199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 mazállapotú, 200—‘210°C-on bomlás közben olvadó 4- [ ( (S) -3-fenil-2- [ (hidroxi-metil-foszfinil) -oxi] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsó tömege 1,57 g. [a]D=-90° (c=0,9, víz). A szilikagélen, izopropií-alkohol, ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kifejlesztett vékonyréteg-kromatogramon R/=0,51. II. példa 3-1 [ ( S)-3-Fenll-2- [ (hidroxi-metil-foszf inil )-amino] -l-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsója a) Metil-(3-amino-benzoát)-hidroklorid 10 g (72,9 mmól) 3-amino-benzoesavat felszuszpendálunk 200 ml metanolban, lehűtjük -10°C-ra, és becsepegtetünk 17,3 g (146 mmól) szulfinil-kloridot, miközben a hőmérsékletet -5°C alatt tartjuk. Az elegyet ezután éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, vákuumban bepároljuk, majd a maradékot kétszer eldörzsöljük dietil-éterrel. Az így kapott fehér, 207—216°C olvadáspontú metil- (3-amino-benzoát) -hidroklorid tömege 13,2 g. Szilikagél vékonyrétegen, kloroform-metanol-ecetsav 18:1:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,70. b) 3-[ [(S)-2-[(terc-Butoxi-karbonil)-amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter 10 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban feloldunk 1,58 g (8,43 mmól) metil-(3- -amino-benzoát)-hidrokloridot, és hozzáadunk 2,24 g (8,43 mmól) N-(terc-butoxi-karbonil)-3-fenil-L-alanint, 1,14 g (8,43 mmól) 1-hidoxi-benzo-triazolt és 1,09 g (8,43 mmól) desztillált etil-diizopropil-amint. A reakcióelegyet jégfürdőbe merítjük, nitrogéngáz alatt hozzáadunk 1,74 g (8,43 mmól) diciklohexil-karbodiimidet, és egy óra hosszat hidegen kevertetjük, majd éjszakára hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Másnap meghígítjuk 75 ml dietil-éterrel és kiszűrjük a diciklohexil-karbamidot. A szűrletet vákuumban bepároljuk, feloldjuk 75 ml etil-acetátban és mossuk 20— 20 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, megint vízzel, majd nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk, aminek eredményeképpen 4,0 g nyersterméket kapunk. 400 g Merck 9385 kovasavgélen, hekán-etil-acetát 4:1 eleggyel végezve az eluálást, a terméket megtisztítjuk, amikor is 2,2 g fehér, szilárd halmazállapotú, 62—66°C-on olvadó 3- ( [ (S)- 2- [ (terc-butoxi-karbonil)-amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észtert kapunk. Szilikagél vékonyrétegen, hexán-etil-acetát 2:1 eleggyel kromatografálva, Rf=0,32. c) 3-[ [(S)-2-Amino-3-fenil-l-oxo-proil] - -amino] -benzoesav-metil-észter-hidroklorid 2,1 g (5,27 mmól), a b) pont alatti eljárással készült metil-észtert feloldunk 16 ml 1,7 N ecetsavas hidrogén-klorid-oldatban, 27 a reakdóedényt lezárjuk, és szobahőmérsékleten 4 órán át kevertefjük. Ezt követően az elegyet vákuumban bepároljuk és a maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük. Ilyen módon 1,65 g 3- [ [ (S)-2-amino-3-fenil-l-oxo-propil] -aminő] -benzoesav-metil-észter-hidrokloridot kapunk, amely egy fehér, 93—135°C-on bomlás közben olvadó anyag. Szilikagél^ vékonyrétegen, kloroform-metanol-ecetsav' 10:1:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,43. d) 3-[ [(S)-3-Fenil-2-[(metil-metoxi-foszfinil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] - -benzoesav-metil-észter 1,61 g (4,81 mmól) c) pont szerinti hidrokloridsót 100 ml étil-acetát és 100 ml 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat keverékével összerázunk, a szervés fázist elválasztjuk és mossuk nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradék 3-[ [(S)-2-amino-3- -fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter. 7 ml vízmentes metilén-dikloridban feloldunk 680 mg (5,29 mmól), a 8. példa d) pontjában leírtak szerint előállított metil-(klór-foszfonát)-ot, és hozzáadunk 71 mg (0,48 mmól) 4- ( 1 -pirrölidinil) -piridint. A reakcióelegyet jégfürdőbe helyezzük, és nitrogéngáz alatt beadagoljuk a fenti 3-[[(S)-2- -amino-3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter 7 ml vízmentes metilén-diklorid elegyét. A reakcióelegyet hidegen kevertetjük egy órán át, majd hagyjuk, hogy éjszaka szobahőmérsékletre melegedjen. 21 óra múlva további 680 mg (5,29 mmól, 1,1 ekvivalens) klór-foszfonátot és 621 mg (4,81 mmól, 1 ekvivalens) etil-diizopropil-amint adunk az elegyhez, és folytatjuk a kevertetést szobahőmérsékleten, összesen 24 óra reakcióidő elteltével az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 200 ml etil-acetátban, és mossuk 50—50 ml 10%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, 5%os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ismét vízzel, majd nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A kapott 1,52 g nyersterméket flash-kromatográfiával, Merck 9385 szilikagélen, toluol-ecetsav 10:1 eleggyel eluálva tisztítjuk. A tiszta 3- [ [ (S) -3-fenil-2- [ (metil-metoxifoszfinil)-amino] -1-oxo-propil] -amino'] -benzoesav-metil-észter fehér, 178—182°C-on olvadó anyag, amelynek tömege 800 mg. Szilikagél vékonyrétegen, toluol-ecetsav 5:1 elegygyel kromatografálva, R/=0,38; csekély menynyiségű, 0,43 R/-értéknél jelentkező idegen anyag is kimutatható. e) 3-] [(S)-3-Fenil-2-[(hidroxi-metil-foszfinil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsója 750 mg (1,92 mmól), a d) pontban leírtak szerint előállított metil-észtert feloldunk 15 ml metanolban, majd jeges hűtés közben, nitrogéngáz atmoszférában, hozzácsepegtetünk 5,76 ml (5,76 mmól) 1 N lítium-hidroxid-28 15 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
