198951. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Új reningátló peptidek, valamint hatóanyagként ilyen peptidet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 198951 B 2 °C; |Ö]23D « -48,8“ (c = 0,5, metanol). Elemanalízis eredmények a C4jH54N607 összegképlet alapján: számított: C = 66,28%,H = 7,33%,N = 11,31%; talált: C = 65,99%, H « 7,61%, N = 11,14%. 15. példa 4(S~)-lN-Benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftilVL- alanil-D-hisztidill-amino-3(S)-hidroxi-6-metil- N-ÍS-(-)-2-metil-butill-heplánsavamid előállítása (93, vegyük t) (a) 4(SV(N-Benzil-oxi-karbonil-D-hisztidiriamino-3(S)-hidroxi-6-metil-N-fS-(-V2-metü-butill-heptánsavamid 2.00 g (22,9 mmól) S-(-)-2-metil-butil-amint és 6,00 g (21,8 mmól) 4(S)-terc-butoxi-karbonilamino-3(S)-hidroxi-6-metil-heptánsavat 50 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldunk, és az oldalhoz nitrogénatmoszférában cseppenként 4,3 g (26,4 mmól) dietil-foszforo-cianidátot és 3,7 ml (26,5 mmól) trietil-amint adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékhoz etil-acetátot adunk. Az elegyet 10 vegy%-os vizes sósavoldattal, telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk. A vízmentes elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot szilikagél-oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk. Az eluálást kloroform és metanol 10: — 1 térfogatarányú elegyével végezzük. 5,1 g (68%) cím szerinti terméket kapunk. A kapott vegyület terc-butoxi-karbonil-csoportját 6 n dioxános hidrogén-klorid-oldatlal az 1. példa (b) lépésében leírtak szerint eltávolítjuk. 4(S)-3(S)-hidroxi-6-metil-N-[S-(-)-2-metilbutilj-heptánsavamid-hidrogén-kloridot kapunk. 1.00 g (3,30 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-D- hisztidin-hidrazidot 20 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk, és a szuszpenziót -60 °C-ra hűtve hozzáadunk 2,8 ml 4 n dioxános hidrogén-klorid-oldatot. A reakcióelegy hőmérsékletét ezután -20 °C-ra emeljük, és az elegyhez 0,53 ml (3,95 mmól) izoamij-nitritet adunk, majd a reakcióelegyet 10 percen át keverjük. Ä hidrazid eltűnésének megállapítása után az elegyet -60 °C- ra hűtjük, majd 1,37 ml (12,5 mmól) N-metilmorfolinnal semlegesítjük. Az elegyhez 1,00 g (3,56 mmól) (a) lépésben előállított 4(S)-amino- 3(S)-hidroxi-6-metil-N-[S-(-)-2-metil-butil)-heptánsavamidot és 0,4 ml (3,64 mmól) N-metilmorfolint adunk, és 4 #C-on egy éjszakán át tovább keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást kloroform és metanol 20—1 térfogatarányú elegyével végezzük. 850 mg (48%) fehér, kristályos anyag formájában a cím szerinti termék monohidrátját kapjuk, olvadáspontja 77 — 79 °C; [a]2^ * - 26,4° (c “0,5, metanol). Elemanalízis eredmények a C27H43N506 összegképlet alapján: számítolt: C - 60,77%,H - 8,12%,N -13,12%; talált: C«60,75%, H-8,12%, N -13,40%. (b) 93. vegyület 700 mg (1,31 mmól) 4(S)-[N-benzil-oxi-karbonil-D-hisztidil]-amino-3(S)-hidroxi-6-metil- N-[S-(-)-2-metil-butil]-heptánsavamid-monohidrátot 20 ml etanolban oldunk, és az oldathoz 2,62 ml 1 n sósavoldatot és 70 mg 10 tömeg% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk, majd szobahőmérsékleten 4 órán át hidrogénatmoszférában keverve eltávolítjuk a benzol-oxi-karbonil-csoportot. Az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékhoz 20 ml vízmentes tetrahidrofuránt adunk, és az elegyben feloldunk 400 mg (1,14 mmól) N- benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftil)-L-alanint. Az elegyhez ezután jeges hűtés közben, nitrogénatmoszférában 0,2 ml (1,32 mmól) dietil-foszforocianidátot és 0,6 ml (4,30 mmól) trietil-amint csepegtetünk, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 6 órán át keverjük. Az elegyet csökkentett nyomáson vákuumban koncentráljuk, a maradékhoz etil-acetátot adunk. Az elegyet vízzel mossuk, majd vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk. A szárított elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot szilikagélen, preparatív méretű vékonyréteg-kromatográfiás eljárással tisztítjuk, futtatóelegyként kloroform és metanol 5:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 450 mg (54%) cím szerinti terméket kapunk, monohidrátja formájában, fehér, kristályos anyagként, olvadáspontja 108—110 “C; [a]25]) = -22,0° (c = 0,5, metanol) Elemanalízis eredmények a C4oH54N607 összegképlet alapján: számított: C = 65,73%,H = 7,45%,N = 11,49%; talált: C = 65,56%, H = 7,32%, N = 11,20%. 16. példa 4(S)-[N-Benzil-oxi-karbonil-3-(l-naftir)-L- alanil-L-leucin-amino-3(S)-hidroxi-6-metil-N[S-(-)-2-metil-butill-heptánsavamid előállítása (207. vegyület) (a) 4(SV[N-Benzil-oxi-karbonil-L-leucillamino-3(S)-hidroxi-6-metil-N-[S-(-)-2-metil-butil)l-heptánsavamid 280 mg (1 mmól) 4(S)-amino-3(S)-hidroxi-6- metil-N-[S-(-)-2-metil-butil]-heptánsavamidhidrogén-kloridot 5 ml metilén-kloridban oldunk, és az oldatot jeges hűtés közben 111 mg (1,1 mmól) N-metil-morfolinnal semlegesítjük. 398 mg (1,1 mmól) N-benzil-oxi-karbonil-L-leucin-N-hidroxi-szukcinimid-észtert adunk hozzá, és az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Hozáadunk 0,5 ml N,N’-dimetil-amino-propil-amint, és az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverve az aktív észter esetleges feleslegét az aminnal reagáltatjuk. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékhoz 1 n sósavoldatot adunk. A kapott olajos anyagot etil-acetáttal extraháljuk. A szerves extraktumot vízzel, 5 vegyes%-os vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal, majd telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott szilárd maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiásan tisztít5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
