199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 •oldatot. A reakcióelegyet 15 percen át hidegen kevertetjük, majd éjszakára hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni és másnap vákuumban bepároljuk. A visszamaradó 830 mg nyersterméket két részletben egy 5X25 ernes, HP-20 gyantával töltött oszlopon, eluensként vizet használva kromatografáljuk. A tiszta 3- [ [ (S)-3-fenil-2- [(hidroxi-metil-foszfinil)-amino] -1-oxo-propilJ -amino] -benzoesav dilítiumsó tömege 507 mg, és 250°C-nál magasabb hőmérsékleten olvad. [a]D=-57,2° (c=0,5, metanol). Szilikagél vékonyrétegen, izopropil-alkohol-víz-ammónium-hidroxid 12: :2:1 eleggyel kromatografálva a termék foltjának magja 0,31 R/-értéknél jelentkezik. 12. példa 4*[ [ ( S)-2- [ [(4-Fenil-butil)-hidroxi-foszfinil] - -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter 13 ml tetrahidrofuránban feloldunk 900 mg (4,54 mmól), a 4 745 196 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 4. példája a) pontjában leírtak szerint előállított (4-fenil-butil)-foszfinsavat és 876 mg (29,3 mmól), a 10. példa a) pontjában megadott eljárással készült 4-[ [ (S)-3-fenil-2- -hidroxi-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észtert, majd hozzáadunk 1,16 g (5,6 mmól) diciklohexil - karbodiimidet és 142 mg (1,16 mmól) 4-(dimetil-amino)-piridint. A reakcióelegyet 2,5 óra hosszat szobahőmérsékleten kevertetjük, kiszűrjük a diciklohexil-karbamidot, és a szűrőn maradt anyagot etil-acetáttal alaposan átmossuk. A szűrletet ezután mossuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát- és nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot néhányszor dietil-éterrel eldörzsöljük, hogy az elreagáltatlan kiindulási anyagot kicsapjuk, amelyet azután kiszűrünk, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. Az így kapott nyers foszfonsavészter tömege 1,2 g. A fenti foszfonsavésztert 7 ml 1,4-dioxánban oldjuk, és argongáz alatt hozzáadunk 752 mg (3,51 mmól) nátrium-perjodátot 7 ml vízben oldva, majd éjszakán át szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet. Másnap etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat keverékével összerázzuk, a vizes részt elválasztjuk és még egyszer extraháljuk etil-acetáttal, majd az egyesített szerves extraktumot mossuk 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és vizes nátrium-hidrogén-szulfit oldattal a jód színének eltűnéséig. A szerves fázist ezután még mossuk nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepáfoljuk. A maradékot feloldjuk dietil-éterben, és a kivált kevés kiindulási anyagtól megszűrjük az oldatot, majd vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk etil-acetátban, és hozzáadjuk 488 mg (3,22 mmól) adamantil-amin 33 ml dietil-éterrel készült oldatát. A kivált csapadékot szűrjük, és összerázzuk etil-acetát, valamint 16 29 1 N sósav keverékével. A szerves fázist nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk.'A maradékot etil-acetátból átkristályosítva 725 g fehér kristályos terméket kapunk. Ebből az anyagból egy 135 g-os mintát ismételten átkristályosítva etil-acetátból, 85 mg fehér, kristályos 4-[[(S)-[((4-fenil-butil)-foszfinil] -oxi] -3-fenil-l -oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 150—154°C.. [o]d= =-40.4° (c=0,5, metanol). Szilikagél vékonyrétegen, metilén-diklond-metanol-ecetsav 20:1:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,31 13. példa 4- [ [(S)-2-[ [(4-Fenil-butil)-hidroxi-foszfinil| - -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsó ja 5 ml metanolban feloldunk 590 mg (1,19 mmól), a 12. példában bemutatott eljárással előállított metil-észtert, és szobahőmérsékleten, argongáz alatt hozzáadunk 2,53 ml (2,53 mmól) 1 N lítium-hidroxid-oldatot, majd éjszakán át kevertetjük. A reakcióelegyet ezután vákuumban bepároljuk, ismét feloldjuk vízben, és.tömény sósavval pH 1-re savanyítjuk. A kapott csapadékot szűrjük, aminek eredményeként 445 mg fehér, 183—185°C-on olvadó disavat kapunk. Szilikagél vékonyrétegen, izopropil-alkohol-ammónium-hidroxid-víz 9:2:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,47. A disavat feloldjuk a lehető legkisebb menynyiségű metanolban, vizet adunk hozzá, amíg az oldat zavarosodni kezd, majd 0,87 ml (1,74 mmól) 2 N lítium-hidroxid-oldatot hozzáadva képezzük a lítiumsót. Az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot feloldjuk a lehető legkisebb mennyiségű vízben, és egy 2,5X20 cm-es HP-20 gyanta vizes szuszpenziójával töltött oszlopon kromatografáljuk. Az eluálást 500 ml víz és 500 ml acetonitril elegyével lineáris grádient alkalmazva végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat liofilizálva 250 mg 4- [ [ (S) -2- [ [ (4-fenil-butiI) - -hidroxi-foszfinil] -oxi] -3-fenil-l-oxo-propil] - -amino] -benzoesav dilítiumsót kapunk, amely egy fehér, 250°C feletti hőmérsékleten olvadó anyag. [a]D=-95,4° (c=l, metanol). Szilikagél vékonyrétegen, izopropil-alkohol-ammónium-hidroxid-víz 9:2:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,57. 52. példa Az alábbiakban ismertetendő eljárással előállított tabletta a következő összetevőket tartalmazza: 4- [ [ (S) -3-Fenil-2- [ (hidroxi-metil-30-foszfinil) -amino] -1-oxo-propil] - -amino]-benzoesav dilítiumsó 100 mg Kukoricakeményítő 50 mg Zselatin 7,5 mg Avicel (mikrokristályos cellulóz) 25 mg Magnézium-sztearát 2,5 mg 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
