199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 és 25 mg között lehet, amelyet egyszerre, vagy 2— 4 részre elosztva kaphat meg a páciens. Az (1) általános képletíi enziminhibitorokat gyógyszerészetileg elfogadható segédanyagokkal alakítjuk vérnyomáscsökkentő vagy fájdalomcsillapító szerként használatos gyógyszerkészítménnyé. Orális készítményként megfelelőek a tabletta, kapszula és elixir, parenterális beadáshoz pedig steril oldatot vagy szuszpenziót alkalmazhatunk. Ezeknek a készítményeknek a hatóanyag-tartalma 10 és 500 mg között van, amelyet fiziológiásán elviselhető hígító-, hordozó-, kötő- és töltőanyagokkal, valamint konzerváló-, stabilizáló- és ízjavítószerekkel összedolgozva a gyógyászatban szokásos, dózisegységekként adagolható formává alakítunk. A találmány szerinti eljárást az alábbi példákkkal illusztráljuk. A hőmérsékletet 0°C- ban adjuk meg. 1. példa 3- [ [ ( S)-3-fenil-2- [ ( H idroxi-metil-foszf inil )-oxi] -1-oxo-propil] -amino] propánsav dilítium sója a) (S)-3-Fenil-2-hidroxi-propánsav 33.04 g (200 mmól) 3-fenil-L-alanin 500 ml 10%-os kénsavval készült oldatához keverés közben, 50°C-on, 6 óra alatt cseppenként beadagolunk 51,8 g (720 mmól) nátrium-nitritet 200 ml vízben oldva. Az adagolás befejeztével a reakcióelegyet előbb 3 óra hoszszat 50°C-on, majd éjszakán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezután háromszor 200 ml és kétszer 100 ml etil-acetáttal extraháljuk a reakcióelegyet, az extraktumokat egyesítve mossuk nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfonáton megszárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 28,98 g sárga, szilárd maradékot kapunk. Benzolból átkristályosítva, az (S)-3-fenil-2-hidroxi-propánsavat fehér, 120—124°C-on olvadó tűk formájában kapjuk, amelynek tömege 22,15 g. [a]D =-29,0° (c=l,05, aceton). Vékonyréteg-kromatográfiás R/ értéke 0,32, szilikagélen, benzol-ecetsav 7:3 oldószerelegyben. b) 3-[ ](S)-3-Fenil-2-hidroxi-l-oxo-propil]-amino] -propánsav-benzil-észter 14.05 g (40 mmól) P-alanin-benzil-észter-(p-toluoiszulfonát)-ot 120 ml vízmentes tetrahidrofuránban szuszpendálunk, és argongáz alatt, 0°C hőmérsékleten hozzáadjuk a következő anyagokat: 7,0 ml (40 mmól) etil-diizopropil-amin, 6,65 g (40 mmól) (S)-3- -fenil-2-hidroxi-propánsav, 5,4 g (40 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-víz (1/x) és 8,25 g (40 mmól) diciklohexil-karbodiimid 50 ml tetrahidrofuránnal készült szuszpenziója. A reakcióelegyet éjszakán át keveredni hagyjuk, miközben fokozatosan engedjük szobahőmérsékletre melegedni. A diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és mossuk etil-acetáttal. A szűrletet bepároljuk és a maradékot felvesszük 300 ml etil-acetátban, mossuk 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, majd 4 5 nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 12,18 g olajat kapunk. Ezt az olajat Merck 9385 szilikagélen, eluensként hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyét alkalmazva, flash-kromatográfiával tisztítjuk. Az így kapott 8,93 g 3-[[(S)-3-fenil-2-hidroxi-l-oxo-propil] -amino] -propánsav-benzil-észter 34— 38°C-on olvadó színtelen kristályokból áll. Szilikagél vékonyrétegen etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot, R/=0,23. c) Dibenzil-(metil-foszfonát) 832 mg (20,8 mmól) 60%-os olajos nátrium-hidrid diszperziót argongáz alatt 30 ml N, N-dimetil-formamidban szuszpendálunk, majd egy adagban hozzáadunk 5,24 g (20 mmól)dibenzil-foszfonátot. Az elegyet 1 óra hosszat szobahőmérsékleten, majd 30 percen át 40°C-on kevertetjük. Az éles sárga oldatot hagyjuk lehűlni szobahőmérsékletre, és 5 perc alatt hozzácsepegtetjük 3,36 g (23,7 mmól) metil-jodid 3 ml N,N-dimetil-formamiddal készült oldatát. Egy órányi szobahőmérsékleten folytatott keverés után az elegyet 200 ml 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldatra öntjük, egyszer 100 ml és négyszer 50 ml etil-acetáttal extraháljuk, majd az egyesített extraktumot mossuk kétszer 50 ml nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és nátrium-klorid-oldattal, végül szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 4,39 g sötétsárga folyadékot kapunk. A nyersterméket 325 g Whatman LPS-1 szilikagélen, eluensként etil-acetát és hexán 3:2 arányú elegyét használva, flash-kromatográfiával tisztítjuk, amikor is 2,27 g halványsárga folyadékként kapjuk a dibenzil-(metil-foszfonátot). Vékonyréteg-kromatográfiás R/ értéke szilikagélen, etil-acetát-hexán 3:2 elegyben: O, 17. d) 3-[[(S)-2-[[(Benzil-oxi)-metil-foszfinil] -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] - -propánsav-benzil-észter 1,66 g (6 mmól) dibenzil-(metil-foszfonát) 15 ml vízmentes benzollal készült oldatához, nitrogéngáz alatt, 1,31 g (6,3 mmól) foszfor (V)-kloridot adunk. Az elegyet 30 percen át szobahőmérsékleten, majd 45 percen át 60°C-on kevertetjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot benzolban felveszszük és bepároljuk, majd ezt a műveletet még egyszer megismételjük, hogy a foszfor-triklorid-oxid utolsó nyomait is eltávolítsuk. A fenti nyers klór-foszfonátot feloldjuk 6 ml vízmentes metilén-dikloridban, és argongáz atmoszférában hozzáadjuk 1,96 g (6 mmól) 3- [ [ (S)-3-fenil-2-hidroxi- 1-oxo-propil] -aminő] -propánsav-benzil-észter, valamint 89 mg (0,6 mmól) 4- ( 1 -pirrolidinil) -piridin 6 ml metilén-dikloriddal készült oldatát. Az elegyet lehűtjük 0—5°C hőmérsékletre, és hozzácsepegtetjük 20 pert alatt 1,10 ml (6,3 mmól) etil-diizopropil-amin és 6 ml metilén-diklorid elegyét. 1 óra hosszat 0—5°C-on, majd éjszakán át szobahőmérsékleten kevertetjük 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
