199473. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kristályos karbapeném-származékok és az azt hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199473 B 16 készült oldatát csepegtetjük, és az elegyet —5°C és 0°C közötti hőmérsékleten 1 órán át keverjük. A reakcióelegyhez 5 ml 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfátot adunk, a vizes fázist elválasztjuk és 5 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot hozzáadjuk a szerves fázishoz, vizes konyhasó-oldattal mossuk és izzított magnézium-szulfát és kálium-karbonát 1:1 arányú keverékével vízmentesítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatografálva tisztítjuk. A kapott termék (4R,5S, 6S,8R,2’S,4’S) -all il-3-(4- fi- (allil-oxi-karbonil ) -2-( dimetil-amino-ka rbon il )-pírról idini I - -tio) -4-metil-6- [ 1 -(trimetil-szilil-oxi) -etil] -1 - -azabiciklo [3.2.0] hept-2-én-.-on-2-karboxi!át, amelynek IR színképe azonos all. példában megadottal. 16. példa 15 g 90%^os tartalmi értékű (3S,4S)-3- [ (IR)-1 - (trimetil-szilil-oxi) -etil] -4- [ ( IR) -1 - (fenil-tio-karbonil) -etil] -1 -(allil-oxi-karbonil-metil)-2-azetidinont 65 ml vízmentes 4:1 arányú toluol-tetrahidrofurán elegyben oldunk. Az oldatot —15°C és —10°C közötti hőmérsékleten hozzáadjuk 4,2 g (105 mmól) 60%-os nátrium-hidridet, 4,0 g (33 mmól) allil-bromidot és 28 mg trimetil-szilanolt tartalmazó 115 ml vízmentes 4:1 arányú toluol-tetrahidrofurán elegyhez és ezt követően a reakcióelegyet 3 órán át keverjük, majd ugyan ezen a hőmérsékleten 9,67 g (36 mmól) difenil-(klór-foszfát) 15 ml vízmentes 4:1 arányú toluol-tetrahidrofurán eleggyel készült oldatát adjuk hozzá. A keverést további 4 órán át folytatjuk, majd a reakciót néhány csepp 0,1 mólos foszfát puffer (pH 7,0) hozzáadásával leállítjuk. Ezután a reakcióelegyhez 150 ml 0,1 mólos foszfát-puffért (pH 7) adunk, majd az elegyet 150 ml etil-acetáttal extraháljuk. A fázisokat elválsztjuk és a vizes fázist újabb 100 ml etil-acetáttal kivonatoljuk. Az extraktumokat hozzáadjuk a szerves fázishoz, amelyet ezután izzított magnézium-szulfát és kálium-karbonát 1:1 arányú keverékével vízmentesítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot oszlopkromatografálással tisztítjuk (adszorbens: szilikagél; eluens 95:5 és 90:10 arányú toluol — etil-acetát elegy). A kapott termék (4R,5R, 6S.8R)-allil-3-(difenii-foszforil-oxi) -4-metil-6-[1-(trimetil-szilil-oxi)-etil]-1-azabiciklo -[3.2.0] hept-2-én-7-on-karboxilát. IRm« (hígítás nélkül): 1780, 1725, 1630, 1588, 1483, 1285, 1250, 1182, 955 cm“1 ‘H-NMR (CDCI3), 6: 0,11 (9H, s), 1,19 (3H, d, =7,3 Hz), 1,25 (3H, d, J= =6,3 Hz), 3,24 (1H, dd, J=3,0 és 6,6 Hz), 3,46 (1H, m),'4,ll (1H, dd, J=3,0 és 10,6 Hz), 4,18 (1H, m), 4,66 (2H, d, J=5,61 Hz), 5,20 (1H, d, J=10,6 Hz), 5,37 (1H, d, J= 17,2 Hz), 5,86 (1H, m), 7,21—7,41 (10H, m). 15 17. példa 290 mg (4R,5R,6S,8R)-allil-3-(difenil-foszforil-oxi)-4-metil-6- [1 - (trimetil-szilil-oxi) - -etil] -1-azabiciklo [3.2.0] hept-2-én-7-on-2 - -karboxilátot 1,5 ml vízmentes acetonitriiben oldunk. Az odathoz 142 mg (2S,4S)-1- (allil-oxi-karbonil)-2-(dimeti!-amino-karbonil)-4- -merkapto-pirrolidint adunk és az elegyet — 15°C-ra hűtjük. Az elegyhez ezután 77,5 mg diizopropil-etil-amin körülbelül 0,2 ml vízmentes acetonitrille! készült oldatát csepegtetjük, és az elegyet 5 órán át —15°C és —10°C közötti hőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyhez ezután 10 ml 0,1 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfátot és 10 ml etil-acetátot adunk, majd a fázisokat elválasztjuk. A szerves fázist 10 ml vizes kálium-dihidrogén-foszfát-oldattal mossuk, meggyőződünk arról hogy a vizes fázis pH értéke 4—5 között van-e, s ezután a szerves fázist 5—15 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A trimetil-szilil-csoport lehasadásának megtörténtét vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel ellenőrizzük (alkalmazott elegy: benzol és ecetsav 1:1 arányú elegy). A reakció lejátszódása után a szerves oldószeres oldatot telített vizes konyhasó-oldattal mossuk, izzított magnézium-szulfát és kálium-karbonát 18 arányú keverékével vízmentesítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatografálva tisztítjuk. A termék, a (4R,5S,6S,8R,2*S,4’S) -allil-3- (4(1- -(allil-oxi-karbonil)-2-(dimetil-amino-karbonil)-pírról idinil]-tio) -4-metil-6- [1 -(hidroxi-etil)-l-azabiciklo[3.2.0] hept-2-én-7-on - 2 - -karboxilát azonos a 12. példa termékével UV, IR és NMR adatok alapján. 18. példa A 16. példa szerint előállított nyers (4R, 5R, 6S,8Rj-allil-3-(difenil-foszforil-oxi)-4-metil-6- [1- (trimetil-szilil-oxi) -etil] -1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-én-7-on-2-karboxilátot a 17. példa szerinti eljárással (4R,5S,6S,8R-2S,4’S)-allil-3-(4- [ 1 - ( al Ül-oxi-karbohil) -2-(dimetil - -amino-karbonil) -pirrolidinil] -tio)-4-metil-”- [ 1 - (hidroxi-etil) ] -1 -azabiciklo [3.2.0] hept-2- -én-7-on-2-karboxiláttá alakíthatjuk. Annak bizonyítására, hogy a kristályos (a) képletű vegyület stabilabb, mint az ismert, amorf vegyület, az alábbi vizsgálatokat végeztük. A 126 587 számú európai szabadalmi leírás szerinti eljárással előállított, amorf (a) képletű vegyület és a találmány szerinti eljárással előállított, kristályos trihidrát 1 — 1 mintáját lezárt üvegben 50°C hőmérsékleten tároltuk és időnként nagynyomású folyadékkromatográfiás úton (oszlop: Sumipax ODS A-212, hordozó: 7,0 pH-értékű foszíát-puffer és metanol 100:20 arányú elegy, detektálás: UV 300 nm-en) meghatároztuk a minták hatóanyagtartalmát. Az eredményeket az alábbi 1. táblázatban foglaljuk össze és az 1. ábrán szemléltetjük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
