198037. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 6-(4-htt-1-piperazinil)-5,8-kinolindion-származékok és az ezeket tartalmazó agyógyszászati készítmények előállítására
1 2 A találmány tárgya eljárás új, helyettesített kinőxalin dión- és kinolin dión-származékok és ezeket tartalmazd gyógyászati készítmények előállítására. I elismertük, hogy az új (I) általános képletű kínoxalin-dion- és kiuolin-djnn-származékok a képletben X jelentése metincsoport vagy nitrogénatom, Y jelentése metincsoport vagy nitrogénatom, azzal a megkötéssel, hogy X és Y közül legalább az egyik nitrogénatom, és R jelentése 2- 4 szénatomos tartalmazó alkoxi-karbonil-, benz.il-, 3-(trifluor-meti!)-fenil- vagy 2-benztiazolilcsoport antiasztmatikus és amiallergiás hatásúak. Az (1) általános képletű vegyülelek közül az új helyettesített kinoxalin-dion-származékok könnyen előállíthatok az A reakcióvázlatban bemutatott módon. Az A reakcióvázlatban R jelentése a korábban megadott. Az A reakeióvázlat szerint az (I) képletű 5,8-kinoxalin-diont egy megfelelően helyettesített (2) általános képletű piperazin-származékkal — a képletben R jelentése a korábban megadott - reagáltatjuk közömbös oldószerben, például dioxánban, dimetil-formamidban vagy tetrahidrofuránban szobahőmérsékleten 2-5 órás reakcióidővel, egy (2) általános képletű végterméket kapva. Az (I) általános képletű vegyületek közül az új helyettesített kinolin-dion-származékok könnyen előállíthatok a B reakcióvázlatban bemutatott módon. A B reakcióvázlatban R jelentése a korábban megadott. A B reakcióvázlat szerint a (4) képletű 5,8-ktnolin-diont a már említett (2) általános képletű piperazin-származék ok valamelyikével reagáltatjuk közömbös oldószerben, például 1,2-dimetoxí-etánban, dioxánban vagy tetrahidrofuránban szobahőmérsékleten 4-48 órás reakcióidővel, egy (5) általános képletű 7-izomer és egy (6) általános képletű 5-jzomer elegyét kapva. Miként említettük, az (I) általános képletű vegyületek antiasztmatikus és antiallergiás hatásúak, miként ez a következőkben ismertetendő kísérleti részből kitűnik. __ Ismeretes, hogy az aliergikus asztmánál jelentkező hörgőgörcs mediátorok, például a hisztamín és az úgynevezett mast sejtekből felszabaduló, lassan ható anyagok felszabadulásának a következménye, Asztmás roham kiváltásánál a mediátorok felszabadulásának szerepét már tökéletesen megismerték és leírták. Itt utalhatunk többek között a következő publikációkra: M, és Austen, K.F.: Bronchial Asthma Mechanisms and Therapeutics, 163. oldal (a könyv Weiss, E. B. szerkesztésében a Little Brown and Company bostoni kiadó gondozásában 1976-ban jelent meg), Lichtenstein, L.M.: Asthma-physiology, Jmmunopharmacology and Treatment, Second International Symposium, 51. oldal (a könyv Lichtenstein, L M. és Austen, K.F. szerkesztésében az Academic Press new-yorki kiadó gondozásában 1979-ben jelent meg) és Bell, S.C. és munkatársai: Annual Reports in Medicinal Chemistry, 14. 51 (megjelent Hess HJ. szerkezstésében az Academic Press new-yorki kiadó gondozásában 1979-ben). A találmány szerinti eljárással előállított új vegyületeket Lichtenstein, L.M. és Osler, A.G. által a J. F. xp. Med., 120. 507-530 (1964) szakirodalmi helyen ismertetett módon vizsgáljuk. A módszer abban áll, bog)' kiértékeli a kísérleti vegyületeknek immunológirjlag stimulált humán baesophil-sejtek által kiválasztó1.! mediator (hisztumjn) gátlásában kifejtett képességét. A módszerhez a következő reagenseket használjuk. Tízszeresen koncentrált Tris-puffer 25 °C-on 140,3 g nátrium-kloridot 7,45 g kálium-kloridot és 74,5 g, a Sigma Chemical Co. által Triztra-Tris Pre-Set, Reagent Grade márkanéven szállított anyagot (pH-ja 7,6) annyi vízben oldunk, hogy 2 liter végső térfogatot érjünk el. Humán albumin A Sigma Chemical Co. által szállított, 30 mg/ml koncentrációjú. Kalcium- és magnézjum-törzsoldatok Kalcium-klorid-dihidrát 0,75 mólos és nragnéziumklorid-hexahidrát 0,5 mólos törzsoldatai. Tris-A puffer 10 ml tízszeresen koncentrált trisz-puffert és 1,0 ni humán albumjnt vízzel 100 ml-re hígítunk. Tris-ACM puffer 10 ml tízszeresen koncentrálttrisz-puffert, 1,0 ml humán albumlnt, 0,8 ml kalcium-törzsoldatot és 0,2 ml magné/jum-törzsoldatot vízzel 100 ml-re hígítunk. Nyúl-antihtimán-lgE Behring Diagnostics cég terméke, általában 10 g fehétje/m! végső koncentrációban kerül felhasználásra Házi poratka (Dermatophagoides Frinae) extraktuma A Hollister-Stier Laboratories cég által szállított, I : 100 (tömeg : térfogat) erősségű aiiergén extraktum. Ezt általában 1 :100 — 1 :1000 arányban hígítjuk (figyelembe véve a kísérleti edény tartalmát mint törzsoldatot). Más allergének A Hollister-Stier Laboratories cég által szállított, hiposzenzitizáiásra (túlérzékenyítésre) alkalmas, intramuszkuláris készítmények intradermális oldatok formájában: felhasznált végső koncentrációjuk 1 PNU/ml nagyságrendű. Leukociták elválasztása emberi vérből és ingerlés Anti-IgE, parlagfű-antigén vagy más specifikus aiiergén hatására hisztamint kiválasztó kísérleti személyektől 80 ml vért veszünk, 4 darab 20 ml-es heparinizált kémcsövet használva. Ezt a 80 ml vért öszszekeveijük 20 ml olyan fiziológiás oldattal, amely 0,6 g dextrózt és 1,2 g dextránt tartalmaz. A vért ezután szobahőmérsékleten két 50 ml-es, polikarbonátból készült centrifuga-kémcsőben ülepedni hagyjuk, míg a vörös vérsejtek és a plazma között éles felület képződik (ehhez 60 -90 percre van szükség). A felső fázisként elhelyezkedő plazmát mindegyik csőből eltávolítjuk pipetta segítségével és 50 ml-es, polikarbonátból készült csövekbe töltjük. A plazmát ezután 8 percen át 4 °C-on 110 x G sebességgel centrifugáljuk. A felülúszót a lehető leggondosabban dekantáljuk és a visszamaradt sejteket újraszuszpendáljuk 2-3 ml tris-A pufferben, szilikonizált Pasteur-pipettát használva. Az újraszuszpendálást úgy hajtjuk végre, hogy a folyadékfelület alá benyúló végén át a folya-198.037 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
