199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 rid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Az így nyert 5,3 g nyersterméket 400 g Merck 9385 szilikagélen tisztítjuk flash-kromatográfiával, etil-acetát-metanol 80:1 oldószereleggyel végezve az eluálást. A tiszta 4-[[(S)-2-[[(2-feriil-etil)-metoxi-foszfinil] -amino] -1-oxo-propil] - -amino] -benzoesav-metil-észter tömege 4,15 g. Szilikagél-vékonyrétegen, etil-acetát és metanol 20:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot, két foltot kapunk, lévén a termék diasztereomerek keveréke. R/=0,44 és 0,48. d) 4-[[(S)-2-[[(2-Fenil-etil)-hidroxi-foszfinll] -amino] -l-oxo-propll] -amino] - -benzoesav dilítiumsója 2,2 g (5,44 mmól), a c) pontban megadottak szerint előállított metil-észtert feloldunk 36 ml metanolban, az oldatot jégfördőbe merítjük, és nitrogéngáz alatt hozzácsepegtetünk 8,16 ml (16,32 mmól) 2 N lítium-hidroxid-oldatot. Az adagolást követően az elegyet hidegen kevertetjük 15 percen át, majd éjszakára hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, és másnap vákuumban bepároljuk. A párlási maradékként kapott 3,5 nyerstermékhez hozzáadunk még 1,6 g másik kísérletből kapott anyagot, és az összesen 5,1 g lítiumsót egy 5X25 cm-es, HP-20 gyantával töltött oszlopon kromatografáljuk. Grádienselúciót alkalmazva 500 ml víz és 500 ml acetonitril elegyével, fehér, 250°C felett olvadó anyagot kapunk. A 4- [ [ (S)-2- [ [ (2-fenil-etil)-hidroxi-foszfinil] - -amino] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsó tömege 1,55 g. [a] d=-52,0°. (c=0,5, metanol). Vékonyréteg-kromatográfiás fy-értéke: 0,32, a folt tetejét tekintve, szilikagélen, izopropil-alkohol, víz és ammónium-hidroxid 12:2:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot. 10. példa 4-((S)-3-Fenil-2- [(hidroxi-metil-foszfinil )-oxi] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsója a) 4-[ ((S)-3-Fenil-2-hidroxi-l-oxo-propil]-amino] -benzoesav-metil-észter 500 mg (3,01 mmól) (S)-3-fenil-2-hidroxi-propánsavat és 455 mg (3,01 mmól) metil-(4-amino-benzoát)-ot szobahőmérsékleten, argongáz alatt feloldunk 5 ml N,N-dimetil-formamidban, majd 405 mg (3,01 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-H20 hozzáadása után 0°C-rahűtjükazelegyet,és620mg (3,01 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. 1 órányi 0°C-on folytatott keverés után hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni a reakcióelegyet, és folytatjuk a kevertetést éjszakán át. Az illékony alkotórészeket ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk etil-acetátban, és kiszűrjük a diciklohexil-karbamidot. Az oldatot ezután mossuk 5%-os kálium-hidrogén-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradékot egy másik kísérletből származó, hason- 14 25 ló tisztaságú anyaggal Egyesítve, metílén-dikloriddal eldörzsöljük, aminek eredményeként 3,7 g 4-[ f(S)-3-fenil-2-hidroxi-1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észtert kapunk. b) 4- [ [ ( S)-3-Fenil-2- [ (metil-metoxl-foszfinil)-oxi] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter 1,8 g (13,9 mmól), a 8. példa d) pontjában leírtak szerint előállított klór-foszfonátot szobahőmérsékleten, argongáz alatt, feloldunk 17 ml metilén-dikloridban. Az elegyet 0°C-ra hűtjük, és cseppenként hozzáadjuk a fenti a) pont szerinti metil-észter 3,7 g-nyi (12,37 mmól) mennyiségéből, valamint 185mg (1,24 mmól) 4-( 1-pirrolidinil)-piridinből.17 ml metilén-dikloriddal készült szuszpenziót. Ezután becsepegtetünk 2,15 ml (12,37 mmól) etil-diizopropil-amint, és a reakcióelegyet 1 óra hosszat 0°C-on, majd éjszakán át szobahőmérsékleten hagyjuk keveredni. Az illékony alkotórészeket ledesztilláljuk, a maradékot etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat keverékével összerázzuk, majd a szerves fázist mossuk egyszer n átrium-hidrogén-karbonát-oldattal, egyszer nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel eldörzsölve 2,5 g 4-[ [(S)-3-fenil-2-[(metil-metoxi-foszfinil)-oxi] -1-oxo-propil] -amino] - -benzoesav-metil-észtert kapunk. SziHkagél vékonyrétegen, metilén-diklorid-ecetsav-metanol 20:1:1 eleggyel kromatografálva, R/= =0,78. c) 4-[[(S)-3-Fenil-2-[(hidroxi-metil-foszfinil )-oxi] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil -észter 2,3 g (5,88 mmól), a b) pont szerint előállított metil-észtert szobahőmérsékleten 7 ml acetonban szuszpendálunk. Mintegy 20 percen át trietil-amint buborékoltatunk át az elegyen, majd a reakcióedényt lezárjuk és éjszakán át 95°C-on tartjuk. Másnap az elegyet bepároljuk, a párlási maradékot összerázzuk etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfátoldat keverékével, majd a szerves fázist egyszer mossuk nátrium-klorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. Az így kapott 4- [ [ (S) -3-fenil-2- [ (hidroxi-metil-foszfinil)-oxi] - 1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter tömege 1,86 g. Szilikagél vékonyrétegen, izopropil-alkohol-ammónium-hidroxid-víz 7:2:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,62. d) 4-[ [(S)-3-Fenil-2-[(hidroxi-metil-foszfinil )-oxi] -1 -oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsója 1,86 g (4,93 mmól) c) pont szerinti metil-észtert argongáz alatt, szobahőmérsékleten, feloldunk 11 ml metanolban. Hozzáadunk 10,5 ml (10,5 mmól) 1 N lítium-hidroxid-oldatot, és az elegyet éjszakán át kevertetjük. Másnap az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással, HP-20 gyantával, vízzel eluálva megtisztítjuk. A liofilizálással kapott fehér, szilárd hal26 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
