197915. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorgátló hatású új BBM-1675 C és D antibiotikum és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

197915

roljuk, amikor a BBM-1675D-t, az 1. és 3. inaktív vegyületeket tartalmazó maradékot kapunk. A BBM-1675D bioaktív anyagot flash oszlop-kromatográfiásan izoláljuk a maradékból, Woelm szilikagéllel töltött oszlopon (32—63 mikronos részecskeméret), eluensként kloroform és metanol 5:0,25 térfogatarányú elegyét használva. Az alkalmas frakciókat összegyűjtjük, és szárazra pároljuk. 27 mg lényegében tiszta BBM-1675D-Í kapunk amely azonos a 3. példában izolált termékkel.

6. példa

A BBM-1675C 5,1 mg-os mintáját 1 ml 0,5 mólos metanolos hidrogén-klorid oldattal hidrolizáljuk, körülbelül 40—50°C-on, egy éjszakán keresztül. Nátrium-hidrogén-karbonáttal végzett semlegesítés és szárazra párlás után a BBM-1675D bioaktív anyagot flash oszlop-kromatográfiával izoláljuk a maradékból, Woelm szilikagéllel töltött oszlopon (32—63 mikronos részecskeméret), eluálószerként kloroform és metanol 5:0,25 térfogatarányú elegyét használva. Az alkalmas frakció összegyűjtésével lényegében tiszta BBM-1675D-t eredményez, amely azonos a 3. példában izolált termékkel.

7. példa

Ha az 1. és 2. példában leírt eljárást ismételjük, de kiindulási anyagként BBM-1675A, helyett egy BBM-1675A,-et és BBM-1675A2-t tartalmazó elegy ekvimoláris menynyiségét használjuk, BBM-1675C és BBM-1675D keletkezik.

8. példa

Ha az 5. példa szerinti eljárást ismételjük, de a BBM-1675A, kiindulási anyag helyett egy BBM- 1675A, -et és BBM-1675A2-t tartalmazó elegy ekvimoláris mennyiségét használjuk, a BBM-1675D-hez jutunk.

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás a BBM-1675C tumor-ellenes antibiotikum — amely

(a) amorf szilárd anyag formájában jelenik meg;

(b) oldható metanolban, etanolban, etil-acetátban, acetonban, tetrahidrofuránban és kloroformban;

(c) szilikagél vékonyréteg-kromatográfiában 0,28 R/-értéket mutat, oldószer-rendszerként toluol és aceton 3:2 térfogatarányú elegyét használva;

(d) nagy feloldási FAB tömegspektrumetriásan meghatározva 855 molekulatömeget mutat;

(e) metanolban felvett ultraibolya spektruma az 1. ábrán feltüntetett, amely 210 nm (a=21 770), 274 nm (a=9 340) és 313 nm (váll) (a=4 190) értékeknél mutat ultraibolya abszorpciós maximumot, amely sav vagy bázis hozzáadására nem mutat szignifikáns változást;

19

(f) infravörös abszorpciós spektruma (KBr, film) a 3. ábrán feltüntetett, és a következő értékeknél mutat alapvető abszorpciós csúcsokat:

540, 740, 955, 990, 1017, 1065, 1080, 1118, 1150, 1250, 1305, 1325, 1340, 1370, 1385, 1440, 1690, 1705, 1735, 2900, 2920, 2930, 2970 és 3450 cm-';

(g) kis felbontású tömegspektruma az 5. ábrán feltüntetett, amely 856-os (M-)-H) + molekula iont mutat

(h) 360 MHz-es mágneses rezonancia spektruma CDCl3-ban a 7. ábrán megadott, amely a következő jeleket mutatja:

6,54 (1H, dd, J=7,7, 7,0); 6,21 (1H, brs);

5,87 (1H, d, J=9,6); 5,78 (1H, dd, J= =9,6, 1,5) 5,66 (1H, brd, J=2,9); 4,94 (1H, dd, J=10,3, 1,8); 4,61 (1H, d, J= =7,7); 4,25 (1H, s); 4,09 (1H, q, J=2,6) ;

3,97 (1H, t. J=9,6); 3,92—3,53 (10H),

3,45 (IH. dt, J= 10,3, 4,0); 3,37 (3H, s);

2,77 (1H. m); 2,69 (1H, dt, J=9,9, 5,2);

2.49 (1H, dd, J= 10,3, 2,6); 2,48 (3H, s);

2,30 (2H, m), 2,13 (1H, m); 2,09 (3H, s);

1.50 (2H, m); 1,37 (3H, d, J=5,9); 1,32 (3H, d, J=6,3); és 1,08 (6H) ppm (tetrametil-szilán);

(i) 90,6 MHz-nél C-13 mágneses rezonancia spektruma CDCl3-ban a 9. ábrán feltüntetett, amely a következő jeleket tartalmazza:

13.7, 17,5, 19,8, 22,3, 22,7, 23,5, 34,2,

35,2, 39,5, 47,7, 52,7, 55,8, 56,1,57,7, 62,4,

64.7, 67,4, 69,3, 69,8, 71,9, 76,1, 77,1,

77.7, 79,7, 83,2, 88,4, 97,3, 97,3, 99,7,

123,4, 124,6, 130,1 és 193,1 ppm (tetrametil-szilán) — valamint a BBM-1675D tumor-ellenes antibiotikum — amely

(a) amorf szilárd anyag formájában jelenik meg;

(b) oldható metanolban, etanolban, acetonban tetrahidrofuránban, kissé oldódik kloroformban.

(c) szilikagél vékonyréteg-kromatográfiásan 0,22 fy értéket mutat, oldószer-rendszerként kloroform és metanol 5:0,5 térfogatarányú elegyét használva, és fordított fázisú szilikagél vékonyréteg-kromatográfiásan meghatározva R/-értéke 0,37, oldószer-rendszerként metanol és víz 70:3 térfogatarányú elegyét használva;

(d) nagy feloldású FAB tömegspektrométerrel meghatározva molekulatömege 695- nek adódik;

(e) metanolos oldatban felvett ultraibolya abszorpciós spektruma a 2. ábrán feltüntetett, amely 214 nm (a=27 000), 274 nm (a=12 800) és 325 nm (a=5400) értékeknél mutat abszorpciós maximumot, amely sav vagy bázis hozzáadására nem mutat szignifikáns változást;

(f) infravörös abszorpciós spektruma (KBr, film) lényegében a 4. ábra szerinti, amely a következő értékeknél mutat alapvető abszorpciós csúcsokat:

735, 755, 910, 960, 1000, 1020, 1085, 1150,

20

11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65