199441. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,3-tiazolil- illetve 1,3,4-tiadiazolil-származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
15 HU 199441 B 7. kísérlet A csontvelő-telepek képződésére gyakorolt hatás 6—8 hetes B6D2F1 egereken a 7. példa szerinti vegyűlet hatását vizsgáltuk a csontvelő-telepek serkentésére. Nőnemű egereknek a vizsgált anyagot 2,5 mg/kg, illetve 5 mg/ /kg dózisban adtuk be intraperitoneálisan. Egy nappal később az állatokat leöltük, a csontvelősejteket izoláltuk és általánosan ismert módszerek (Metcalf, Immunology 21, 427, 1971; Stanley és munkatársai, J. Exp. 10. Med. 143, 631. 1976) segítségével tenyésztettük. A csontvelő-telepek kifejlődése érdekében „CSF"-forrásként (Colony stimulating factor) a szokásos módon 15%-os L-sejt-fe- 5 lülúszót használtunk. Vetés után 8 nappal megszámoltuk a telepeket. A 10. táblázatból kivehető módon a vizsgált anyag 2,5 és 5 mg/ /kg dózisú egyszeri adagolása a csontvelő-telepek képződését észrevehetően serkenti, 10 Colony stimulating factor adagolása esetén és enélkül egyaránt. 16 táblázat A csontvelő képződésére gyakorolt hatás (in vív:) Kezelés, dózis A csontvelő-telepek száma a 8. nap:.-. : i.p. CSF adagolásával CSF nélkill PBS 77 + 6 . 2 + 1 2,5 13** + 10 56 ± 4 5,0 217 + 7 117 + 11 Az alábbi példák a találmányt részletesebben ismertetik, az oltalmi kör minden korlátozása nélkül. 1. példa 1. lépés 35 2-merkapto-4-metil-l,3-tiazol-5-ll-ecetsav-metilészter 27 g (0,14 mol) 2-merkapto-4-metiI-l,3- -tiazol-5-il-ecetsav 230 ml metanollal készített oldatához 6 ml tömény sósav-oldatot cse- 40 pegtetünk. Az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, a csapadékot leszivatjuk és kevés metanollal mossuk. 14,3 g (49,3%) cím szerinti terméket kapunk. Az anyalúgból további 12,0 g (41,4%) termék nyerhető. Op.: 134—135°C. 45 NMR (d6-DMSO) 6 = 8,67 ppm s széles, 1H, -SH 3,30 ppm s 2H, -CH2-COOCH3 2,03 ppm s 3H, 4-CH3 2. lépés 50 2-metiI-tio-4-meti!-l,3-tiazol-5-il-ecetsav - -metilészter 28,0 g (0,14 mol) 1. lépés szerinti vegyületet feloldunk 500 ml acetonban, és 38,1 g (0,28 mol) finomra porított kálium-karboná- 55 tot, majd 10 perc elteltével 21,6 g (9,5 ml; 0,15 mól) metil-jodidot adunk az elegyhez. A hőmérséklet enyhén emelkedik. Az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd rotációs bepárlóban betöményítjük. 36,1 g (az elméleti hozam 100%-a) cím szerinti ter- 60 méket kapunk sárga olaj alakjában. NMR (d6-DMSO) 6 = 3,50 ppm, sz, 2H, -CH„-COOCH3 3,30 ppm, sz, 3H, -CH2- -CQOCH, 2,63 ppm, sz, 3H, -S-CH3 2,23 ppm, sz, 3H, 4-CH3 3. lépés 2-metil-merkapto-4-metil-l,3-tiazol-5-il-ecetsav A 2. lépés szerint előállított vegyűlet 36,1 g -ját (0,166 mólját) 50 ml metanolban oldjuk, és az oldathoz 100 ml 2n nátrium-hidroxid -oldatot adunk. Az elegyet visszafolyató hűtő alkalmazásával egy órán át forraljuk, a metanolt ledesztilláljuk, és lehűlés után az elegyet etil-acetáttal kétszer extraháljuk. A pH-értéket tömény sósavval 3-ra állítjuk, a keletkező csapadékot leszivatjuk, majd izopropanolból átkristályosítjuk. 21,2 g (az elméleti hozam 62,9%-a) cím szerinti terméket kapunk, amely 159—160°C-on olvad. IR-színkép (KBr): 1870, 1710, 1550 cm~l NMR (d6-DMSO) 6 = 3,73 ppm, sz, 2H, -CH2- -COOH 2,63 ppm, sz, 3H, -S-CH3 2,20 ppm, sz, 3H, 4-CH3 12,77 ppm, sz, 1H, -COOH 2. példa 1. lépés 2-etilmerkapto-4-metil-l,3-tiazol-5-il-ecet-sav-metilészter Az 1. példa 1. lépése szerint előállított vegyűlet 2,03 g-ját az 1. példa 2. lépése szerint reagáltatjuk kálium-karbonáttal és etil-jodiddal. A feldolgozás azonos. 2,8 g terméket kapunk olaj alakjában. NMR (d6-DMSO) 6 = 3,83 ppm, sz, 2H, -£H2- -C02CH3 3,63 ppm, sz, 3H, -COO-CH3 3,10 ppm, q, 2H, -SCHXH, 2,23 ppm, sz, 3H, 4-CH3 1,33 ppm, t, 3H, -S-CH2CH3 65
