199773. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrahidro-naftalin-származékok és az ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
metilén-kloridot vagy kloroformot) alkalmazhatunk. Oldószer-elegyeket vagy fölös mennyiségű savmegkötőszert is alkalmazhatunk. Az X helyén halogénatomot tartalmazó (lia) általános képletű vegyületeket célszerűen oly módon állíthatjuk elő, hogy a megfelelő, X helyén aril- vagy alkil-szulfonil-csoportot tartalmazó (lia) általános képletű vegyületet acetonban nátrium-halogeniddel vagy piridin- hidrogén-halogeniddel reagáltatjuk, kb. 0-100 °C-on. Egy (Ha) általános képletű vegyületet önmagában ismert módon nátrium- vagy kálium-cianiddal történő reagáltatással (VIH) általános képletű vegyületté alakítunk. A; cianiddal történő reagáltatást inert szerves oldószerbeh (pl. dimetil-szulfoxidban, dimetil-formamidban, hexametil-foszforsav-triamidban stb.), szobahőmérséklet és 150 °C közötti hőmérsékleten - előnyösen kb. 40-80 °C-on - hajthatjuk végre. A (Vm) általános képletű vegyületet önmagában ismert módon (IV) általános képletű vegyületté redukáljuk. Redukálószerként pl. nátrium-bisz-(2-metoxi-etoxi)-alumíniumot-dihidridet, diizobutil-alumínium-hidridet stb. alkalmazhatunk. A redukciót inert szerves oldószerben (pl. klórozott szénhidrogénben, mint pl. metilén-kloridban; éterben, pl.dietil-éterben, tetrahidrofiiránban vagy dioxánban; szénhidrogénben, pl. hexánban vagy ciklohexánban stb.), kb. 20-100 °C-on - előnyösen kb. 30-50 °C-on - hajthatjuk végre. A (IV) általános képletű vegyületet a megfelelő (IX) általános képletű alkohollá redukálhatjuk, melyet- a korábbiakban a (VII) —» (Ha) átalakítással analóg módon - a megfelelő (Ilb) általános képletű vegyületté alakíthatunk. A (IV) általános képletű vegyületek redukcióját önmagában ismert módon, az ilyen redukcióknál szokásos redukálószerekkel (pl. hidrogénnel katalizátor - mint pl. Raney-nikkel vagy palládium- jelenlétében; vagy lítium-alumínium-hidriddel, nátrium-bór- hidriddel vagy lítium-bór-hidriddel stb.) végezhetjük el. A redukciót inert szerves oldószerben (pl. egy éterben, mint pl. dietil-éterben vagy tetrahidrofuránban; vagy alkoholban, pl. metanolban vagy etanolban) kb. 20-100 °C-os hőmérsékleten hajthatjuk végre. Az (V) általános képletű tetralon-származékok ismertek vagy ismert vegyületek előállításával analóg módon állíthatók elő. Az (I) általános képletű vegyületek legalább egy aszimmetriacentrumot tartalmaznak (a 2-helyzetben) és ezért optikai antipódok vagy racemátok alakjában fordulhatnak elő. Az egynél több aszimmetriacentrumot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek az (I) általános képleten feltüntetett relatív konfigurációit mutatják. Az (I) általános képletű vegyületek kifejezett kalcium- antagonista hatást mutatnak és a gyógyászatban különösen Angina pectoris, iskémia, arritmia és magasvérnyomás kezelésére, illetve meglőzésére alkalmazhatók. Az (I) általános képletű vegyületek kalcium-antagonista és vérnyomáscsökkentő hatását az alábbi tesztekkel igazoljuk: A) 3H-nifedipin-megkötés meghatározása A meghatározást nyúl- vagy tengerimalacszív homogenizátumán vagy részlegesen tisztított membránján végezzük el. A