198502. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-oxo-1-(szubsztituált foszfinil)-azetidinek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 keverés közben. Sűrű csapadék képződik, amely a keverést nehézzé teszi. Megfelelő mennyiségű jégecetet (kb. 60 ml-t) adunk az elegyhez a szilárd anyag teljes oldódásának elősegítésére, majd kb. 100 nü éterrel és 200 ml etil-acetáttal hígítjuk. Jeges fürdőben való hűtés közben vizes és szilárd nátrium-karbonátot adunk óvatosan és keverés közben az elegyhez, és követjük a pH változását. A vizes fázis pH-ját 8,35-re állítjuk. A szerves fázis, amelyet nedves pH papírral ellenőrzünk, nem sava?. A szerves réteget elválasztjuk, és a vizes fázist két alkalommal etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat két alkalommal vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk, így szilárd maradékként 0,941 g nyersterméket kapunk A fenti reakciósort 1,150 g (3,43 mmól) 4,5-bisz(benziloxi)-2-piridinkarbonsawal megismételve 1,120 g nyersterméket kapunk. A két adag nyersterméket egyesítjük és három alkalommal éterrel eldörzsöljük. A szilárd anyagot vákuumban szárítva 1,934 g cím szerinti vegyületet kapunk. G) (2S-/Z/)-[l-[[2-[4,5-Bisz(benziloxi)-2 piridinil]-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonil]-2-metil4-oxo-3-azetidinilj-karbaminsav-terc-butil-észter monokáli um-só 268 mg (0,50 mmól) (3S/Z/)-[3-mctil4-oxo-3- -J[(terc-butoxi)-karbonil]-amino]-l-azetidinil]-foszfonsav-metil-észter-tetrabutil-ammónium-só és 217 mg (0,59 mmól) 2-(klór-acetii)4,5-bisz(benziIoxi)-piridin 3 ml száraz 1,1,1-trikiór-etánnal készült elegyét nitrogén alatt forraljuk. 38 óra eltelte után az elegy térfogatát kétharmadára csökkentjük nitrogén áramban, és a forralást még hét órán át folytatjuk. Az elegyet hűtjük és vákuumban bepároljuk A barna maradékot acetonitril és víz elegyében oldjuk és egy 2,5x22 cm-es K* formában lévő Dowex 50X2 gyantával töltött oszlopon engedjük keresztül, amely acetonitril és víz 20:80 térfogatarányú elegyével készült és eluálásra is ezt használjuk. (A Dowex 50X2 gyanta erősen savas kationcserélő gyanta.) A megfelelő frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk, így 260 mg nyersterméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. A fenti eljárást 1,81 g (2,207 mmól) (3S-transz-[2-metil4- -oxo-3-[[[(terc-butoxi)-karboni]]-amino]-l-azetidinil]-foszfonsav-metil-észter-tetrabutil-ammónium-sóval és 0,883 g (2,402 mmól) 2-(klór-acetil)4,5-bisz(benziloxi)-piridinnel megismételve 1,233 g nyersterméket kapunk. A két adag nyersterméket egyesítjük, acetonitril és víz elegyében oldjuk és 5x40 cm-es CHP20P fordított fázisú gyantával töltött oszlopon acetonitril és víz elegy ével eluálva kromatografáljuk. (A CHP20P fordított fázisú gyanta, Mitsubishi Chemical Industries, Ltd., Japán, sztirol és divinil-benzol kopolimer, gyöngy formájú és makroretikuláris szerkezetű.) A kívánt anyagot aoetonitril és víz 30:70-től 40:60-ig változó térfogatarányú elegyével eluáljuk. A megfelelő frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk, így 1,029 g dm szerinti vegyületet kapunk fehér szilárd anyag formájában. H) (2S/Z/>tjl-[[2-(l ,4-Dihídro-5-hidroxi4-oxo-2- piridiniI)-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonil]-2-metil4- -oxi-3-azetidinil]-karbaminsav-terc-butil-észter-monokálium-só 60 mg (0,092 