199683. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fájdalomcsillapító, lázcsillapító, gyulladásgátló, antianginás és/vagy antioxidáns hatású gyógyászati készítmények előállítására
HU 199683 B 4. Phytohaemagglutininnai stimulált granulociták chemilumineszcenciájának vizsgálata ( szabadgyök kötés) Módszer: A phytohaemagglutmiu (PHA) által létrehozott membránstimulus a sejtekben olyan enzimatikus folyamatokat indít el, melynek során szabad oxidativ gyökök keletkeznek. Ezek hatására a rendszerben lévő luminol (5-amino-2,3-dihidro-l,4-phtalazindion) oxidálódik, majd fénykibocsátás közben tér viszsza az alapállapotba. Ezt szcintillációs számláló segítségével detektáljuk. A sejteket dextránon történő ülepítéssel nyertük. Luminol-oldat: 1,4 mg luminolt oldunk 200 pl cc. NH4OH-ban, majd 30 pl-t 30 ml TPG oldatba. A rendszerben 500 pl luminol 100 pl PHA (Diíco) 1:100 hig. 100 pl vizsgálati anyag 500 pl sejt A sejteket közvetlenül a mérés előtt adjuk a rendszerhez. Az anyagokat DMSO-ban oldottuk, majd a 10~' M-os oldatot hígítottuk tovább TPG-vel. TPG oldat: 50 ml Tris-Parker ( 1,2 g Tris 50 ml Parkerben pH= =7,4) 150 ml Parker 4 ml 40%-os glukóz. A mintákat 2,5 percenként mértük, majd 0- 15 percig összegeztük a beütésszámokat, az eredményt az oldószeres kontroll százalékában adtuk meg. Eredményeinket a IV. táblázatban közöljük. IV. táblázat Granulociták chemilumineszcenciájának vizsgálata Teszt-vegyület IC50 M példa szám 5 1. kb. 10~4 2. kb. 10 4 7. kb. 10-b 8. kb. 10~6 9. kb. 10~6 Indometacin 10-t Fenilbutazon 10 1 Piroxicam HT4 A vizsgálatokban felhasznált referens anyagok kémiai elnevezése a következő: Fenilbutazon = 3,5-dioxo-l,2-difenil-4-(n-bu til)-pirazolidin Indometacin = 1 - (p-klór-benzoil)-5-metoxi-2-metil-1 H-indol-3-ecetsa v Piroxicam = 4-hidroxi-2-metil-N-2-piridil-2H- l,2-benzotiazin-3-karboxamid-1,1 -dioxid Az (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények a gyógyszergyártás önmagukban ismert módszereivel állíthatjuk elő. Az (I) általános képletü vegyületek gyógyászatilag alkalmas savakkal képezett sói gyógyászati szempontból megfelelő szervet len vagy szerves savakkal képezett sók lehetnek (például: hidroklorid, hidrobromid, szulfát, foszfát, illetve acetát, citrát, tartarát, maleát, fumarát, laktát, stb.). Az (I) általános képletű vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmas savaddíciós sóikat orális, rektális vagy parenterális adagolásra alkalmas formában készíthetjük ki. Az orális adagolásra alkalmas gyógyászati ké szítmények például tabletták, drazsék, ente roszolvens tabletták vagy drazsék vagy kapszulák lehetnek. E gyógyászati készítmények hatóanyagtartalma adagolási egységenként előnyösen 10—500 mg. Az orális adagolásra szolgáló készítmények a gyógyászatban szokásos hordozó- és/ /vagy segédanyagokat tartalmaznak, például laktózt, keményítőt, magnézium-sztearátot, nátrium-citrátot, kalcium-karbonátot, dikalcium-foszfátot, keményítőszármazékokat (például: karboximetil-keményítő), kovasavat vagy kötőanyagokat |péidait 1 poli/viriil-pirrolidonj-t, stb. A tabletták alapanyagához ezen kívül sikosító anyagokat (például: magnézium-sztearátot vagy talkumot) is adhatunk. Az orális adagolásra szolgáló készítmények továbbá vizes szuszpenziók és/vagy elixírek is lehetnek. Ezek a gyógyászati készítmények hígítóanyagként például vizet, etanolt, propilén-glikolt vagy glicerint tartalmazhatnak és ezen kívül szokásos adalékokat, így például ízjavíto szereket, színezékeket, ernulgeálószereket, stabilizálószereket (például: p-hidroxi-beuzoesav-metilész tért. stb ). A tabletták száraz vagy nedves granulálási eljárással készíthetők. Drazsék előál lítása esetén a drazsémagot szokásos módon megfelelő bevonattal látjuk el. Kapszti Iák készítése esetén a megfelelően el kész i tett keveréket kemény- vagy lágy zselatin -kapszulákba töltjük. A rektális adagolásra alkalmas végbélkúpok általában 0,01-0,5 g hatóanyagot tartalmaznak A kúpok készítése oly módon történhet, hogy a hatóanyagot a megömlesztett kúp alapanyagban (például: kakaóvaj, Witepsol, H15, stb.) egyenletesen eloszlatjuk, majd lehűtjük, formákba öntjük és alumíniumfóliába vagy sztaniol papírba csomagoljuk. A parenterális felhasználásra alkalmas injekciók intravénásán, mtramuszkulánsan, intraperitoneálisan vagv szubkután úton adagolhatok. Az inp'kc'ós oldatok hatóanyagtarfal ma előnyösen (i,ö0.5 0,25 g/ml. A gyakorlatban az injekció-, oldatot előnyösen 1 vagy 2 ml-es ampullák!)» lobjuk így az ampullák hatóanyagtartalma általában 0,0025— 0,25 g/ampulla. A parenterális adagolásra szolgáló injekciós oldatok hígítóanyagként például vizet, szezámolajat, földimogyoro-olajat, vizes propilén-glikolt vagy gyógyaszatilag alkalmas más oldószereket tartalmazhatnak. Előnyösen vizes oldatokat ké 6 5 10 15 20 25 30 3b 40 45 50 bo 60 65
