198293. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált piperazinil-1,4-naftalin-dion származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 2-metil-3-(4-benzil-l -piperazinil)-naftalin-l ,4-dion 4,8 0,7 2-metil-3-^4-[3-(trifluor-metiI)-fenil]-l -piperazinirt-naftalin-1,4-dion 0 N-[l ,4-dihidro-l ,4-dioxo-3{4- [3-(trifijJor-metil)-fenU]-l -pipe razinil}-2-naftil]-aceta mid 0,3 2-metü-3-[4-(2-piridil)-l -piperazini]]-naftalin-l ,4-dion 0 0 N-(4-klór-fenil)-4-(l ,4-dihidro-3-metil-l ,4-dioxo-2-naftil)-piperazin-1 -karboxamíd 8,8 2-[4-(2-benzoxazolil>l -piperazinil]-3-klór-naftalin-l ,4-dion 2-[4-(2-benzotiazolil)-l -pipeazinil]-3-ldór-naftalin-l ,4-dion-hidrogén-klorid 13,5 19,6 4-(3-klór-l ,4-dihidro-l ,4-dioxo-2-naftil)-piperazjn-l -karbonsav-e til-észter-hi drogén -ki orid 9,3 6,9 4-(3-klór-l ,4-dihidro-l ,4-dioxo-2-naftil)-N-(3-klór-fenil)-2-metiFpiperazin-l -karboxamíd 15,2 25,7 4-(3-klór-l ,4-dihidro-l ,4 dioxo-2-naftil)-piperazin-l -karbonsav-(2-metil-propil)-észter 27,4 31,6 * Az LBT4 oszlopban lévő nyomok nem hatá rozhatók meg a vizsgálat zavaró tényezői miatt Az (I) általános képletű vegyületek in vivo asztmaellenes hatását egéren vizsgáltuk, passzív, transzdermális anafilaxis teszttel, az alábbiak szerint: Immunglobulin E (IGE) és G (1GG) előállítása Nőstény B6XD2 FI egerekbe (Jackson Laboratories) intraperitoneálisan injektálunk 1 jug DNP-oval bumint és 1 mg alumínium-hidroxid-gélt (Wyeth Amphojel") tartalmazó 0,4 ml sóoldatot. Egy vagy két hónap múlva az egereket ugyanezen antigénkészítménnyel újraoltjuk. A második oltás után egy héttel az egereket leöljük és a szérumot összegyűjtjük. Az összegyűjtött szérumok titerét úgy állítjuk be, hogy közel 1 cm átmérőjű 48 órás PCA-léziót kapjunk. Passzív, transzdermális anafilaxis vizsgálat Az antigénnel való provokálás (0. óra) előtt 50 órával 50 }íl IGE-t vagy lGG-t injektálunk intradermálisan az egerek oldalába, a hónaljtól hátrafelé, a rekeszizommal egy magasságban. Ekkor az egereket egyenként számozott ketrecekbe helyezzük, á véletlenszerűen elosztjuk kontroll és kezelt csoportokra, a kontroll csoport 15 állatból, minden egyes kezelt csoport 10 állatból áll. A provokálás és leolvasás sorszám szerint történik, így a leolvasás lényegében „vak”, azaz szubjektív tényezőtől mentes. A provokálás előtt 1 órával (-1. óra) a kontroll állatokba 0,5 ml 0,05% karboxi-metil-cellulózt tartalmazó sóoldatot injektálunk intraperitoneálisan. A hatóanyaggal kezelt állatoknak a hatóanyagot 0,1%-os karboxi-metil-cellulóz-oldatban oldva, 0,5 ml dózistérfogatban adjuk orálisan, a -1. órában. A0. időpontban az egereket éterrel altatjuk, és a farokvénába 0,1 mg dinitro-fenilezett (DNP)-ovalbumint és 2,5 mg Evans blue festéket tartalmazó 0,5 ml sóoldatot injektálunk. A ’-15. percben az egereket a nyakcsigolya eltűrésével leöljük, a hátbőrt eltávolítjuk és a belső felületen megvizsgáljuk a kék PCA foltokat. Feljegyezzük a beszűrődések legnagyobb és legkisebb átmérőjét, és a szinintenzitás kvalitatíve becsült értékét. Az adott kezelt csoportban az átmérők (területek) átlagát a kontroll csoportéhoz viszonyítjuk. A vizsgált vegyületet akkor tekintjük asztmaellenes hatásúnak, ha a kezelt csoportban a terület jelentősen kisebb, mint a kontroll csoportban mért beszűrődött terület (p < 0,05, Student t-teszttel meghatározva). A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek néhány képviselőjével kapott eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük. A gátló dózis (1D5o) azt a dózist jelenti, amely a kontrolihoz képest 50%-kal csökkenti a lézió nagyságát. 3.táblázat Passzív, transzdermális anfilaxis vizsgálat egéren Vegyületneve ID50 (ftmól/1) IGE 1GG A-(3-klór-l ,4-dioxo-2-naftil)- 1 -piperazin-1 -karbonsav-etilészter 61,0 16,0 .!-klór-3-^[metil-(2-metilbe n zil -a min o )-e ti i ] -a min á - naftalin-1,4-dion-hidrogén-30,3 41,2 klorid 1 -j|4-(3-klór-l ,4-dihidro-l ,4- díoxo-2-naftil)-l -piperazinil]acetilj-pirrolidín 25,0 25,0 4-(3-klór-l ,4-dihidro-l ,4-dioxo-2-naftil)-piperazin-l - -karbonsav-e tü-észter-hidrogén-klorid 25,0 25,0 A találmány szerinti eljárással előállított új vegyületek közelítőleg napi 0,1-100 mgjtesttömeg kg dózisban adagolva fejtenek ki asztmaellenes hatást emlős szervezetekben. Optimális eredményt előnyösen 0,1—25 mg/testtömeg kg/nap dózissal érhetünk el, és olyan dózisegységeket alkalmazunk, hogy egy közel 70 kg testtömegű kezelendő alanynak 24 óra alatt összesen közel 7 mg és 1,8 g közötti hatóanyagot adagoljunk. A fenti dózistartományon belül olyan dozírozást állíthatunk be, amellyel optimális terápiás hatást érünk el. Például naponta többszöri, osztott dózist adagolunk, vagy a dózist arányosan csökkentjük, ahogy azt a gyógyászati helyzet követelményei indikálják. Határozott gyakorlati előnyt jelent, hogy az (1) általános képletű hatóanyagokat bármely szokásos módon alkalmazhatjuk, Így orálisan, aeroszol formájában, intravénásán, íntramuszkulárisan vagy szubkután módon is. Orális alkalmazási mód esetén a hatóanyagot inert hígítószerrel vagy emészthető, asszimilálható hordozóanyaggal keveijük, vagy kemény vagy lágy zselatin kapszulába zárjuk, vagy tablettává préseljük, vagy közvetlenül a beteg ételébe keverhetjük. A hatóanyagot gyógyszerkészítésben szokásosan használt se198.293 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
