199508. lajstromszámú szabadalom • Eljárás GRF peptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199508 B 10 Vékonyréteg-kromatográfiásan (TLC) és nagynyomású folyadék-kromatográfiásan (HPLC) vizsgálva a termék lényegében tisztának bizonyult. A forgatóképességét fotoelektromos polariméterrel vizsgáltuk. Kitermelés: 151 mg. [a]|2=—61,4°±1 (c= 1, 1 %-os ecetsav, korrigálásán). A szintézist klórmetilezett gyantát használva megismételtük, így ugyanennek a pepiidnek a szabad sav formáját kaptuk. 3. példa A H-Tyr-Ala-Asp-A!a-lle-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2 képletű rövidített [Nle27]-phGRF(l-32)-NH2 XhGRF analóg előállítása A pepiidet MGHA gyantán, lépésenként, Beckman 990 Peptide Synthetizert használva állítottuk elő az 1. példa szerinti módon. A kapott anyagot TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva az lényegében tisztának bizonyult. Az optikai forgatóképességet fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [a]&2=—57,8°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan). Kitermelés: 137 mg. Ugyanezt az általános szintézist alkalmaztuk [Nie27]-hGRF( 1-44)-NH2 előállítására. 4. példa A H-Tyr-Ala-Asp-AIa-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Nle-NH2 képletű [Nie27] -hGRF(l-27)-NH2 előállítására A peptidet MBHA gyantán, lépésenként, Beckman 990 Peptide Synthetizert alkalmazva állítottuk elő az 1. példa szerinti módon. A terméket TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva, az lényegében tisztának bizonyult. [a]p2=—62,4°±1 (c=l, 1%-os ecetsav) 5. példa A H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Ile-Ser -Arg-GIn-GIn-Gly-OH képletű [Ile27]-hGRF(l-32)-OH előállítása A peptidet lépésenként állítottuk elő klórmetilezett gyantát és Beckman 990 Peptide Synthetizert használva az 1. példa szerinti módon. A terméket TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva úgy találtuk, hogy az lényegében tiszta. Optikai forgatóképességét fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [a]j>2= =—61,7°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan). Kitermelés: 265 mg. A szintézist megismételtük MBHA gyantát használva, így a fenti peptid amidált formáját kaptuk. 6. példa A H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-9 -Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-G In-Asp-I le- D-Met-Ser-Arg-G!n-G!n-GIy-NH2 képletű [D-Met27]-hGRF(l-32)-NH2 előállítása A peptidet MBHA gyantán, lépésenként, Beckman 990 Peptide Synthetizert használva állítottuk elő az 1. példa szerinti módon. A kapott anyagot TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva az lényegében tisztának bizonyult. Az optikai forgatóképességet fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [a]£2=—54,5°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan). Kitermelés: 149 mg. 7. példa A H-His-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2 képletű [His1 ] -hGRF(l-32)-NH2 előállítása A peptidet MBHA gyantán, lépésenként, Beckman 990 Peptide Synthetizert használva állítottuk elő az 1. példa szerinti módon. A kapott anyagot TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva az lényegében tisztának bizonyult. Az optikai forgatóképességet fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [a]|2=—58,7°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan). Kitermelés: 45 mg. A szintézist megismételtük láncvégi csoportként Phe-t alkalmazva, így [Phe1]-hpGRF(l-32)-NH2-t kaptunk. Az optikai forgatóképességet fotoelektromos polariméterrel határoztuk meg. [a]£2=—58,2°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan). Kitermelés: 45 mg. 8. példa A H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser -Phe-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-GIn-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2 képletű [Phe10] -hGRF( 1 —32)-NH2 előállítása A peptidet lépésenként állítottuk elő klórmetilezett gyantát és Beckman 990 Peptide Synthetizert használva az 1. példa szerinti módon. A terméket TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva úgy találtuk, hogy az lényegében tiszta. Optikai forgatóképességét fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [ot]S2=—59,5°±1 (c=l, 1%-os ecetsav, korrigálatlan) Kitermelés: 180 mg. 9. példa A H-Tyr-Ala-Asp-Ala-lle-Phe-Thr-Asn-Ser -Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Val-Ser-Arg-GIn-GIn-Gly-OH képletű [Val27] -hGRF(l-32)-ÖH előállítása A peptidet lépésenként állítottuk elő klórmetilezett gyantát és Beckman 990 Peptide Synthetizert használva az 1. példa szerinti módon. A terméket TLC-vel és HPLC-vel vizsgálva úgy találtuk, hogy az lényegében tiszta. Optikai forgatóképességét fotoelektromos polariméterrel mértük meg. [a]ő2= 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
