán elegyéből kristályosítva, majd átkristályosítva, fehér színű, kristályos anyag formájában 195 mg terméket kapunk, op.: 120-122,5 °C. A termék az infravörös és NMR- spektrum, elemi analízis, papír elektroforézis, és vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint a cím szerinti vegyület. 5 5. lépés 3-(Na-Ben:oil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-D-metil-propionsav (rezolválás) a) A 4. lépésben leírt módon kapott terméket benzolból többször átkristályosítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. Ha az átkristályosítás során az af) módszer l)-3) lépéseiben leírt módon kapott oltókristályt használjuk, akkor gyorsabban, és jobb hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet. b) A 4. lépésben leírt módon kar>Q*; terméket feloldjuk benzolban, az oR^oz hozzáadunk egy egyenértéknyi mennyiségű diciklohexil- amint, és az elegyet több oran át keverjük. Ezután éjszakán át 4 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, a kivált kristályokat kiszűrjük, mossuk, és csökkentett nyomáson megszárítjuk. Ezt a kristályos anyagot feloldjuk víz és etil-acetát kétfázisú elegyében, jeges fürdőben hűtve tömény sósavval pH = 2-re savanyítjuk, majd az etil-acetátos részt telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, és magnézium-szulfáton megszárítjuk. A szárítószert kiszűrjük, és a száriéiról az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. Ezután a cím szerinti vegyületet benzolból kristályosítjuk. 6. lépés Na-[3-(Na-Benzoil -L-fenil-alanil-merkapto )-2- -D-metil- propanoil]-L-prolin a) 1) 2,5 mmól, az 5. lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml dimetil-formamidban, és az oldathoz jég-aceton hűtőfürdőben, 0 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 2,5 mmól diciklohexil-karbodiimid 1,5 ml dimetil-formamiddal készült oldatát. Az elegyet 5 percig 0 ”C hőmérsékleten keveijük, majd hozzáadjuk 2,5 mmól L-prolin-tercier-butil-észter 1,5 ml dimetil- formamiddal készült oldatát. A reakcióelegyet éjszakán át 4 ”C hőmérsékleten keverjük, majd hozzáadunk 10 ml etil-acetátot, és a kivált csapadékot kiszűrjük, majd 20 ml etil-acetáttal kimossuk. Az egyesített etil-acetátos oldatokat behűtjük, és telített nátrium-klorid-oldattal háromszor, utána hideg 0,1 n nátrium- hidrogén-karbonát-oldattal egyszer, és végül telített nátrium- klorid-oldattal háromszor kimossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és a szárítószert kiszűrjük. A szűrletről az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken, nagymértékben csökkentett nyomáson távolítjuk el, maradékként fehér színű anyagot kapunk. 2) A fenti maradékot 4 ml anizolban szuszpendáljuk, hozzáadunk 8 ml trifluor-ecetsavat, és az elegyet másfél órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a trifluor-ecetsavat forgó rendszerű desztilláló készüléken, nagymértékben csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 1 ml tetrahidrofuránban, és kromatografáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk kevés izopropanolban, és újra kromatografáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókról az oldószert ledesztillálva olajos termékhez jutunk, amelyet feloldunk tetrahidro-furánban, és a tetrahidro-furánt nitrogén-áramban ledesztilláljuk. Az oldószer nyomait végül forgó rendszerű desztilláló készüléken, nagymértékben csökkentett nyomáson távolítjuk el. b) 2,5 mmól, az 5. példában leírt módon kapott termék és 2,5 mmól N-hidroxi-szukcinimíd dimetil-formamiddal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzácsepegtetjük 2,5 mmól diciklohexil-karbodiimid dimetil-formamiddal készült, lehűtött oldatát. A reakcióelegyet fél órán át 0 “C hőmérsékleten, majd éjszakán át 4 ’C hőmérsékleten keverjük. A kivált kristályos diciklohexil- karbamidot kiszűrjük, és etil-acetáttal 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
