198195. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-[3-alkil-5-(terc.-butil)-4-hidroxi-fenil]-2-amino-6H-1,3,4 tiadiazidok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
15 HU 198195 B 16 Farmakológia! vizsgálatok és azok eredményei A találmány szerinti eljárással előállítható (I) általános képletű vegyületek antil'logisztikus (gyulladásgátló) és analgetikus (fájdalomcsillapító) hatásának, az oxigén-győ- 5 köket dizaktiváló képességének, ulcerogén (fekélyokozó) aktivitásának és akut toxikusságának ' vizsgálatát az alább leírt állat-modelleken végeztük, aminek sorén összehasonlító anyagként a reuniaterápiában általánosan 10 elismert és alkalmazott antiflogiszLikus hatású naproxént (2-/6-meloxi-2-nafl.il/—propionsav) alkalmaztuk. 1. Adjuváns-artritisz A-vizsgálatokat Pearson (Arthrit. Rheum. 15 2, 44 /1959/) módszere szerint végeztük. Kísérleti állatként Wistar-Lewis törzsű, 130- -200 g testtömegű hím patkányokat alkalmaztunk. A vizsgálandó vegyületeket 50 mg/kg testtömeg-adagban naponta egyszer adtuk be 20 orális úton a kísérlet elsőtől ötödik napjáig. Egy kontroli-csoport állatait csak a készítmény vivőanyagjával kezeltük, l-l állatcsoport mind a kísérleti, mind a kontroli-állatoknál 8 patkányból állt. A hatás mértékéül a 55 kezelt állatok mancs-térfogatának megnövekedésével szembeni százalékos gátlást tekintettük, a kezeletlen kontroli-állatokhoz viszonyítva. 2. Akut gyomorfekély-okozás 50 A vizsgálatokat 10-10 him Sprague-Dawley patkányon végeztük; az állatok gyomor-nyálkahártyáját éhezési stressz útján szenzibilizáltuk. Az állatok testtömege 200 és 300 g között volt. Az állatoktól a vizsgálandó 55 készítmény beadási időpontja előtti 48 órától egészen az állatok leöléséig megvontuk a táplálékot, ivóvízhez azonban szabadon hozzájuthattak. A patkányokat a vizsgálandó vegyület orális úton történő beadása után ^ 24 órával leéltük, gyomrukat kivettük, folyó víz alatt mostuk és megvizsgáltuk a gyomor-nyálkahártya károsodását. Fekélyként a makroszkopikusan látható sérüléseket tekintettük. Az egyes adagok esetében megállapí- ^ tottuk a fekélyes állatok számát, és ebből Litchfield és Wilcoxon (J. Pharmacol, exp. Ther. 96, 99 /1949/) módszere szerint kiszámítottuk az UDso-értékeket, vagyis azokat az adagokat, amelyektől az állatok 50%-ánál nyálkahártya-sérülések mutatkoznak. 3. Akut toxikusság Az LDso-értékeket a szokásos módon határoztuk meg, az NMRKNaval Medical Researsh Institute) által tenyésztett egereken (adagonként 6-6 állattal) az egyszeri intraperitoneális beadás után 7 napon belül fellépő mortalitás alapján. A fent ismertetett vizsgálatok oredméfin nyeit az alábbi II. táblázatban foglaltuk öszsze. Ezek az eredmények egyértelműen bizonyítják a találmány szerinti eljárással előállítható (I) általános képletű vegyületeknek az ismert és elsőrangúnak tekintett naproxen-vegyülettel szembeni lényegesen nagyobb 10 hatásosságát és sokkal kedvezőbb terápiás szélességét. II. Táblázat Gyulladásgátló és fekély-okozó hatás, akut toxikusság Példa szerinti - vegyület Adjuváns-artritisz %gátlás 50 mg/kg p.o. adagnál Akut os ulcerogén ha, hatás, UDso mg/kg Akut toxikusság LDso mg/kg 1 69*) 200 600-1200 2. 62 100 600-1200 3. 58 >200 600-1200 4. 81 100-200 300-600 8. 61*» >200 300-600. 9. 55*» >200 600-1200 10. 82 200 >1200 11. 54 100-200 >1200 12. 65 >200 600-1200 13. 71 >200 600-1200 14. 75 >200 600-1200 18. 74 100 >1200 20. 72 200 150-300 22. 84*» >200 600-1200 Naproxen 55 23 500 *) X-os gátlás 12,5 mg/kg p.ö. adagnál Az adjuváns-artritiszt-modell adag/hatás görbéjéből például az 1. példa szerint vegyületnél 6,0 mg/kg EDso-érték adódik, ami lényegesen előnyösebb, mint a naproxen megfelelő 17,5 mg/kg EDso-értéke. Az akut ulcerogén hatásra vonatkozólag az UD50/ED50 hányadosból az 1. példa szerinti vegyület esetében kb. 33 terápiás szélességi érték adódik, mig a naproxennél ez az érték csupán 1,3, ami különösen meggyőzően mutatja, hogy milyen rendkívül jó a találmány szerinti vegyületek gyomor általi elviselhetősége. Ugyanilyen egyértelmű előny mutatkozik a találmány szerinti vegyületek javára az alkalmazott összehasonlítási vegyülettel szemben, ha a terápiás szélességet a kísérletileg meghatározott LDso-értékek alapján számit-’ juk: így az 1. példa szerinti vegyületnél az LDm/EDm hányados értéke kb. 150, míg a naproxen esetében ez az érték 28,6. A további különleges farmakológiai kísérletek is a találmány szerinti vegyületeknek a naproxennel szembeni határozott fölényét bizonyítják. 4. Oxidációgátló hatás A jelenlegi tudományos felfogás szerint e reumatoid artritisz és hasonló gyulladásos megbetegedések több tényező által befolyásolt progresszív lefolyásában számottevő mértékben hatnak közre az agresszív oxigén- gyökök, amelyek a krónikus gyulladási folyamatok során túlzott mértékben képződnek
