197945. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új peptid antibiotikumok és ilyen hatóanyagot tartalmazó készítmények előállítására
197945 Az ostoros baktériumok együttszaporodása (konkomitancia) és spontán változat előfordulása Gram-negatív, rúdalakú ostoros baktériumok az eredeti tenyészetben konkomitanciát mutatnak. A K481-B101 mikroorganizmus eléggé jól tisztítható a szokásos hígítási és egyedi sejt-elkülönítési módszerek ultrahangos és hősokkos kezelés, valamint az antibiotikus érzékenység (pl 50 pg/ml) koncentrációjú pipemidsav-oldattal) kombinálásával, a mikrospóra vagy termőtest felhasználásával. A K481-B101 tisztítatlan tenyészeteiben mukoid variánsok fordulnak elő, amelyek fehéres, kupola alakú tenyészetet képeznek, rajzó udvarral. Az ilyen mukoid variánsok vegetatív sejtjei valamivel nagyobbak az eredeti törzsénél, 0,8—1,0X2,0—3,5 pm méretűek. A sporangiumok nyalábja (sorus) túlnyomórészt mukoid változatokból ered. Rendszertani helyzet: A K481-B101 mikroorganizmus termő, kúszó baktérium, amelyet egy talajmintából különítettünk el. A törzs főbb diagnosztikai jellemzői a következők: ■Vegetatív sejtek: 1. hengeralakúak, egyenletes átmérővel 2. a végeken nem vékonyodnak el 3. behatolni képesek az agar-közegbe 4. a kongóvöröst nem adszorbeálják Mixospórák: 1. a vegetatív sejtektől differenciálódnak 2. oválisak vagy gömbalakúak 3. nem fénytörőek vagy fénytörőek Sporangiumok: 1. nyeletlenek 2. oválisak, gömbalakúak vagy szabálytalan alakúak 3. gyakran közős burkolat vagy ragacsos réteg köti össze őket 4. kettős körvonalúak 5. halványsárga színűek (meghatározott szín nélkül) 6. egyenként vagy csomókban (sori) fordulnak elő Tenyésztési és fiziológiai jellemzők: 1. telepek, aranysárgától fehéresig terjedő színűek 2. a telepek gyengén bemaródnak vagy behatolnak az agarba 3. kitinolitikusak, de nem cellulolitikusak 4. az élesztősejteket lizálják, a Micrococcus luteus sejtjeit nem. A K481-B101 mikroorganizmus fenti morfológiai, tenyésztési és fiziológiai jellemzői alapján ez a mikroorganizmus a Myxobacteriales rendbe sorolandó. A Myxobacterialis rend nemzetségei közül a Myxococcus, Archangium és Cystobacter nemzetségek az elvékonyodó vegetatív sejtek és a termőtest morfológiája alapján különbőznek a K481-B101 mikroorga3 nizmustól. A Melittangium, Stigmatella és Chondromyces nemzetségek a nyeles sporangiumok következtében különböznek a K481- B101-tői. A K481-B101 mikroorganizmus a Polyangium és Nannocystin nemzetségekhez hasontó. A Nannocystis nemzetséghez az ovális vagy gömbalakú mixospórák (nyálkás spórák), ovális és gömbaiakú, magányos sporangiumok fclytán hasonlít, de az egyenletes átmérőjű hengeralakú vegetatív sejtek és az agarba való bemaródás vagy behatolás képességének hiánya miatt a Nannocystis nemzetséghez tartozó mikroorganizmusok eltérnek a K481- -B101 -tői. A hengeres, tompa legömbölyített végű vegetatív sejtjei, a túlnyomórészt nem-fénytörő mixospórák túlnyomóan történő képzése és az ovális vagy gömbalakú, kettős körvonalú sporangiumok tekintetében a K481- B101 mikroorganizmus a Polyangium nemzetséghez hasonlít. A Myxobacterales rend nemzetségeivel való összehasonlító vizsgálat eredményei alapján a K481-B101 mikroorganizmus a Polyangium nemzetség egyik fajának tekinthető. A Polyangium fajai közül a Polyangium luteum a vegetatív sejtek mérete, a sporangiumok színe és alakja, valamint a vegetatív telep színe alapján hasonló a K481- B101 mikroorganizmushoz, azonban ez utóbbi a;, erősen összehúzódott, ovális vagy gömbalakú mixospórái, valamint az élő baktériumsejtek, például a Micrococcus luteus sejtjeinek lizálására való képesség hiánya tekintetében eltér a Polyangium luteumtól. A fentiek alapján megállapítható, hogy a K481-B101 mikroorganizmus új species, amely a Myxobacterales rend, Polyangiacae család Polyangium nemzetségéhez sorolható; elnevezésére a Polyangium brachysporum nova species nevet javasoljuk. A K481-B101 mikroorganizmus típustörzsét egyedi izolátum alakjában ATCC 53080 sz. alatt helyeztük letétbe az American Type Culture Collection intézi tnél. 1. táblázat A K481-B101 mikroorganizmus morfológiája Vegetativ sejtek: Gram-negatív, Hengeres alakúak, tompa legömbölyített végekkel; méretük 0,6—0,8X X2.0—10 pm. A kongóvörös színezéket nem adszorbeálják. Mixospórák: Megkülönböztethetők a vegetatív sejtektől. Erősen zsugorodottak, ovális vagy gömbalakot vesznek fel, méretük 0,6—0,8X0,6—1,5 (im; nem fénytörőek. Huzamosabb inkubáció esetén fénytörő mixospórák képződnek. Sporangiumok: Nyeletlenek, magányosak vagy csomókban fordulnak elő, oválisak, gömbalakúak, 4 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65