198079. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidrofób cisz-platina-komplexek előállítására és liposzómába történő beépítésére
9 198 079 10 3. példa Cisz-bisz-neodckanoáto-DACH-Pt(ll) szintézise 0,423 g, a 2. példa szerint előállított racém szulfáto-DACH-Pt(II)-t feloldottunk 10 ml vízben. Az oldathoz hozzáadtunk 0,420 g neodekánsav-káliumsót, és a reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten kevertük. Gumiszerű terméket kaptunk, amelyet kloroformmal extraháltunk, és az extraktumot vízmentes magnézium-szulfáton megszárítottuk. A magnázium-szulfátot leszűrtük, és a szűrletet szárazra pároltuk. Piszkosfehér szilárd terméket kaptunk, amelyet vákuumban és foszfor-pentoxidon szárítottunk. A kapott terméket 0 °C-on tároltuk. Elemzési eredmény a C23H52N204Pt képletre: talált: C 48,30%, H8,10%, N3,92%; számított: C 47,93%, H8,00%, N4,30%. A cisz-bisz-neodekanoáto-DACH-Pt(II) a (3) képlettel jellemezhető, ahol R,R/ és R" metil-, etil- vagy propilcsoport lehet a Ci0H19O2 összegképletű karboxiláto-csoportot adva (molekulatömeg 172). A cisz-bisz-neodckanoáto-DACH-Pt(H) nagyon jól oldódik metanolban és kloroformban és oldhatatlan vízben. A cisz-bisz-neodekanoáto-transz-RR-DACH-Pt(II) elemzési eredménye: talált: C 47,75%, H8,16%, N3,98%; számított: C 47,93%, H8,00%, N4,30%. 4. példa Cisz-n-decil-imino-diacetátot-DAClf-Pt(II) előállítása 0,423 g, a 2. példa szerint előállított szulfato- DACH-Pt(II)-t feloldottunk 10 ml vízben. n-Decilimino-diecetsav-nátriumsót állítottunk elő úgy, hogy 0,08 g nátrium-hidroxidot adtunk 0,273 g N-decilimino-diecetsav 50 ml vízzel készült oldatához. A kapott vizes oldatot hozzáadtuk a szulfato-DACHPt(II)-oldathoz, és a reakcióelegyet 30 percig kevertük, szobahőmérsékleten. A kapott oldatot forgó bepárlóban 40 °C-on, csökkentett nyomáson szárazra pároltuk. A kapott sárga terméket metanolban feloldottuk, és Celiten keresztül megszűrtük. A sárga szűrletet forgó bcpárlóban csökkentett nyomáson szárazra pároltuk. Sárga kristályos terméket kaptunk, amelyet tovább tisztítottunk 1-propanolból, kitermelés 80%. Elcmanalízis a C20H-,9N3O4Pt • 2H20 képletre: talált: C 39,28%, H 7,12%, N6,Ó8%; számított: C 38,95%, H7,02%, N6,81%. IR spektrum (KBr pellet formájában). /C = 0 1580 cm-1,/C-0 1410 cm-1. A cisz-n-decil-imino-diaceto-DACH-Pt(II) a (4) képlettel jellemezhető ahol R jelentése n-decil- vagy hosszabb, egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport. A cisz-n-decil-imlno-diacetálo-DACU-Pt(II) nagyon jól oldódik metanolban és kloroformban, és vízben oldhatatlan. Az előállítást transz-RR-DACH felhasználásával végeztük el. A cisz-n-decil-imino-diacetátot-transz- RR-DACH-Pt(lI) elemzési eredménye: talált. C 38,60%, H6,87%, N6,82%; számított: C 38,95%, H7,02%, N6,81%. Az előállított vegvületet az (I) általános képletű vegyületek közül egy olyan vegyületet képvisel, ahol R, és R2 jelentése azonos, és a karboxiláto monoaniont egy olyan atom köti össze, amelyen egy hidrofób alkilcsoporl helyezkedik cl, így tulajdonképpen egy karboxiláto dianiont képeznek. 5. példa Platina tartalmú liposzómák előállítása (L-PT) A fentiekben ismertetett platina komplexet (PT) tartalmazó multilamelláris lipid hólyagocskákat (MLV) vagy liposzómákat állítottunk elő, a Lopez- Berestein et al (4) (1984) Clin. Exp. Metastasis V2 pp 127- 137, és Lopcz-Beresíein ct al (1983) J. Tnf. Dis V 147 pp 937—945 helyen ismertetett módon. Röviden összefoglalva lipidek klcroformos oldatát (a kívánt mólaránynál) és platina komplexet kevertünk olyan arányban, hogy a lipid és a komplex aránya 15 :1 legyen, a kloroformot forgó bepárlóban (Buchi, Birkmann Institrumens, Westbury, NY) lepároltuk. A száraz platinakomplexct tartalmazó lipid film vizes oldattal (0,9% NaCl vízben) erőteljesen összerázva diszpergáltuk. A szuszpenziót ezután 30 000 g-vel centrifugáltuk 45 percig, a felülúszót eldobtuk, és a komplexet tartalmazó pelletet újra szuszpendáltuk 0,9% NaCl-t tartalmazó vízben. Platina komplexet tartalmazó MLV vagy liposzóma úgy is előállítható, hogy liofilizáit por alakú lipidet és platina komplexet alkalmazunk. A lipidet és a platina komplexet a fenti tömegarányban tercier butanolban (op.: 26 °C) mint hidrofób oldószerben oldjuk. Az oldatot fagyasztva szárítjuk, és fehér port kapunk. A platina komplexet tartalmazó MLV 0,9%-os NaCl-oldat hozzáadására képződik, enyhe rázás közben. 6. példa A kapszulázás hatékonyságának (EE) és a stabilitásának a számítása Az elemi platinát határoztuk meg a liposzóma szuszpenziőban és a pelletben röntgen-fluoreszcenciás módszerrel a Seifert et al (1979) Proc. Amer. Ass'n. Cancer Res. V 20 p. 168 helyen ismertetett módon. A felülúszóban a platina komplex mennyiségét ultraibolya spektrofotometriásán határoztuk meg 224 nrancl. Az EE-értékét a következő képlettel számoltuk: 1. EE= platina tartalom a pelletben per teljes platina tartalom a kezdeti liposzóma szuszpenzióban, 2. EE = (teljes eredetileg adagolt platina mennyiség minus/ a platina tartalom a felillúszóban) per a teljes eredetileg adagolt platinamennyiség). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
