198951. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Új reningátló peptidek, valamint hatóanyagként ilyen peptidet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198951 B 2 juk, az eluálást benzol és etil-acetát 4:1 —2:1 térfogatarányú elegyeivel végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz erőteljes dörzsölés közben dietil-étert adunk, és a kapott csapadékot szűrjük. 297 mg dm szerinti terméket kapunk, színtelen por formájában, olvadáspontja 146 — 149 °C. Elemanalízis eredmények a C27H45N3O5 összegképlet alapján: számított: C - 65,95%,H = 9,23%,N = 8,55%; talált: C « 65,88%, H = 9,30%, N = 8,66%. (b) 207. vegyület 246 mg (0,5 mmól) (a) lépésben előállított vegyület benzil-oxi-karbonil-csoportját a 15. példa (b) lépésében leírtak szerint katalitikus hidrogénezéssel eltávolítjuk, katalizátorként 5 tömeg% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort használunk. L-leucil-4(S)-amino-3(S)-hidroxi-6-metil-N-[S-(-)-2-metil-butil]-heptánsavamid-hidrogén-kloridot kapunk, melyet 2 ml dimetil-formamidban oldunk, 55 mg (0,5 mmól) N-metil-morfolinnal semlegesítünk, majd 0 °C- on 2,5 órán át keverünk. 175 mg (0,5 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-3- (l-naftil)-L-alanint és 61 mg (0,6 mmól) N-metil-morfolint 10 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, és az oldatot -5 °C-ra hűtjük. Hűtés közben cseppenként hozzáadunk 65 mg (0,6 mmól) elil-klór-karbonátot, és az elegyet 15 percen át keverjük. Ezután hozzáadjuk a fent említett L-leucil- 4(S)-amino-3(S)-hidroxi-6-metil-N-[S-(-)-2-metil-butil]-heptánsavamid-hidrogén-klorid-oldatot, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk. Az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz vizet adunk, és a kivált csapadékot szűrjük. A csapadékot az üvegszűrőn dietil-éter és etil-acetát 1:1 térfogatarányú elegyével alaposan átmossuk, majd leszivatjuk. 265 mg cím szerinti terméket kapunk, színtelen por formájában, olvadáspontja 226-229 °C; [a]*D = -69,7° (c = 0,3, dimetilformamid). Elemanalízis eredmények a C4oH56N406.0,5H20 összegképlet alapján: számított: C = 68,84%,H = 8,23%,N = 8,03%; talált: C = 68,83%, H = 8,19%, N = 8,22%. 17. példa N-(4(S)-[N-Benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftil)L-alanil-L-leucill-amino-3(S)-hidroxi-6-metilheptanoil)-L-izoleucinol előállítása (208. vegyület) (a) N-Benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftil)-L-alanil-L-leucin-hidrazid 3,49 g (10 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-3-(lnaftil)-L-alanint és 1,21 g (12 mmól) N-metilmorfolint 30 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, az oldatot -5 ®C-ra hűtjük, és keverés közben, cseppenként, 15 perc alatt hozzáadunk 1,30 g (12 mmól) etil-klór-karbonátot. Az elegyhez 2,35 g (12 mmól) L-leucin-etil-észter-hidrogén-kloridpt adunk, melyet előzőleg 10 ml metilén-kloridban szuszpendálunk, és 1,21 g (12 mmól) N-metil-morfolinnal semlegesítettünk. A reakcióelegyet jeges hűtés közben 2 órán át állni hagyjuk. Az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékhoz vizet adunk, és a kicsapódott olajos anyagot etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumot 1 n sósavoldattal, vízzel 5 vegyes%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, végül vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A szirup formájában kapott N-benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftil)-L-alanil-L- leucin-elil-észtert 30 ml dimetil-formamidban oldjuk, és az oldathoz 5,06 g (100 mmól) hidrazin-hidrálot adunk. Az elegyet 36 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékhoz vizet adunk. A kapott színtelen kristályos anyagot szűrjük, vízzel mossuk, majd exszikkátorban szárítjuk. 4,23 g cím szerinti terméket kapunk, olvadáspontja 200 — 204 °C. Elemanalízis eredmények a C27H32N4O4 összegképlet alapján: számított: C = 68,04%,H = 6,77%,N = 11,76%; talált: C = 68,23%, H = 6,73%, N = 11,90%. (b) 208. vegyület 477 mg (1 mmól) (a) lépésben előállított hidrazidot 8 ml dimetil-formamidban oldunk, és az oldatot -60 °C-ra hűtjük. Hozzáadunk 0,84 ml 4,0 n dioxános hidrogén-kloridot és 0,18 ml izoamil-nitritet. A reakcióelegy hőmérsékletét -20 °C-ra emeljük, és 10 percen át keverjük. A hidrazid eltűnésének megállapítása után a reakcióelegy hőmérsékletét újra -60 °C-ra csökkentjük. Az oldatot 0,45 g N-metil-morfolinnal semlegesítjük, N-benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftil)-L-alanil-L-leucin-hidrazid-oldalot kapunk. 412 mg (1,1 mmól) 4(S)-tcrc-butoxi-karbonilamino-3(S)-hidroxi-6-metil-hcptanoil-L-izoleucinol terc-butoxi-karbonil-csoportját az 1. példa (b) lépésében leírtak szerint, 6 n dioxános hidrogén-klorid-oldattal eltávolítjuk. 4(S)-amino- 3(S)-hidroxi-6-metil-heptanoil-L-izoleucinolhidrogén-kloridot kapunk, melyet 5 ml dimetilformamidban oldunk, és a kapott oldatot a fenti hidrazidoldahot adjuk, majd a reakcióelegyet 4 °C-on 7 napon át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékhoz vizet adunk, és a kivált olajos anyagot etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist 1 n sósavoldattal, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A szirupszerű maradékot szilikagélen preparatív méretű vékonyréteg-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, a futtatást kloroform és metanol 5—1 térfogatarányú elegyével végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és szárítjuk, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékhoz dietil-étert adunk, az ily módon megszilárdult maradékot finomra aprítjuk és szűrjük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15
