198757. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nebramicin komponensek előállítására
3 HU 198757 B 4 toztatásával jelentősen befolyásolható, és így felhasználható az egyes komponensek menynyiségónek szelektív növelésére. Tapasztalataink szerint a 6"-0-karbamoil-tobramicin 0,1-0,25 levegő tf/táptalaj tf/perc arány mellett képződik maximális mennyiségben. Ez azért meglepő, mivel az 1,178.489 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás szerint a 0,1/1,0 arányt legfeljebb a növekedés számára tartják elegendőnek. Ugyanakkor a 6"-0-karbamoil-kanamicin B képződése számára a magasabb levegöztetési arány az előnyösebb. Figyelemre méltó az a tény, hogy 6"-0-karbamoil-kanamicin B esetében a cink- és mangánsók hatása fordítottja, mint amit a 6"-0-karbamoil-tobramicin esetében tapasztaltunk. így cink- és mangánsók alacsony levegöztetési arány mellett csökkentik a 6"-0-karbamoil-kanamicin B 5 képződést, míg 1,0 levegő tf/táptalaj tf/perc értéktől már fokozzék a képződést. A cink- és mangánsók hatásának a levegőztetés mértékétől való függését az alábbi táblázat adataival szemléltetjük, amelyben a 10 fermentációs Litereket (/ug/ml) tüntettük fel, a különböző mennyiségű cink- és mangánszulfátot tartalmazó táptalajok és levegőztetési arány függvényében: [alkalmazott törzs: St.reptomyces tenebrarius NCAIM B (P) 15 000169, hőmérséklet 37 °C] Levegőztetés (levegő tf/tpt tf/perc) Táptalaj jele 0,1 : : 1 0,3 : 1 1 : 1 Fermentációs titer (ng/ml) F-2 F-4 F-5’ F-2 F-4 F-5’ F-2 F-4 F-5’ NTF-7 2970 685 1420 3400 750 1300 3670 890 1085 NTF-7/1 3148 423 1539 3628 582 1558 3153 1015 1310 NTF-7/2 2915 381 1610 3046 625 1417 3425 923 1296 NTF-8 3276 752 1480 3419 810 1292 3638 860 1172 NTF-8/1 2984 171 2680 2960 913 1567 3451 1340 1126 NTF-8/2 3150 296 2975 3276 846 1636 3189 1209 989 F-2: apramicin, F-4: 6"-0-karbamoil-kanamicin B F-5’: 6"-0-karbamoil-tobramicin A cink- és mangánsók hatása másrészt abban nyilvánul meg, hogy a bioszintézis érzékenyebbé válik a hőmérséklet változtatásra. Amennyiben a fermentációs hőmérsékletet 37 °C-ról 39-41 °C-ra emeljük, tovább növelhető a hatóanyagok mennyisége a fermentlében. A hőmérséklet emelésével a maximális hatás akkor érhető el, ha a fermentáció azon szakaszában valósítjuk meg, amikor a glükóz szénforrés koncentrációja 1 t% érték aló csökken, mivel ekkor már a hőmérséklet eme- 40 léssel nem váltunk ki katabolit-repressziót. A találmány szerint úgy járunk el, hogy valamely Streptomyces tenebrarius törzzsel [NCAIM B (P) 000169 vagy NCAIM B (P). 000170 vagy ezek természetes variánsával] 45 beoltott táptalajhoz, amely 4-5 t% glükózt, 3,0-3,8 t% szójalisztet, 4
