199132. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,3-oxazolidin-2-on származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
11 12 2, táblázat (folytatás) 199132 Vizsgált vegyületek A vizsgált vegyü-Glutaminlet koncentrációja sav biokaz oldatban kóló hatás (mól) (%) 13 2 X io'* 80 17 2 X 10* 90 35 2 X 1Ő5 68 36 2 X 1IÎ5 53 37 2 X 10'5 58 40 2 X 1Ö5 61 41 2 X 1Ö5 69 Összehasonlító vegyület 2 2 X 10* 0 4 2 X 10'* 45 2-B vizsgálat Inhibitor hatás patkány kortikális neuron- 25 jaiban L-glutaminsav és analógjai által kiváltott válaszra L-glutaminsavat a találmány szerinti eljárással előállított [(4S,5R)-4-(2-metil-propil)-3- [3- (perhidroazepin-l-il)-propilj -5-fe- 3Q nil-l,3-oxadiazolin-2-on-t patkány kortikális neuronjába iontoforetikusan alkalmazzuk több adagos üveg mikropipetta segítségével, ami 1 mólos L-glutaminsavval és 0,05 mólos találmány szerinti vegyülettel van megtöltve. 35 A vizsgálati módszer a következő irodalmi helyeken van ismertetve: M. Sakurai, Seitai no Kagaku, 36 (4), 416—418, 1985. és T.W. Stone, Microiontophoresis Pressure Ejection, IBRO Handbook Series, 8. kötet, Wiky, 1985. 40 A mikropipetta hegyét mikromanipulátor segítségével, a kapott legnagyobb glutamát válasz helyén rögzítjük, mely választ a sejten kívül meghatározott, az iontoforetikusan alkalmazott 1-glutamát hatására létrejött hatáspotenciállal fejezünk ki. 5 Az 1. ábrán bemutatjuk a kortikális neuron reagálási sebességét az L-glutaminsav folyamatos állandó áramának alkalmazása és a találmány szerinti vegyület különböző meny- 50 nyiségeinek jelenléte mellett (az ordinátán a hatáspotenciálok frekvenciája, az abszciszszán az idő van ábrázolva). Az 1. ábrából jól látszik, hogy a találmány szerinti eljárással előállított .vegyület gátolja a glutamát 5g választ, méghozzá mennyiségétől függően. A 2. ábrán iontoforetikus glutamát ion pulzussal gerjésztett kortikális neuron reagálási sebességét regisztráltuk (0,2 Hz, 2 sec időtartam). A találmány szerinti eljárással előállított vegyület csökkenti az L-glutamát és három glutamát receptor agonista, azaz kainsav (2-karboxi-3-karboxi-metil-4-izopropenil-pirrolidon), quisquelicsav, és N-metil-D-aszparaginsav által kiváltott hatáspotenciál frek- 65 venciáját. Ez a vizsgálat is megerősíti, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyület gátolja a glutamát választ patkány kortikális neuronjaiban. 3. vizsgálat Akut toxicitás A vegyületek akut toxicitását nőnemű ddN egereken „up and down“ módszerrel vizsgáljuk. A vizsgálandó vegyüieteket fiziológiás sóoldatban feloldjuk és az állatok caudalis vénájába adagoljuk. A vizsgálatok eredményeit a 3. táblázatban foglaljuk össze. 3. táblázat LD50 (mg/kg, iv) 1 29.7 2 18.8 3 55.5 4 29.9 5 69.0 7 30.4 10 54.6 13 75.1 14 53.2 17 40.1 25 34.9 27 39.8 29 66.1 40 53.6 A találmány szerinti eljárást a következő előállítási példákon keresztül mutatjuk be. 1. példa ( 1 ) (4RS.5SR) -4- ( 1 -metil-etil) -5-fenil-3--(3-piperidino-propil)-l,3-oxazolidin-2-on 755 mg (2,00 mmól) (lRS,2SR)-3-Metil-1-feni 1-2- (3-piperidino-propil-amino)-bután-7
