199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 az elegyet. Az oldószert ezután ledesztilláljuk, és a maradékot 175 ml etil-acetátban feloldjuk. Az oldatot 10%-os kálium-hidrogén - -szulfát-oldattal, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, majd nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeként 3,2 g sárga olajat kapunk. A nyersterméket először 300 g Whatman LPS-1 szilikagélen, etil-acetát-hexán 6:1 eleggyel flash-kromatograraljuk, amikor is 270 mg, egy gyorsan vándorló idegen anyaggal szennyezett foszfonsavészter A izomert, 311 mg A és B izomer keverékét, ami ugyancsak szennyezve van a gyorsan vándorló idegen anyaggal, valamint 788 mg B izomert kapunk. Az első két frakciót egyesítjük, és Merck 9385 szilikagélen, eluensként dietil-éter és aceton 82:18 arányú elegyét használva, ismételten flash-kromtografáljuk. Az így kapott termék 180 mg 3- [ ( (S) -2- [ [ (benzil-oxi) -metil-foszfinil] -oxi]*. -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav-benzil-észter A izomer, amelynek olvadáspontja 59—62°C, vékonyréteg-kromatográfiás R/-értéke szilikagélen, dietil-éter és aceton 4:1 arányú oldószerelegyben: 0,21; 86 mg B izomer, amelynek olvadáspontja 74—77°C, vékonyréteg-kromatográfiás R/-értéke az említett rendszerben: 0,15; és 236 mg, a két izomer keverékéből álló anyag. A következő lépésben az izomerek keverékét használjuk. e) 3- [ [(S)-3-fenil-2- [( Hidroxi-metil-foszfinil)-oxi]-l-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója 1,97 g (2,16 mmól), a d) pont szerinti észtert feloldunk 25 ml etil-acetát és 2,5 ml ecetsav elegyében, hozzáadunk 200 mg 10%-os csontszenes palládiumkatalizátort, és hidrogéngáz áramban 3,5 óra hosszat kevertetjük az elegyet. Ezután a katalizátort kiszűrjük és az oldószert lepároljuk. A maradékot feloldjuk toluolban és bepároljuk, majd ezt a műveletet még egyszer megismételjük. A visszamaradt anyagot vízben szuszpendáljuk, és hozzáadunk 2 ml 2 N lítium-hidroxid-oldatot. Az így kapott oldatot betöményítjük, és felvisszük egy 21X3 cm-es HP-20 adszorbenssel töltött oszlopra (porózus szerkezetű, térhálósított polisztirén-divinil-benzol polimer gyanta), majd vízzel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, szűrjük, betöményítjük és végül liofilizáljuk, aminek eredményeképpen 0,63 g 3- [ [(S)-3-fenil-2v[ (hidroxi-metil-foszfinil)-oxi] -1-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsót kapunk, amely fehér szilárd anyag. Az olvadáspontja 260°C felett van (249°C felett bomlik); [cz]d=39,90 (c=0,98, metanol). Vékonyréteg-kromatográfiás R/-értéke a szilikagélen, kloroform, metanol és ecetsav 6:1:1 arányú oldószereleggyel kifejlesztett kromatogramon: 0,23. 2. példa 3-[ [ (S)-2- [ [(2-Fenil-etil)-hidroxi-foszfinil] - -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -propánsav dilítiumsója 7 a) Dibenzll- [(2-fenil-etil)-foszfonát) 1,45 g (59,4 mmól), előzetesen megmosott nátrium-hidridet 40 mi vízmentes N,N-dimetil-formamidban felszuszpendálunk, és argongáz alatt, szobahőmérsékleten, állandó keverés közben hozzácsepegtetünk 11,93 ml (54 mmól) dibenzil-foszfonátot. 1,5 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük az .elegyet, majd a barna homogén oldathoz 7,38 ml (54 mmól) fenetil-bromidot adunk, és folytatjuk a kevertetést további 20 percen át. Az elegyet 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat és etil-acetát keverékére öntjük, összerázzuk, majd a szerves fázist mossuk nátrium-klorid-oldattal és nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldatot bepárolva 20,6 g sárga, viszkózus olaj marad vissza, amelyet Whatman LPS-1 szilikagélen flash-kromatográfiával tisztítunk, eluensként hexán és etil-acetát 7:3 arányú elegyet használva. A terméket tartalmazó frakciókat bepárolva 12,6 g dibenzil- [ (2-fenil-etil) -foszfonát] -ot kapunk, színtelen, tiszta olaj formájában. A vegyület R/-értéke a szilikagélen, petroléter és dietil-éter 1:1 arányú elegyével kifejlesztett vékonyréteg-kromatogramon: 0,11. b) 3-[ [(S)-2-[[(Benzil-oxi)-(2-fenil-etil)-foszfinil] -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] - -amino] -propánsav-benzil-észter 2,20 g (6 mmól) dibenzil-[ (2-fenil-etil) - -foszfonát] 15 ml vízmentes benzollal készült oldatához 1,3 g (6,3 mmól) foszfor(V)-kloridot adunk, és a reakcióelegyet 30 percen át, szobahőmérsékleten, nitrogéngáz atmoszférában keveredni hagyjuk. Az oldószert ezután vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot kétszer egymás után vízmentes benzolban feloldjuk, majd vákuumban bepároljuk. A fenti klór-foszfonátot feloldjuk 6 ml frissen desztillált metilén-dikloridban, és hozzáadjuk 1,96 g (6 mmól) 3- [ [ (S)-3-fenil-2-hidroxi-1-oxo-propil] -amino] -propánsav-benzil-észter, valamint 89 mg (0,6 mmól) 4-(l-pirrolidinii)-piridin 6 ml frissen desztillált metilén-dudoriddal készült oldatát. A reakcióelegyet jégfűrdőben hűtjük, és nitrogéngáz atmoszférában, 20 perc alatt bec,sepegtetünk 814 mg (6,3 mmól) etil-diizopropil-amint 6 ml frissen desztillált metilén-dikloridban «ldva. Ezután az elegyet 1 óra hosszáig hidegen, éjszakán át pedig szobahőmérsékleten kevertetjük. Az oldószert másnap vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk 175 ml etil-acetátban, mossuk 40—40 ml 10%-os kálium-hidrogén szulfát-oldattal, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, megint vízzel, és végül nátrium-klorid-oldattal. Magnézium•szulfáton megszárítva majd vákuumban bepárolva, 3,7 g nyersterméket kapunk, amelyet 300 g 230—400 mesh szemcseméretű Merck 9385 kovasavgélen flash-kromatográfiával tisztítunk, hexán és etil-acetát 1:2 arányú elegyével végezve az eluálást. A kapott termék 840 mg 3- [ [ (S) - [ [ (benzil-oxi) - (2-fenil-etil) -foszfinil] -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -aminő] -propánsav-benzil-észter, amely egy olaj. A 8 5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