mmól) (2S-transz>[l-[[2-[4,5-bisz(benziloxi)-2-piridinil]-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonú]-2-metil4-oxo-3-azetidinil]-karbonsav-terc-butil-észter-monokálium-só és 7,5 mg szénhordozós palládiumkatalizátor elegyét 2 ml dimetil-formamidban szobahőmérsékleten, 0,1 MPa hidrogénnyomáson keverünk. Másfél óra eltelte után a vékonyréteg-kromatogram és a hidrogénfelvétel a reakció teljességét jelzi. A katalizátort centrifugálissal elválasztjuk és a dimetil-formamid felülúszót vákuumban bepároljuk, így olajos anyag marad vissza. A fenti eljárást nagyobb mennyiségben, 505 mg (0,777 mmól) (2S/Z/)-[l-[[2-[4,5-bisz(benziloxi)-2-piridinil]-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonil]-2-nietil4-oxo-3-azetidinil]kar-baminsav-terc-butil észter-monokáliumsó, 50 mg palládiumkatalizátor, 16 ml dimetil-formamid felhasználásával és 1,25 óra reakdóidővel megismételjük. A két adag olajos terméket 3 ml dimetil-formamiddal egyesítjük és gyors áramban 10 ml étert adunk hozzá. A kapott szilárd anyagot centrifugál ássál elkülönítjük, három alkalommal éterrel mossuk és vákuumban megszárítjuk. így 385 mg cím szerinti vegyületet kapunk. I) (2S/Z/)-3-Amino-2-metil4-oxo-l -azetidin-foszfonsav-2-(l ,4-dihidro-5-hidroxi4-oxo-2-piridil)-2-oxo•etil észter-trifluor-acetát-só 375 mg (2S/Z/)-[1-[[2-[l,4-dihdiro-5-hidroxi4- -oxo-2-piridinil]-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonil]-2- -metil4-oxo-3-azetidinil]-karbaminsav-terc-butíl-észter-monokálium-só 4 ml, 1 ml anizolt tartalmazó száraz diklór-metánnal készült szuszppnziójához 3 ml trifluor-ecetsavat adunk keverés közben, 5 C-on. Kb. 3 perc alatt a szilárd anyag feloldódik és az elegyet 1,25 órán át 5 °C-on keverjük, a vékonyréteg-kromatogram szerint a reakció lényegében végbement. 2 ml toluolt adunk hozzá és az elegyet vákuumban viszkózus barna olajjá pároljuk be. Az olajat két alkalommal hexánnal mossuk, majd éterrel eldörzsöljük. A kapott szilárd anyagot kétszer éterrel mossuk, majd vákuumban szárítjuk, így 0,437 g nyers, cím szerinti terméket kapunk, amelyet a következő lépésben közvetlenül használunk fel. J) [2S-[2a,30(Z)]]'2-[[[l-(2-Amino4-tiazolil)-2-[l - -[[2-[(l ,4-dihidro-5-hidroxi4-oxo-2-piridinil)-2-oxo-etoxi]-hidroxi-foszfonil]-2-metil4-oxo-3-azetidinil]-amino]-2-oxo-etilidén]-imino]-oxi]-2-metil-propánsav-difenil metil-észter-kálium-só 383 mg (0.816 mmól) (Z)-2-amino-a-[[2-(difenÍl-metoxi)-l ,1 -dimetil-3-oxo-etoxi]-imino]4-tiazolil-ecetsav és 110 mg (0,814 mmól) N-hidroxi-benzotriazol 2 ml száraz dimetil-formamiddal készült oldatához 183 mg (0,888 mmól) didklohexil-karbodiimidet adunk. Néhány perces keverés után nagymennyiségű csapadék különül el. Az elegyet 0,5 órán át szobahőmérsékleten kevevetjük. Egy külön lombikban 502 pl (2,88 mmól) diizopropil-etil-amint 415 mg (2S/Z/)-3-amino-2-metíl4-oxo-l-azetidin-foszfonsav-2-(l,4-(iihidro-5-hidroxi4-oxo-2-piridinil)-2-oxo-etil-észter-trifluor-acetát-só 2,5 ml dimetil-formamiddal készült oldatához adunk 0 °C-on. Ehhez az elegyhez keverés közben az oldallánc aktív észterét adjuk. A reakdóelegyet szobahőmérsékleten keverjük egy éjszakán át. A kivált szilárd anyagot centrifugálással elkülönítjük, és a felülúszót bepároljuk. A sűrű barna gumiszerű maradékot 6 ml acetonitril és víz 1:1 térfogatarányú elegy ben oldjuk. Ismét szilárd anyag válik ki, amelyet elkülönítünk, és a felülúszót 2,5x40 cm-es K+ formában levő Dowex 50X2-vel töltött oszlopon engedjük 198.502 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 56 60 5
