198077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált amino-alkanoil-amino-alkil-foszfonátok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
198 077 10 h) l-[(S)-2-[[[l-[[(S)-6-[[(Benzil-oxi)-karbonií] amino]-2-( ciklobutánkarbonil-amino )-l -oxohexil]-amino]-pentil]-hidroxi-foszfmil]-oxi]-1-oxo-propil] L-proIin 304 mg (0,9 mmól) l-[(&)-2-[[(l-amino-pentil)hidroxi-foszfInil]-oxi]-l-oxo-propil]-L-prolint szililezünk úgy, hogy argon atmoszférában 1,55 g (6 mmól) bisz(trimetil-szilil)-trifluor-acetamiddal 3 ml acetonitrilben addig kevcrtctjük, amig homogén oldatot kapunk (hozzávetőlegesen 1 óra). 362 mg (1 mmól) N6-[(benzil-oxi)-karbonil)-N2- ciklobután-karbonil-L-lizint 1 ml tetrahidrofuránban oldunk, hozzáadunk 2 mmól N-metil-morfolint és argongáz atmoszférában —20 °C-ra hűtjük. Ezután izobutil-(klór-formiát)-ot adunk az elegyhez, aminek következtében fehér csapadék válik ki, és —20 °C hőmérsékleten 20 percen át kevcrtctjük. Ezt követően egyszerre adjuk az elegyhez a szililezett foszfonil-L- prolin-származékot, aminek következményeképpen az oldat hőmérséklete 0 °C-ra emelkedik. Gyorsan visszahütjük —20 °C-ra, és 1 óra hosszat ezen a hőmérsékleten, majd további 1 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet, és végül, etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat keverékére öntjük. Az etil-acetátos fázist elválasztjuk, mossuk nátriumklorid-oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Az így kapott 670 mg fehér, szilárd anyag l-[(S)-2-[[[í-[[(S)-6-[[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-(ciklobutánkarbonil-amino)-l-oxo-hexil]amino]-pcíitil]-liidroxi-foszfinil]-oxi]-l-oxo-propil]-L- prolin (vékonyréteg-kromatográfia: szilikagél; izopropanol-ammónium-hidroxid-víz = 7:2:1; Rf = 0,51) és a visszamaradt N6-[(benzil-oxi)-karbonil]-N2-ciklobutánkarbonil-L-lizin (Rf = 0,71) keveréke. i) l-[(S)-2-[[[l-[[(S)-6-Amino-2-(ciklobutánkarbonilamino)-l-oxo-hexii]-amino]-pentil]-hidroxi-foszfinií]-oxi]-l -oxo-propil ]-L-prolin A h) pontban leírt módon kapott keveréket 25 ml metanolban oldjuk és 70 mg 10%-os csontszenes palládiumkatalizátort adva az oldathoz 2 órán át légköri nyomású hidrogéngáz atmoszférában kevertetjük. Ezután a metanolos oldatot celiten átszűrjük és bepároíjuk, aminek következtében fehér üvegszerű anyag marad vissza. Ezt az anyagot HP-20 adszorbensen kromatografáljuk úgy, hogy az eluálást víz és acctonitril 1 :1 arányú elegy ével, 0-tól 100%-ig terjedő koncentrációgrádienst alkalmazva végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat a szennyezés nyomainak eltávolítása végett ismételten kromatografáljuk HP-20 adszorbensen, és ez alkalommal a gáridienselúciót víz-víz-acetonitril 7:3 koncentráció határok között végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük és liofilizáljuk. Az így kapott 140 mg szilárd anyag l-[(S)-2-[[[l-[[(S)-6-amino-2-(ciklobutánkarbonil-ainlno)-l-oxo-hexil]-aminojpentil]-hidroxi-foszfinil]-oxi]-l-oxo-propil j-L-prolin, amelynek olvadáspontja 215 °C és közben 100 °C-nál üvegszerű anyaggá alakul. (aJD=—47,4 (c = 0,5; metanol). Vékonyréteg-kromatográfia: szilikagél; izopropanol-ammónium-hidroxid-víz; Rf = 0,33. 2. példa l-[(S)-6-Amino-2-\[[l-[{(S)-6-amino ciklobutánkarbonil-amino )-l-oxo-hcxil]-amim -2-fcniletil]hidroxi-foszfinil]-cxi]-l -oxo-hexiO prolin a) [l-[[(Benzil-oxi)-karbonil]-amino, 2-fenil-etil]fősz fin sav 1 g (5,4 mmól) (l-amino-2-f úl-etil)-foszfinsavat 25 ml vízben szuszpenddlunk, f ^C-ra hűtjük, és az oldat pH-ját tömény nátrium-h.iroxid-oldattal 9,5-re állítjuk. Ezután az oldat pF )át további nátriumhidroxid-oldat hozzáadásával :H 9,5 értéken tartva, 0,9 ml (1,08 g; 6,3 mmól) oei ;il-(klór-formiát)-ot adunk hozzá, és 3 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakció befejeztével a lúgos oldatot dietiléierrel mossuk, majd megsavany juk, és a kivált fehér csapadékot szűrjük. Az így k:pott [l-[[(benzil-oxikarbonil]-amino]-2-fenil-etil]-foízfinsav Rf értéke a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat során, amelyet szjlikagélen izopropanol-ammónium-hidroxidvíz = 7 :2 :1 oldószereleggyel veszünk, 0,75. b) [!-[[( benzil-oxi)-karbonií]-amino]-2-fenil-etil]foszfonsav Az előzőekben leírt módon kapott nyers foszfinsav-származékot 5 ml víz és 5 ml 1,4-dioxán elcgyében oldjuk, és hozzáadunk 1,4 g (6.5 mmól) nátriumperjodátot. Miután az elegyet éjszakán át kevertettük, híg sav és etil-acetát elegyére öntjük, elválasztjuk és az etil-acetátos fázist mossuk híg nátrium-hidrogénszulfit-oldaltal, nátrium-klorid-oldattul, majd nátriumszulfáton szárítjuk. Az oldatot szűrve és bepárolva 1,28 g [l-[[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-fenil-etil]foszfonsavat. kapunk, amely egy tiszta olaj, és vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; izopropanolammónium-hidroxid-víz = 7 :2 :1) 0,30 Rf értéket mutat. c) [l-[[(Benzil-oxi)-karbonil]-amino]~2-fcnil-ctil]foszfonsav-dimetil-észter Az előző pontban leírt módon kapott foszfonsavszármazék 1 g-ját (2,98 mmól) 100 ml etil-acetátban felszuszpendáljuk, és diazo-metol oldatot — amelyet úgy állítunk elő, hogy 2 g l-metil-3-nitro-l-nitrozoguanidint 25 ml dietil-éterben 6 ml 40%-os káliumhidroxid-oldattal reagáltatunk — adunk hozzá részletekben mindaddig, amíg a szilárd anyag fel nem oldódik és a diazo-metán sárga színe már nem tűnik el. Ezután néhány csepp ecetsavval a diazometán felesleget elbontjuk, és az etil-acetátos oldatot előbb telített nátrium-lűdrogén-karbonát-oldatlal, majd nátrium-klorid-oldattal mossuk és nátrium-szulfáton megszárítjuk. Szűrve és bepárolva 1,0 g (l-[[(benziloxi)-karbonil]-amino]-2-fcnil-etil]-foszfonsav-dimetilésztert kapunk, ami egy olaj és vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; hexán-aceton = 1 :1) az Rf értéke 0,18. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 50 55 6
