198472. lajstromszámú szabadalom • Eljárás norfloxacint tartalmazó addukt és ilyen adduktumot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 198472 B 2 LD50 (orálisan, csirkén): 10 g/kg. Az adduktum oldhatósága vízben, 25 ’C hómérsékleten: 250 mg/ml (ez megfelel milliliterenként 180,4 mg norfloxacin-bázisnak). A 15 %-os vizes oldat pH-értéke 5,8; a 4 %-os 5 vizes oldat pH értéke 6,0. Egyéb oldószer alkalmazása esetén az alábbi hozamértékek biztosíthatók: Hozam (%) izopropanol esetében 83,1 10 n-propanol esetében 86,9 etilén-glikol esetében 85,0 metanol esetében 73,0 víz esetében 90,0 denaturált alkohol esetében 83,1 15 95 %-os etanol esetében 76,4 dimetil-formamid esetében 66,0 2. példa Vízoldható port állítunk elő az alábbi komponensek 20 erélyes összekeverésével: 1. példa szerint előállított adduktum 30 g aszkorbinsav 6 g nikotinsav 6g 3. példa Vízben oldható port állítunk elő az alábbi komponensek erélyes összekeverésével: 30 g 1. példa szerint előállított adduktum, 12 g aszkorbinsav, és 30 0,39 g nikotinsav. 4. példa Antibakteriális hatású kinolonszármazékok minimális gátló koncentrációinak (MIC értékeinek) 35 összehasonlítása szárnyasok kórokozó baktériumaival szemben a) A baktériumok törzstenéyszeteit agar-táptalajon tarottuk, és időközönként tenyésztéssel ellenőriztük, hogy életképességükről meggyőződjünk. 40 b) Minden egyes hatóanyagból 5 mg/ml koncentrációjú törzsoldatot készítettünk. A vízben oldható hatóanyagokat steril desztillált vízben oldottuk; a vízben oldhatatlan hatóanyagokat meleg (60 °C hőmérsékletű) dimetil-szulfoxidban oldottuk. Az oldatokat ugyanazon a napon készítettük, amelyen a mérést végeztük. c) A hatóanyagok MIC-értékeit a következő irodalmi módszer szerint határoztuk meg: J. A. Washington, Jr. és V. L. Sutter: „Dilution susceptibility test: agar and macro-broth dilution procedures” (E. H. Lennette és munkatársai: „Manuál of Clinical Microbiology”, 3. kiadás 450-453. oldal, American Society for Microbiology (1980)). A meghatározáshoz a kétszeres sorozathigítás módszerét alkalmaztuk Müller-Hinton agaron (Difco), 7,2 pH-értéken. 50(i/ml és 0,01 ji/ml közötti koncentrációkat vizsgáltunk. Éjszakán át Difco táplevesben tartott tenyészeteket minden egyes baktérium-izolátumból steril konyhasóoldattal 1:100 arányban hígítottunk, és a hígított tenyészetből megközelítőleg 0,01 ml-t a módosított Steers-féle oldóeszközzel agar-agar felületére helyeztünk. A baktériumoltvány 5 x 104 - 1 x 105 mikroorganizmust tartalmazott. Az oltott agar- agar lemezeket aerob körülmények között 37 °C-on 18 órán át inkubáltuk. A MIC-értéket abból a legkisebb agaragarban lévő hatóanyagkoncentrációból számítottuk, amely inkubálás után szemmel megfigyelve teljesen meggátolta a baktériumok növekedését. A MIC-értékeket az I. táblázatban tüntettük fel, ahol az egyes oszlopok felett lévő betűk jelentése az alábbi: A: a mikroorganizmus és ATCC deponálási száma; B: az 1. példa szerint előállított vegyület MIC-értéke; C: a cinoxacin MIC-értéke; D: a pipemidinsav MIC-értéke; E: a flumequin MIC-értéke; F: a norfloxacin MIC-értéke; és G: az oxolinsav MIC-értéke. I. táblázat A B C D E F G 1. Enterobacter Cloaca (23355) 0,02 3 0,4 0,2 <0,01 0,1 2. E.coli 25922 0,02 3 0,4 0,2 <0,01 0,1 3. Kleb. Pneumonia (13883) 0,05 3 1,5 0,4 0,02 0,2 4. Prot. Vulgáris (13315) 0,1 3 15 0,4 0,01 0,1 5. Ps. aeroginosa (27853) 1,5 >50 50 50 0,8 12 6. Sal. typhimurium (14028) 0,05 6 6 0,2 0,1 0,2 7. Serratia marcescens (8100) 0,05 6 1,5 0,2 0,02 0,2 8. Staph, aureus (25923) 1,5 >50 50 1,5 1,5 1,5 9. Staph, epidermidis (12778) 0,4 >50 6 1,5 0,2 3 10. Strep, pyogenes (19165) 0,1 3 3 12 0,2 12 11. Strep, faecalis (33186) 3 50 50 3 3 12 12. Acinobacter colcoaceticus (19606) 6 50 >50 0,8 6 0,8 13. Citrobacter-freund (8090) 5 50 >50 0,2 6 0,8 14. Enterobacter aerogenes (13048) 0,05 6 6 0,8 0,05 0,4 15. Shigella flexner (12022) 6 50 >50 0,2 6 0,8 16. Shigella sonnei (25931) 3 25 50 0,2 3 0,4 17. Strep, faecalis (19433) 3 >50 50 25 3 25 18. Strep, agalactiae 3 >50 50 25 3 50 19. Past, múltoddá 6 25 >50 0,2 6 0,4 20. Staph, aureus (25178) 0,8 >50 12 1,5 0,4 1,5 3
