198077. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált amino-alkanoil-amino-alkil-foszfonátok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
11 198 077 12 d) (1 ammo-2-fenil-eti!J-foszfonsap-dimetiI-észter 1 g (2,8 mmól) a c) pontban leírt módon előállított dimetil-észtert 100 ml metanolban feloldunk, 120 mg 20%-os csontszenes palládium-hidroxid katalizátort adunk hozzá, és légköri nyomáson, hidrogéngáz atmoszférában 4 órán át kevertetjük. Az oldatot ezután szűrjük és vákuumban bepároljuk, aminek eredményeképpen 622 mg (l-amino-2-fenil-etil)-foszfonsav-dimetil-észtert kapunk. Vékonyréteg-kromatográfia: szilikagél; izopropanol-ammónium-hidroxidvíz = 7:2:1; Rf = 0,76. e) -[(Benzil-oxij-karbonil]-N3-ciklobutdnkarboml-L-lizil]-amino]-2-fenil-etil]-foszfonsav-dimetil-észter 911 mg (2,7 mmól) az 1. példa g) pontjában leírt módon előállított N6-[(benzü-oxi)-karbonil]-N2-ciklobutánkarbonil-L-lizint 15 ml vízmentes tetrahidrofuránban feloldunk, és argongáz atmoszférában, 0 °C-on 0,45 ml (0,32 g; 3,2 mmól) trietil-amint, valamint 140 mg (1,1 mmól) (dimetil-amino)-piridint adunk hozzá. A kapott fehér szuszpenziót 1 óra hoszszat 0 °C-on kevertetjük, majd hozzáadunk 622 mg (2,7 mmól) (l-amino-2-fenil-etil)-foszfonsav-dimetilésztert, 15 ml metilén-dikloridban oldva. A reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni és 72 órán át kevertetjük, majd etil-acetát és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldat keverékére öntjük és elválasztjuk. Az etil-acetátos fázist mossuk előnyösen 5%-os kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, majd nátriumklorid-oldattal, és nátrium-szulfáton szárítjuk. A bepárlás után visszamaradó olajat, amelynek tömege 1,5 g, 150 ml LPS-1 szilikagélen kromatografáljuk. Az eluálást aceton és hexán 1 :1 arányú elegyével végezzük. Azokat a frakciókat, amelyek a terméket tartalmazzák, bepároljuk, és ilyen módon tiszta olaj formájában 1,04 g [l-[[N6-[(benzii-oxi)-karbonii]-N2- ciklobutánkarbonii-L-lizil]-amino]-2-fenil-etil]-foszfonsav-dimetii-észtert kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel vizsgálva (szilikagél; acetonhexán = 1 :1) a termék Rf értéke 0,14. f) [l-[[N6-[(Benzil-oxi)-karbonil]-N2-ciklobutánkarbonil-L-lizií]-amino)-2-fenil-€til]-foszfomav 1,04 g (1,81 mmól) az e) pontban leírt módon előállított dimetil-észtert 10 ml metilén-kloridban feloldunk és hozzáadunk 0,52 ml (605 mg; 3,96 mmól) trimetil-szilil-bromidot. A reakcióelegyet ezután argongáz atmoszférában éjszakán át kevertetjük, másnap vákuumban bepároljuk, és a maradékot feloldjuk 15 ml 1,4-dioxán és 5 ml víz elegyében. 15 perc kevertetés után az oldatot bepároljuk, és a maradékról háromszor 20 ml acetonitrilt desztilláunk le, hogy a víz nyomait is eltávolítsuk. A kapott termék 1,06 g narancssárga hab, [l-[[N6-[(benzin-oxi)-karbonil]-N2- ciklobután-karbonil-L-lizil]-amino]-2-fenil-etil]-foszfonsav. Vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; izopropanol-ammónlum-hidroxid-víz = 7:2:1) az Rf értéke 0,42. g) (S)-6-Amino3-hi iroxi-hexánsav 18,3 g (0,1 mól, L-Iizin-monohidriklorid vizes oldatát átengedjük egy 500 ml térfogatú, 100-200 mesh szemcseméretű, hiclroxil-ciklusban lévő AG 3-X4A ioncserélő gyantával töltött oszlopon és vízzel eluáljuk. A ninhidrinnel pozitív reakciót mutató frakciókat 100 ml (0,2 mól) 2 M kénsavval megsavanyítjuk, majd szárazra pároljuk. A nyers Hizin-diszulfátot feloldjuk 250 ml 10%-os kénsavban, és az oldathoz, amelyet egy 45-50 °C hőmérsékletű vízfürdőbe merítünk, cseppenként, mintegy 2 óra alatt hozzáadjuk 25,9 g (0,36 mmól) nátrium-nitrit 100 ml vízzel készített oldatát. Az adagolás végeztével az elegyet további 4,5 órán át 45—50 °C hőmérsékleten keverjük, majd a salétromossav feleslegét karbamiddal elbontjuk. Az oldatot ezután felöntjük egy 200 inl térfogatú, hidrogénion ciklusban lévő AG 50—X8 ioncserélő gyantával töltött oszlopra, és vízzel, majd hígított ammónium-hidroxid-oldattal (ammónium-hidroxidvíz = 1 :3) eluáljuk. A ninhidrinnel pozitív reakciót mutató frakciókat bepárolva egy rózsaszínű, félig szilárd massza marad vissza, amelyet víz és etanol elegyéből átkristályosítva, fehér kristályok formájában 8,20 g (S)-6-amino-2-hidroxi-hexánsavat kapunk. A termék olvadáspontja 197—199 °C. [a]2D2 = -12,2° (c = 1,2; víz). Vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel vizsgálva szilikagél; izopropanol-ammonium-hidroxid-víz = = 7:2:1) a termék (Rf= 0,16) mellett lizin nyomai (Rf = 0,12) is kimutathatók. h) (S)-6-[[(Bcnzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-hidroxihexánsav 7,5 g (51,0 mmól) (S>6-amino-2-hidroxi-hexánsavat feloldunk 50 ml 1 N nátrium-hidroxid-oldatban, majd jeges fürdővel 0 °C-ra hűtve, tömény sósavval az oldat pH-ját 10-re állítjuk.Ezután 8,4 ml (55,9 mmól) 95%-os benzil-(klór-formiát)-ot adunk az oldathoz, hozzávetőlegesen 15 percenként 1 ml-es részletekben. Az adagolás teljes időtartama alatt az oldat pH-ját 9,8-10,2 között tartjuk további 1 N nátrium-hidroxidoldat hozzáadásával. Az adagolás végeztével, amikor az oldat pH-ja már nem változik, 0 °C hőmérsékleten további 45 percen át kevertetjük, majd di etil-éterrel mossuk az elegyet. Ezután a vizes fázist tömény sósavval megsavanyítjuk, etil-acetáttal extraháljuk, majd az etil-acetátos extraktumot telített nátrium-kloridoldattal mossuk, nátriunv-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot diizopropil-éterből átkristályosítva 13,5 g fehér nyersterméket kapunk, amelyet etil-acetát és hexán elegyéből mégegyszer átkristályosítunk. A tiszta (S)-6-[[(benzil-oxi)-karbonil]-amino]-2-hidroxi-hexánsav 79-81 °C olvadó fehér kristályokból áll, amelynek tömege 11,48 g. [a]22 = +4,5°; [a]365 = 4-26,8° (c =1,1; kloroform). Vékonyrétegen kromatografálva (szilikagél; ecetsav-metanol-metiléndiklorid =1:1 :20) Rf = 0,19. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
