199562. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás glükóz izomerizálására
HU 199562 B hozzá, melynek pH-ját 8 N nátrium-hidroxiddal 6,0-ra állítottuk. Ezzel a kovalens kötésű izomeráz-citozán komplexet oldhatatlanná tesszük. 15 perc múlva 4 liter 1 mólos pH= =8-as foszfátoldatot keverünk az oldhatatlan izomeráz-citozán komplexhez. A megkötött izömeráz-citozánt Whatman 3-as szűrőpapírt tartalmazó Büchner vákuumtölcséren ionmentesített vízzel mossuk. A készítményt levegőn megszárítjuk, megőröljük, majd kiválasztjuk belőle az 1,41 és 0,25 mm iyukbőségű sziták közé eső mérettartományt. A száraz -katalizátor aktivitása 803 IGIU/g. A 112,6°C-os reaktort a következőképpen készítjük: a katalizátorból 7 g-ot a tápoldatban szuszpendálunk, majd laboratóriumi vákuummal szobahőmérsékleten 60 percen át légtelenítjük. A légtelenített szuszpenzióból 1,0 X 40 çm-es töltetet készítünk egy köpennyel ellátott üvegcsőben. A töltet aktivitása 5621 IGIU. Az első, 70°C-os izomerizálással előkészített táptalaj pH-ját 6,55-re állítjuk be, majd ionmentes vízzel 42,0 t% szárazanyagtartalomra hígítjuk. Ennek következtében a nátrium-hidroszulfát koncentrációja 2,1 mM-ra, a magnézium-szulfát pedig ugyancsak 2,1 mM- ra csökken. Ezt a táptalajt azután 60°C-os hőmérsékleten 7-104 Pa túlnyomással és 27 8 ml/perc sebességgel 10 percen át keringetjük a magas hőmérsékletű reaktor-oszlopban. Az oszlop hőmérsékletét egy — közvetlenül a töltet felett elhelyezett — hőmérő mutatja, 5 melyet a beosztásig homokba ágyazunk, hogy a holtteret a lehető legkisebbre csökkentsük. Az oszlop hőmérsékletét ezután gyorsan növeljük a köpenyben cirkuláltatott olajjal, melyet körülbelül U4°C-on termosztálunk. Az 10 oszlop hőmérsékletét 112,6°C-ra emeljük, az áramlási sebességet pedig 1,89 ml/percre csökkentjük. Az oszlopból elvezetett folyadékot regisztráló polariméterrel figyeljük, mely 50 és 58% 15 közötti fruktóztartalomra van beállítva. Miután az oszlop hőmérséklete elérte a 112,6°C- ot, az elvezetett folyadék fruktóztartalma pedig a kívánt szintet, a folyadékot összegyűjtjük, és 1 mólos citromsav hozzáadásá- 20 val a pH-ját azonnal beállítjuk 4,0-re. Az elvezetett folyadékot addig gyűjtjük, míg fruktóztartalma 55 t% alá nem csökken. A 70°C-os és a 112,6°C-os reaktorban kapott izomerizált oldatokat szénhidrát-összeté- 25 felre és színre elemezzük, és az eredményeket összehasonlítjuk az izomerizálatlan tápoldaton végzett hasonló elemzések eredményeivel, amint az az alábbi 5 táblázatban látható. 28 5. Táblázat A 70 °C-o8 és a 112,6a°C-os izomerizálással kapott tápoldatok összetétele Szénhidrát összetétel Szín t öme9-%haaumentes szárazanyagra számítva/ /CI5F Az oldat kezelése Fruktóz Glükóz Pszikóz Foliszcharid X100/ Izomerizálatlan 0 96,9 0 3,1 0 70 °C-on izomerizált 51,4 45,9 0 2,7 0 112,6 °C-on izomerizált 55,4 42,0 0,1 2,5 8,5 Az eredmények azt mutatják, hogy 55,4 t%~ os fruktóztartalmat értünk el, miközben a pszikóztartalom szárazanyagra számítva 0,2 tömeg% alatt maradt, az elszíneződés pedig kisebb, mint 9 (CIRFX100). 6. Példa Ez a példa egy lényegében finomított, kis sótartalmú kukoricakeményítő-hidroüzátumból álló oldat közvetlen izomerizálását mutatja be. szárazanyagra számítva 54.8 t% fruktóztartalmú és igen alacsony (0,1 t% -nál kisebb) pszikóztartalmú szirup előállítása céljából, melynek színezése kisebb, mint 2 CIRFX100. Kétfázisú izomerizálási eljárást g-, alkalmazunk, ahol az első (alácsony hőmérsékletű) reaktor 70°C-on, a második (magas hőmérsékletű) reaktor pedig 105,8°C-on működik. A magas hőmérsékletű reaktorban olyan stabilizált izomerázt használunk, melyet kovalens kötésekkel több ponton egy oldható polimerhez kapcsoltunk, majd a megkö15
