198172. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás aminosav- és peptid-aril-amidok előállítására
3 198 172 4 sósnál nagyobb mennyiségben alkalmazzuk. Továbbá azt találtuk, hogy a piridinr.ek nem szükséges vízmentesnek lennie. A találmány szerint az (I) általános képieíű amino ss'’- és peptid-arii-amidokat égy állítjuk elő, hogy a védett Xxx aminosavat illetve P—Xxx peptidet, a ÍGSzfor-trikloridot és az A aril-amint 1:0,6—1,5:1 mólarányban reagáltatjuk az aminosavra, illetve pepiidre vonatkoztatva, 0,2%-nál kevesebb vizet tartalmazó piridinben, előbb —20 és -5 °C közötti hőmérsékleten 20—40 percen át, majd 15—45 °C-on 2-4 órán át. A keletkező alkalmasan védett aminosav- illetve peptid-aril-amidot elkülönítjük, és kívánt esetben a peptidkémlában ismert módon hozzákapcsoljuk a kívánt acil-, aminosav-, acil-aminosav-, peptid- vagy acií-peptid-részt, majd végül a terméket vagy a tennék valamilyen savaddíciós sóját izoláljuk. A fentiek alapján a találmány javított eljárás az j (!) általános képlett! — mely képletben P, Xxx ás A jelentése a bevezetőben megadott — aminosav- és pepiid aril-amidok és savaddíciós sóik előállítására a megfelelő aminosavak és peptidek, valamint aril-aroinok foszfor-triklorid segítségéve] piridinben történő reagáltatásával, amely abban áll, hogy egy védett Xxx L-alfa-aminosavat illetve P -Xxx peptidet — ahol P és Xxx jelentése a fenti —, a foszfor-trikloridot és az A aril-amint — ahol A jelentése a fenti — 1:0,6—1,5:1 mólarányban reagáltatjuk az aminosavra illetve pepiidre vonatkoztatva, 0,2%nál kevesebb vizet tartalmazó piridinben vagy piridir.t tartalmazó szerves oldószerben, 20—40 percen át —20 és —5 °C közötti, majd 2—4 órán át 15— 45 °C hőmérsékleten, majd az így keletkezett védeti aminosav- illetve peptid-aril-amidot a védőcsoport eltávolítása előtt vagy után elkülönítjük, és kívánt esetben a peptidkémiában ismert módon tovább alakítjuk az (I) általános képletnek megfelelő aminosav-, illetve peptid-aril-amiddá, melyet önmagában' vagy savaddíciós só formájában izolálunk. A találmány szerinti eljárás egy előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy' az alfa-aminocsoportján védett L-argininí, ami lehet benzil-oxikarbonil-L-arginin vagy t-butil-oxi-karbonii-L-argininklórhidrát-hidrát, és aril-amint, ami lehet p-nitroanilin vagy 7-amino-4-metil-kumarin, valamint fcszfor-trikloridot 1:1:1,3 mólarányban reagáltatunk 0,2%-nál kevesebb vizet tartalmazó piridinben 0,5 órán át -20 °C körüli, majd 2 órán át 20 °C hőmérsékleten. A keletkezett védett L-arginin-arilamid-klórhidrátot elkülönítjük. A benzil-oxi-karbonil-L-arginin-p-nitro-anilidet az ismert eljárásokkal szemben 87%-kal, a terc-butil-oxi-karbonil-L-arginin-4-metil-kumarint pedig 85% hozammal állítottuk elő. Adott esetben a védőcsoportot eltávolítjuk, és az alfa-aminocsoportján szabad L-arginín-aril-amidot mono-hidroklorid vagy mono-hidrobromid formában izoláljuk. Az L-arginin-aril-amidhoz önmagában ismert módon kapcsoljuk a kívánt acil-peptid-csoporíot, ami lehet terc-butil-oxí karbonil-D-fenilaianil- L-proün vagy N2-bcnzil-oxí-karbonil-L-lizil-L-prolin, és végül a terméket valamilyen savaddíciós só formában izoláljuk. A találmány szerinti eljárás egy másik előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy L-lizint, ami alfa- és epszilon-aminocsoportján egymástól szelektíven eltávolítható védőcsoportokat tartalmaz, ilyen lehet a t-butil-oxi karbonil- és benzil-oxi-karboril-védőcsoport-párral ellátott L-iizin, vagy valamely az aifa-aminc-csoportján védett Xxx aminosavat, illetve P— Xxx peptidet, ami lehet t-butil-oxikarbonii-L-valiri, illetve benzil-oxi-karbonü-L-fenüalanil-L-prolin, és aril-arnint, ami lehet p-nltro-anilin vagv 7-ammo-4-nieti!-kumarin, valamint foszfortrikloridot 1:1:1,1 mólarányban reagáltatunk piridinben 1 órán át —15 °C körüli hőmérsékleten és 2—3 órán át 20 °C körüli hőmérsékleten. A keletkezett védett aminosav-, illetve peptid-aril-amidot elkülönítjük, az aíía-amino-védőcsoportot eltávolítjuk, és izoláljuk az alfa-aminocsoportján szabad aminosav-, illetve peptid-arii-amidot, majd ehhez kapcsoljuk önmagában ismert módon a kívánt acil-, vagv acil-peptidil-csoportot, amely lehet 3-karboxipropionil-, 3-karboxi-p:opionil-L-alanil-L-alariil-L-proíi! , vagy terc-botii-oxi-karbonil-L-glutamlnll-L-fenilalanil-csoport, és végül a terméket adott esetben valamilyen savaddíciós só formájában izoláljuk. A találmány szerinti eljárás egy további előnyös kiviteli módja szerint úgy járunk el, hogy alfa-amino- és alfa- vágj' omega-karboxil-ssoportján védett L- amino-dikarbonsavat, ami lehet benzil-oxi-karbonil- L-g!utaminsav-l-metil-észtei, és aril-amint, ami lehet p-mtro-anilin vagy 7-amino-4-metil-kumann, valamint foszfor-trikloridot 1:1:1 mólarányban reagáltatvnk piridinben 1 órán át —20 °C körüli hörnérsék'eten és 2 órán át 20 °C körüli hőmérsékleten. A keletkezett védett aminosav-arii-amidot elkíilonítj ik, amino- és/vagy karboxil-védőcsoportját eltávolítjuk és a szabad, illetve részben védeti aminodikarbonsav-aril-amidot izoláljuk. A részben védett amino-dikarborisav-aril-atnid arnino- vagy karboxilcsoportjához önmagában ismert módon kapcsoljuk a kívánt aminosav-, amely lehet glicin-, acil-aminosav , peptid- vagy acil-peptid-részt, és végül a termeket kívánt esetben bázis/savaddíciós só formájában izoláljuk. A találmány szerinti eljárás előnyei az ismert eljárásokkal szemben a következők: — a reakcióhoz nem szükséges vízmentes piridin, — az A aril-amin kapcsolásának hozama igen jó 70-87%.-- az arginin-aril-amidok esetén a hozam messze felülmúlja az irodalmi hozamokat (85—87%). A találmány szerinti eljárás megvalósítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. A példákban megadott Rr értékeket szilikagél (Kieselgél G. Reanal, Budapest) rétegkromatográfiaval határoztuk meg az alábbi oldószerekben: . etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (30 :20:6 :! 1) 2. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (60 :20 :6 ; 11) 3. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (120:20:6:11) “. etil-acctát-piridin-ecetsav-víz (240:20:6:11) í;. etil-acetát piridin-ecetsav-víz (460:20:6:11) 6. etil-acetát-piridin-ecetsav-víz (960 :20 :6 :11) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