reakcióelegy (0,3 ml) 0,2-0,8 mg membránfehérjéből, 1 nM 3H-nifedipinból (vagy 0,25 nM 3H-nitrendipinből) és különböző koncentrációban jelenlevő teszt-vegyületből áll. Az inkubálást 30 percen át 25 °C-on vagy 37 °C-on végezzük és inkubációspufferrel történő hígítással állítjuk le; ezután szűrés következik. A szűrőhöz kötött radioaktivitást szcintillációs számlálóval mérjük. A fajlagos kötést (azaz receoptorhoz való kötődést) a teljes és nemspecifikusan kötött radioaktivitás különbségeként határozzuk meg. A nemspecifikus kötődést fölös mennyiségű nemradioaktív nifedipin (1 mM) jelenlétében határozzuk meg. A teszt-vegyület hatáserősségét ennél a tesztnél az IC50 és %-os maximális gátlási érték (%-os maximális gátlás) segítségével fejezzük ki. IC50 értéknek a specifikus 3H-nifedipin (illetve 3H-nitredipin) megkötés félmaximális gátlását előidéző hatóanyag-koncentrációt tekintjük [mól/l-ben]. A fajlagos kötés maximális gátlását a %-os maximális gátlási értékkel adjuk meg; a nifedipin referens vegyület esetében ezt az értéket 100 %-nak tekintjük. Mindkét paramétert a koncentráció- kötés görbéből extrapoláljuk. B) Kutya koronáriaartéria csíkok A teszt során kutya koronária artériából spirális csíkokat (2-2,5 mm széles és 10 mm hosszú) vágunk ki és szervkamrában 0,5 g előfeszítés mellett felfüggesztjük. Ezeket a csíkokat kb. 1-2 órán át Krebs- Henseleit puffer-oldatban előinkubáljuk; az oldaton 37 ”C-on oxikarbon gázt (95 % oxigén és 5 % szén-dioxid elegye) vezetünk át. A teszt-vegyületnek a KC1 (84,7 millimól) összehúzódásra kifejtett relaxáló hatását a szervkamrában állandó emelkedő teszt-vegyület koncentráció mellett mehatározzuk. A fenti módszerrel mérjük a teszt-vegyület kalcium-csatorna blokkoló hatását, mivel a kálium-klorid összehúzódás kizárólag a feszítéstől függő kalcium-csatornán keresztül történő kalcium-beáramlás útján jön létre. A teszt-vegyület hatékonyságát az IC50 érték segítségével fejezzük ki. IC50 értéknek [mól/l-ben] a kálium-klorid összehúzódás félmaximális relaxációját előidéző hatóanyag-koncentráció tekintjük. Ezt az értéket a kapott koncentráció-hatás görbéből extrapoláljuk. C) Hemodinamikus paraméter narkotizált kutyán A hemodinamikus kísérlet négy legfontosabb mérési paramétere (illetve mérési egysége) a következő: (1) CBF = koronária vérátáramlás [ml/perc] - a koronáriaartérián átfolyó vér átáramlási sebessége. (2) HF = szívműködés [ütés/perc] - a szívfrekvencia. (3) BP = vérnyomás (Hgmm) - vérnyomás. (4) dp/dt = balkamrás nyomás emelkedésének üteme (Hgmm) - a balkamrás vérnyomás növekedési sebessége a szív összehúzódó erejének mértéke. A fenti értékeket a kiinduláis értéktől való %-os maximális eltérés (A%) formájában, a beadagolt dózisokra adjuk meg. Ily módon nem csupán a teszt-vegyület hatásának összképét kapjuk meg, hanem az egész szervezetben a keringési rendszer meghatározott részére kifejtett potenciális szelektivitásra is értékelést nyerünk. Egy anesztetikum beadása után a kutyát intubáljuk és mesterségesen lélegeztetjük. A vér pH-ját, valamint pC02, pÖ2 és haemoglobin értékét vér-gáz-analizátor segítségével óránként mérjük. A vérnyomást (szisz5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
