199152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfonát- és foszfonamid-endopeptidáz-inhibitorok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
199152 2,4 g (6,73 mmól) d) pont szerinti metil-észtert feloldunk 50 ml metanolban, az oldatot jégfürdőbe helyezzük, és nitrogéngáz alatt hozzácsepegtetünk 6,73 ml (13,47 mmól) 2 N lítium-hidroxid-oldatot. Az adagolás befejeztével az elegyet hidegen kevertetjük 15 percen át, majd éjszaán át hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Vákuumban bepárolva az elegyet 2,3 g nyersterméket kapunk, amelyet égy 5X30 cm-es, HP-20 gyantával töltött oszlopon kromatografálunk. Az eluálást vízzel végezzük. Az ilyen módon tisztított 3- [ [ (S)-2- [ [ (2-fenil-etil)-hidroxi-foszfinil] -amino] -1-oxo-propil] -amino] -propánsavdilitiumsó fehér, 250°C felett olvadó anyag, amelynek tömege 2,0 g. [a]D=-7,2° (c=0,5, metanol). Szilikagél vékonyrétegen, izopropil-alkohol-víz-ammónium-hidroxid 12:2:1 elegygyel kromatografálva, R/=0,26. 8. példa 4- [ [(S)-3-Fenil-2- [(hidroxi-metil-foszfinil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav dilítiumsója a) Metil-(4-aminorbenzoát)-hidroklorid 16,5 g (120 mmól) 4-amino-benzoesavat feloldunk 300 ml metanolban, az oldatot lehűtjük -10°C-ra, és nitrogéngáz atmoszférában, állandó keverés közben becsepegtetünk 28,5 g (240 mmól) szulfinil-kloridot, miközben a hőmérsékletet -5 és -10°C között tartjuk. Az adagolás befejeztével hagyjuk az elegyet éjszakán át szobahőmérsékletre melegedni, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot kétszer dietil-éterrel eldörzsölve és dekantálva, 22 g sárgásbarna, 207°C-tól kezdődően 250°C felett olvadó, metil-(4-amino-benzoát)-hidrokloridot kapunk. Szilikagélen, n-butanol, ecetsav és víz 4:1:1 arányú elegyével kifejlesztve a vékonyréteg-kromatogramot, Rj=0,87. b) 4-[ [(S)-2-[(terc-Butoxi-karbonil)-amino] -3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter 3,75 g (20 mmól) metil-(4-amino-benzoát)-hidrokloridot feloldunk 25 ml vízmentes N,N-dimetil-formamidban, és egymást követően hozzáadjuk az alábbi reagenseket: 5,3 g (20 mmól) N-(terc-butoxi-karbonil)-3-fenil-L-alanin, 3,05 g (20 mmól) 1-hidroxi-benzotriazol-víz (1/x) és 2,6 g (20 mmól) etil-diizopropil-amin. A reakcióelegyet jégfürdőbe helyezzük, nitrogéngáz alatt beadagolunk 4,13 g (20 mmól) diciklohexil-karbodiimidet, majd 1 óra hosszat hidegen kevertetjük és hagyjuk éjszakára szobahőmérsékletre melegedni. Másnap az elegyet meghígítjuk 150 ml dietil-éterrel, a keletkezett diciklo-hexil-karbamidot kiszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A párlási maradékot 150 ml etil-acetátban feloldjuk, az oldatot mossuk 30—30 ml 10% - os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és ismét vízzel, majd végül nátrium-klorid-oldattal és magnézium-szulfáton szárítjuk. Vákuumban bepárolva az oldatot 9,2 g nyers- 12 21 terméket kapunk, amelyet egyszer átkristályosítva forró metilén-dikloridból, 5,5 g részlegesen tisztított, és 3,3 g szennyezett terméket különítünk el. A szennyezett terméket ismételten átkristályosítva metilén-dikloridból, a részlegesen tisztított termék menynyisége további 1,2 g-mal szaporodik, míg 2,0 g szennyezett anyag marad vissza. Ez utóbbit 95 g Merck 9385 szilikagélen flash-kromatográfiával megtisztítjuk, amelynek során hexán-etil-acetát 3:1 eleggyel eluáljuk az oszlopot. Ilyen módon még 1,5 g részlegesen tisztított terméket nyerünk. Az összesen 7,2 g részlegesen tisztított termékhez hozzátéve még 1,5 g hasonló tisztaságú, másik kísérletből származó terméket, forró etil-acetát és hçxàn «legyéből átkristályosítjuk az egészet. így 8,7 g egyszer tisztított anyagból 4,9 tiszta 4-|[(S)-2-[(terc-butoxi-karbonil)-amino]-3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-mefil-észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 173—175°C. Szilikagél vékonyrétegen, hexán-etil-acetát 2:1 eleggyel kromatografálva, R/=0,33. A startban szennyező anyag nyomai láthatók. c) 4- [ [(S)-2-Amino-3-fenil-l-oxo-propil]-amino] -benzoesav-metil-észter-hidroklorid 4,8 g (12 mmól) b) pont szerinti metil-észtert feloldunk 36 ml 1,7 N ecetsavas hidrogén-klorid-oldatban, a lombikot lezárjuk, és az oldatot 4 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Vákuumban bepárolva az oldatot, a maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük, aminek eredményeként 3,93 g 4-[[(S)-2-amino-3-fenil-l-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter-hidrokloridot kapunk. Szilikagél vékonyrétegen, kloroform, metanol és ecetsav 10:1:1 arányú elegyével kromatografálva, R/=0,38. d) 4- [ [ (S)-3-FeniI-2- [(metil-metoxi -foszfinil)-amino] -1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-meti l-észter 3,72 g (11,12 mmól), a c) pontban leírtak szerint kapott hidrokíoridsót, 200 ml etil-acetát és 200 ml 5%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal összerázunk. A szerves fázist mossuk nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A párlási maradék 3,3 g 4-[ [ (S)-2-amino-3-fenil-1-oxo-propil] -amino] -benzoesav-metil-észter. 3,0 g (24,2 mmól) frissen desztillált dimetil-(metil-foszfonát)-ot feloldunk 36 ml vízmentes dietil-éterben, jégfürdőbe helyezzük és 4,6 g (36,4 mmól) oxalil-diklorid 4 ml vízmentes dietil-éterrel készült oldatát csepegtetjük hozzá, majd éjszakára hagyjuk az elegyet szobahőmérsékletre melegedni. Az étert vákuumban lepároljuk és a maradékot vákuumban desztilláljuk. A 0,1—0,6 kPa-on 75 és 120°C közötti forráspontú párlatot összegyűjtve 1,63 g tiszta, színtelen olajként kapjuk a kívánt klór-foszfonátot. 1,6 g (12,45 mmól) fenti klór-foszfonátot feloldunk 15 ml vízmentes metilén-diklorid-22 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
