198075. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új vinblasztin konjugátumok és származékaik, valamint ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
3 198 075 4 loid-származékhoz történő kondenzálás előtt a fehérjét galaktolizáljuk. A rosszindulatú scjtfclület antigénre specifikus imniunoglobulinok, valamint immunizált állatok szérumából vagy monoklón antitestet kiválasztó hibridek tenyésztéséből történő előállítása ismert. A találmány szerinti eljáráshoz antitestként előnyösen alkalmazható a humán IgG osztályba tartozó immunoglobulin. A találmány szerint azonban alkalmazhatók egyéb eredetű immunoglobulinokra is. Ezek néhány képviselői: — karcioembrionális antigénnel immunizált kecske vagy juh lg; — nyúl anti-LLA lg; — majom anti-LLa, anti-LMA, anti-LLC, anti-LMC Ig-k; — tüdőrák membránjával immunizált kecske vagy juh lg; — humán kolorektál karcinoma ellen antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán melanóma ellen antitest kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán leukémia sejtekkel reakcióba lépő antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán neuroblasztóma sejtekkel reakcióba lépő antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán mellrák antigénnel reakcióba lépő antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán petefészek rák sejtekkel reakcióba lépő antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklón lg; — humán oszteoszarkóma sejtekkel reakcióba lépő antitestet kiválasztó egér hibridből származó ntonklón lg; — tüdőrák antitestet kiválasztó egér hibridből származó monoklóm lg. A fenti immunoglobulint az alábbi irodalmi helyek ismertetik: — Ghose T. és Blair A. H.: „The Design of Cytotoxic Agent-Antibody Conjugates”, 3. kötet, 263-361 (1987), CRC Critical Revieuws in Therapeutic Drug Carrier Systems, — Baldwin R. W. és Byers V. S.: „Monoclonal Antibodies for Cancer Detection and Therapy”, Academic Press, London—New York (1985), — Sell S. és Reisfeld R.: „Monoclonal Antibodies in Cancer”, Humana Press, Clifton-New Jersey (1985), — Thompson, C. H., Jones S. L., Phil. E. és Coll.: „Monoclonal Antibodies to Human Colon and Colorectal Carcinoma” Brit. J. Cancer, 47, 595 — 606 (1983), — Koprowsky H., Streplewski L., Herlyn D.: „Study of Antibodies against Human Melanoma”, Proc. Nat. Acad. Sei. (USA), 75, 3405-3409 (1978), — Ritz J., Pcsando J. M., Notis-McConarty J.: ,,A Monoclonal Antibody to Human Acute Lymphoblastic Leukemia Antigen”, Nature, 283, 583—585 (1980), — Ball E. D„ Frangcr M. W,: „Monoclonal Antibodies Reactive with Human Myeloid Leukemia Cells”, Clin. Exp. Immunol., 48, 655 (1982), — Kennet R. H., Gilbert R.: „Hybrid myelomes producing Antibodies against a Human Neuroblastoma Antigen present of Fetal Brain”, Science,, 20.7,1120 1121(1979), — Thompson C. II., Whitehead R. II., McKenzie L. F. C.: „A Human Breast Associated Antigen Detected by a Monoclonal Antibody”., J. Nat. Cancer. Inst., 70, 409-420 (1983), — Leclef B. és Trouet A.: „Tumor Markers, Diagnosis, Imaging and Therapeutics of Cancer, Review IRE, 11. kötet 2 (1987), — Masuko Y., Zalutsky M., Knapp R. C., Bast R C. Jr.: „Interaction of Monoclonal Antibodies with Cell Surface Antigens of Human Ovarian Carcinomas”, Res. 44, 2813-2819 (1984), — Embleton M. J., Glunn B., Bayers B. S.: „Antitumor Reactions pf Monoclonal Antibody Against a Human Osteogenic Sarcoma Cell Line”, Brit. J. Cancer, 78, 1791-1795 (1981), — Sikora K., Wrigth R.: „Human Monoclonal Antibodies to Lung Cancer Antigens”, Brit J. Cancer, 43, 696-700 (1981), — Bail E. D., Grazziano R. F., Pettengill O. S., Sorenson G. D., Frangcr M. W.: „Monoclonal Antibodies Reactive with Small Cell Carcinoma of the Lung”, J. Nat. Cancer Inst. 72, 593- 598 (1987). A konjugátumok előállíthatok immunoglobulin fragmensekkel is, így Fab, Fab' vagy F(ab ^ fragmensekkel, vagy monomer IgM-mcl, amelyeket az antitestből protcolitikiis enzimmel emésztve nyerünk ki. A konjugátumok találmány szerinti előállítása során az első lépésben (A) általános képletű vegyületet (II) általános képletű 4-dezacetil-indol-dihidroindol-vinka-alkaloid 4-es helyzetű szénatomjához1 kapcsolódó hidroxilcsoporttal kondenzálva (III) általános képletű származékot kapunk, amelyben X, R2, R3, R4 és R5 jelentése a fenti. A második lépésben a (III) általános képletű származékot fehérjével kondenzáljuk, a fehérje szabad tiol-csoportjainak vagy szabad aminocsoportjainak például a fehérje lizincsoportjaibóí származó aminocsoportjainak a pirrolingyűrű o'cfincs kettős kötésére Michacl-féic addícios mechanizmussal történő addicionálásával (Means G. E. és Feeney R. E.: Chemical modofications of proteins, 110—138 (1971), Holden Day Inc., San Francisco, USA), az eljárás során (I) általános képletű konjugátum keletkezik. Kémiai szempontból: (A) általános képletű vegyüld előállítását O. Keller és J. Rudinger: Helv. 58, 531 (1975); D. H. Rich, P. D. Gesselchen, A. Tong, A. Cheung és C. K. Buckner: J. Med. Ciiem. 18, 1004 (1975) és A. Sato és M. Nakao: J. Biochem. 90, 1117 (1981) módszerével végezzük; (A) általános képletű vegyüld és a vinka alkaloid kondenzációja megvalósítható a szokásos módon, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
