199168. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új makrolid-antibiotikum és az új antibiotikumot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199168 A találmány tárgya mikrobiológiai eljárás az új swalpamicin nevű makrolid-antibiotikum előállítására a Streptomyces species Y-84,30967 (DSM 37 40) mikroorganizmus segítségével. A találmány az új antibiotikumot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is kiterjed. A HIL Y-84,30967 tenyészetszámmal ellátott mikroorganizmust (az alábbiakban: Str. sp. Y-84,30967) egy Puné mellett (Maharashtra, India) vett talajmintából izoláltuk. A törzs mutánsai és variánsai ismert módon, például mutagén ágens, így N-metil-N-nitro-N’-nitrozo-guanidin vagy ultraibolya besugárzás alkalmazásával állíthatók elő. A Str. sp. Y-84, 30967 sz. mikroorganizmus az Actinomycetales rendjébe, a Streptomycetaceae családhoz és a Streptomyces nemzetséghez tartozik. Egyes Streptomyces fajtákról ismert, hogy makrolid típusú antibiotikumot termelnek (T. Osono, Y. Oka, S. Watanabe, Y. Numazaki, K. Moriyama, H. Ashida, K. Suzuke, Y. Okami és H. Umezawa: J. Antibiotics 20, 174 (1967); S. Omura, Y. Hironaki és T. Hata: J. Antibiotics 23, 511 (1970); I. Haupt, H. Fricke, J. Cerna és I. Rychlik: J. Antibiotics 29, 1314 (1976); S. Omura és H. Tanaka „Macrolide Antibiotics (Makrolidantibiotika)" antológiában, 3—35. old., S. Omura (kriadó) Academie Press, Orlando, Florida, USA (1984)). A Str. sp. Y-84,30967 mikroorganizmust új törzsnek tekintjük, mert morfológiai, tenyésztési és fiziológiai tulajdonságaiban az ismert törzsektől különbözik, ahogy az alábbi leírásból kitűnik. Üj törzsnek azért is tekinthető, mert egy új, itt swalpamicinnek nevezett makrolid-antibiotfkumot és egy új, itt swalpanolidnek nevezett makrolid-aglikont termel, amire még kitérünk. A markolid-antibiotikumok fontos szerepet játszanak a gyógyászatban, mint Gram pozitív baktériumok és mikoplazmák széles spektrumával szemben hatásos antimikróbás hatóanyagok. Az eddig leírt makrolid-antibiotikumok közül főleg eritromicin, leukomicin, oleandomicin, spiramicin és midekamicin a humán gyógyászatban kerül felhasználásra. A makrolidokról áttekintést nyújtó cikk található például az „Antibiotics" 2. kötetének 154—188. oldalán, Z. Vankek és J. Majer tollából. További irodalom: D. Gottlieb és P. D. Shaw (kiadó), Springer, New York (1967); D. Vasques az „Antibiotics" 3. kötetében, a 459—479. oldalon; W. Corcoran és F. E. Hahn (kiadó), Springer, New York; J. Berdy „CRC Handbook of Antibiotic Compounds", 2. kötet, 39—156. oldal, CRC Press, Boca Raton, Florida (1980)). A makrolid.antibiotikumok összefoglalása található az „Index of Antibiotics from Actinomycètes" 1. kötetében (főkiadó: Hamao Umezawa), 114., 123., 135., 171., 172., 207., 223., 373., 382.384., 604—606. és 669. 2 1 oldalon (Univers. Park Press, State College, Pennsylvania, USA (1967), és II. kötetében a 254., 255., 287—289., 305., 357—363—. 481., 483., 508., 509., 532—537., 549—550., 573—579., 630—635., 639—641., 809-823. és 1013—1014. oldalon, Univ, Park Press Baltimore, USA (1978). Az S. Omura által szerkesztett, az Academic Pressnél (Orlando, Florida, USA 1984) kiadott „Macrolide Antibiotics — Chemistry, Biology and Practice" átfogó áttekintést nyújt a makrolid-antibiotikumokról, bioszintézisüket, kémiai átalakításúak, kémiai szintézisüket, valamint a humán és állat gyógyászatban betöltött szerepüket részletesen tárgyalja-Az aglikont képező makrociklusos laktongyűrű mérete alapján a makrolid-antibiotikumokat 3 főcsoportba sorolják (A. K. Mallams a „Makrolides" c. könyv. 156. old., M. Grayson (kiadó), Wiley, New York (1982)): Az első csoportot a 12-tagú makrolidok képezik, amelyekhez a metimicin, a neotimicin és az YC-17 tartozik; a második csoportot a 14-tagú makrolidok alkotják, amelyek fontosabb képviselői az eritromiuin, oleandomicin, lankamicin, megalomicin, pikromicin és narbomicin. A harmadik csoport a 16-tagú makrolidokat foglalja magában, amelyek kétféle lehet, mégpedig a) bázikus, legalább egy aminocukorcsoportot tartalmazó makrolid-antibiotikumok, így például angolamicin, leukomicin, spiramicinek, rozamicin, makinamicinek, M-4365 G, és G2, valamint tilozin, b) a semleges, aminocukrot nem tartalmazó makrolid-antibiotikumok. E csoport képviselőiként például a kalkomicin (P.W.K. Woo et al., J. Amer. Chem. Soc. 84, 880; 1512, 1066 (1962)), neutramicin (D.V. Lefemine et al., Antimicrob. Agents Chemother, 41. old. (1961)), aldgamicin (M. P. Kunstmann et al., Antimicrob. Agents Chemother, 87. old. (1964)) és néhány micinamicin (K. Kinoshita et al., J. Antibiotics 38, 522—526 (1985)). Az új makrolid-antibiotikum, a swalpamicin a semleges makrolidok csoportjába tartozik, de kalkomicintől, neutramicintől, az aldgamicinektől és a micinamicinektől különbözik, ahogy a HPLC-kromatogramból (1. ábra), a fizikai-kémiai tulajdonságokból és a színképekből (2—5. ábra) kitűnik. A találmány tárgya tehát eljárás az (I) képletű swalpamicin makrolid-antibiotikum előállítására. Az eljárásra jellemző, hogy a Streptomyces sp. DSM 3740 mikroorganizmust aerob körülmények között 18°C és 40°C közötti hőmérsékleten asszimilálható szén- és nitrogénforrást, valamint életfontosságú ásványi sókat tartalmazó vizes tápközegben 6 és 9 közötti pH mellett tenyésztjük, és ha a közeg már lényeges antibiotikum aktivitást mutat, a fermentálás termékét a tápközegből kinyerjük. Az új antibiotikum számos patogén mikroorganizmus, egyebek között Gram pozitív 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
