198076. lajstromszámú szabadalom • Eljárás O-alkilezett glicerofoszfo- és dezoxi-glicerofoszfoszerin származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
5 198 C 76 6 Berchtold és F. Sayder: Reserch Conunun. in Chem. Pathology and Pharmacology, 44, 293-306 (1984)] — nem korlátozódik a foszfo-kolin-csoportot tartalmazó vcgyülctckrc. 1. táblázat Foszfatidil-szerm analógok in vitro gátló hatása Ehrlich ascites tumor sejtek növekedésére * 1 Gátló hatás (%) Vegyü~ ~ let Hatóanyagkoncentrációja (mól/1) képlete IX 10“4 2X 10~5 IX 10-5 5X 10~6 2X 10“6 IX 10~6 (la) 96 80 55 30 10 16 (I-b) 93 81 68 38 17 15 (I-c) 95 82 51 18 13 10 (I-d) 99 88 76 43 43 — (I-e) 100 87 65 30 — — (I-f) 99 68 34 6 — — (I-g) 99 87 74 27-(A) 80 18 9 7 _ _ 96 61 19 3 — — 100 62 23 4 — — Az 1. táblázatban szereplő vegyületek kdplelébcn PS jelentése foszfo-szerin PC jelentése foszfo-kolin A találmányt közelebbről az alábbi példák segítségével kívánjuk ismertetni. 1. példa 2-Klór-2-dezoxi-l-O-hexadecil-glicero 3-foszfo -L-szerin előállítása a) 2-Klór-2-dezoxi-l-0-hcxadccil-gliccro-3-foszforsav előállítása A fenti vegyületet H. Brachwitz és munkatársai [Chem. Phys.- Lipids, 31, 33—52 (1982)] módszere szerint állítjuk elő. 0,335 g (1 mmól) 2-kIór-2-dezoxi-l-0-hexadecilglicerin 10 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatát 0,6 ml vízmentes píridin hozzáadása után 0,35 ml (3,755 mmól) foszfor-triklorid 3,5 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatába csepegtetjük, keverés és jeges hűtés alkalmazása mellett. A rcakcióclcgyct 3 órán át keverjük hűtés mellett, majd hozzáadunk 16 ml 10%-os nátrium-hidrogénkarbonát-oldatot. Az elegyet 15 percen át tovább keverjük, híg sósavoldattal enyhén megsavanyítjuk, és az oldatot éterrel és kloroformmal többször extraháljuk. Az egyesített extraktuniókat szárítjuk és bcpároljuk. 0,4 g cím szerinti nyersterméket kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás Rf értéke: 0,15 (Merck alufólia, Kieselgél 60; futtatóelegy: kloroform, metanol és 25%-os vizes ammóniaoldat 50:25 :6 térfogatarányú elegye). b ) 2-K lór-2 -űczoxi-1 -0-hcxadccil-gliecro-3-f ')szfo-N-(terc-butoxi-karbonil)-L-szerin-benzhidríl-észter előállítása A fenti vegyületet A. Hermetter és munkatársai [Chem. Phys. Lipids, 30, 35- 45 (1982)] eljárásával analóg módon állítjuk elő. 0,225 g (0,54 mmól) 2-klór-2-dezoxi-l-0-hexadecil-glícero-3-foszforsav, 0,3 g (0,81 mmól) N-tercbuloxi-karbonil-L-szcrin-benzhidril-észter, 0,657 g (2,35 mmól) 2,4,6-triizopropil-benzolszuifoklorid és 13 ml vízmentes píridin elegyét szobahőmérsékleten 36 órán át keverjük. A rcnkcióclcgyhcz néhány csepp vizet adunk, majd vákuumban ledcs/.tilláljuk, loluoilal többször újra desztilláljuk, a maradékot éterben felvesszük, az oldhatatlan anyagot leszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A kapott nyersterméket 35 g Kieselgél 60-on (Merck, 0,040-0,063 mm) kromatografáljuk, 50 mi kloroform, 50 ml 9:1 térfogatarányú kloroform-metanol elcggycl. A 6-12. frakciókból (mindegyik 15 ml) 0,161 g tiszta cím szerinti vegyületet kapunk, vékonyrétegkromatográfiás Rf értéke (Merck alufólia, Kieselgél 60): 0,72 (futtatóelegy: kloroform, metanol és 257^os vizes ammóniaoldat 65 :35 :5 térfogatarányú elegye). c) Védőcsoport lehasítása 0,161 g (0,21 mmól) 2-klór-2-dezoxi-l-0-hexadecil-glicero-3-foszfo-N-(terc-bútoxi-karbonil)-L-szerin-bcnzhidril-észter vízmentes kloroformmal készült oldatába jeges hűtés mellett 15 percen át vízmentes hidrogén-klorid gázt vezetünk, és az elegyet 1 órán át keverjük. Ezután a hidrogén-kloridot nitrogéngáz bevezetésével (1 óra) eltávolítjuk. Az oldatot híg, vizes ammóniaoldaítal, majd vízzel mossuk, és bepároljuk. A kapott 0,15 g nyers foszfatidil-szerin terméket 10 g Kieselgél 60-on oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, az eluálást növekvő metanol-tartalmú 2:1 térfogatarányú kloroform-mctanol-elcggyei végezzük. A 12-28. frakciókból (mindegyik 15 ml) 0,038 g 2-klór-2-dezoxi-l-0-hexadecil-glicero-3-foszfo-L-szerint kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás Rf értéke (Mcrckféic kész lemez, rétegvastagság 0,25 mm): 0,13 (futtatóelegy: kloroform, metanol és víz 50:25:4 térfogatarányú elegye). A termék diammónium-sójának FAB-tömcgspektruma: M 501, M+ 502, M" 500, M + H-88 (szerinmaradék)484, M-88-HC1 377. 2. példa 2-Dezoxi-2-fluor-l-0-hexadecil-glicero-3-foszfo-L-szcrin előállítása 2-Dezoxi-2-fiuor-l-0-hexadecil-glicerinből és foszfor-oxi-kloridból az la. példa szerinti eljárással 2-dezr, 10 13 20 25 :o 35 10 45 50 55 60 65 4
