199144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás purinok piperazinil-származékai és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

199144

8

Genetikailag elhízott (ob/ob) egereket egy éjszakán át éheztetünk, majd a kísérleti vegyületeket gyomorcsövön át orálisan adjuk be. Különböző időpontokban mindegyik egérből sorozatmintát veszünk az orbitális szinuszon át és az így nyert vérmintákat vércukorszintre elemzésnek vetjük alá. Ha etetett egereknél a találmány szerinti vegyületeknek a vércukorszintre kifejtett hatását kívánjuk megvizsgálni, akkor a kísérleti vegyület beadását követően 30 perc elteltével orálisan 2 g/kg arányban glükózt adunk be. A glükózt a vérben kálium-ferri-cianid/kálium-ferro-cianid oxidációs reakciót automatikusan elemző készülékkel határozzuk meg.

Ez az utóbbi módszer közvetlenül méri a vérben a glükóz mennyiségét egy adott időpontban és ebből a vércukornak a maximális százalékos csökkenése könnyen kiszámítható és így mint a hipoglükémiás aktivitás megoldható. Ilyen módon a találmány szerinti vegyületekről megállapítható, hogy érzéstelenítésnek alá nem vetett hiperglükémiás egereknél a glükóz-toleranciát jelentősen javítják, ha az egereket mindössze 10 mg/kg orális dózisban kezeljük, továbbá ezek a vegyületek csökkentik az éhező egereknél is a vércukorszintet, ha mindössze 30 mg/kg orális dózisban adagoljuk be őket.

1. táblázat

Vércukorszint csökkentése ob/ob egereknél

7

A vegyületet ismertető példa sorszáma

4.

8.

12.

15.

21.

23.

26.

32.

35

36.

39.

42.

43.

46.

49.

52.

54.

56.

58.

60.

63.

65.

67.

69.

71.

72.

73.

76.

78.

81.

Vér glükóztartalom (a kontroll%-ában)x

54 100

66

48

21

79

82

85

71 68

55 53

37

38

63

64 95

56 44 28 70 51 87

100

85

72 68 42 42 40

1. táblázat

(folytatás)

A vegyületet ismertető

Vér glükóztartalom

példa sorszáma

(a kontroll%-ában)x

84.

42

87.

53

90.

54

93.

53

98.

52

101.

50

102.

77

104.

41

108.

54

113.

44

120.

49

123.

33

125.

61

126.

44

132.

34

133.

42

1 dózis=30 -mg/kg

A találmány szerinti eljárást a következő 25 kiviteli példákkal kívánjuk közelebbről megvilágítani.

1. Példa

6-(l-(BOC)-piperazinil)-purin

30 150 ml dimetil-formamidban (DMF) feloldunk 4,6 g (30 mmól) 6-klór-purint és 11,2 g (60 mmól) N-(l-terc-butoxi-karbonil)-piperazint (BOC-piperazin). Az így kapott oldatot nitrogénatmoszférában 100°C-on 1 éj- 35 szakán át keverjük, majd a reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot n-propanolból kristályosítva 5,0 g (55%) mennyiségben a 244—246°C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk.

40 Elemzési eredmények a C|4H2oN602 képlet alapján:

számított: C%=55,26 H%=6,58 N%=27,63; talált: C%=55,23 H%=6,48 N%=27,63.

45 2. Példa

6-( 1 -(4-BOC)-piperaziníl )9-metil-purin A. eljárás

Az 1. példa szerinti termékből 1,6 g (5,58 mmól) 60 ml dimetil-szulfoxiddal 50 (DMSO) készült oldatához hozzáadunk 848 mg (6,14 mmól) kálium-karbonátot és 0,70 ml (11,2 mmól) metil-jodidot. Az így kapott reakcióelegyet lezárjuk, majd szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük és ezután 55 további 0,35 ml (5,6 mmól) metil-jodidot adunk hozzá. A keverést még 24 órán át folytatjuk, majd a reakcióelegyet vízzel hirtelen lehűtjük. A vizes elegyet etil-acetáttal extraháljuk, majd az extraktumot vízmentes 50 nátrium-szulfát fölött szárítjuk, és szárazra pároljuk. így 1,3 g mennyiségben a 9- és

7-izomerek elegyét kapjuk. Ezt az elegyet szeparálásnak vetjük alá 100 ml térfogatú, szilikagélt tartalmazó oszlopon, eluálószer- 6 ként etil-acetát és etanol 90:10 térfogatará- 5 nyú elegyét használva. Az első csúcsból kon6