197769. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A-42867 antibiotikum, addíciós sói és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

d) pH 9 foszfát puffer 282

305 (váll)

e) 0,1N KOH puffer 305

265 (váll)

B) A 2. ábrán bemutatott ÍR abszorpciós spektrum, a következő abszorpciós maximumokkal (cm-1): 3700—3100; 3000—2800 (nujol); 1650; 1580; 1460 (nujol); 1375 (nujol); 1300, 1235; 1210; 1160; 1130; 1060; 1025; 1000; 970; 840; 790—700; 720 (nujol).

C) A 3. ábrán bemutatott 'H-NMR spektrum, amely e következő jelcsoportokat mutatja (ppm-ben) 270 MHz-nél, DMSO-d6-ban (hexadeutero-dimetil-szulfoxid (felvéve, belső standardként TMS-t (0,00 ppm) alkalmazva (delta, ppm):

0,90, d i (CH3)2-(CH)-]; 1,02, d [CH3- (CH )Cl; 1,23, d ÍCH3-(CH)<]; 1,52, s [CH3-C=}; 1,77,

m |CH (CH3)2 ); 2,38, s (-N-CH3); 3,0-6,35,

s és m (aromás cukor és peptid CH-k); 6,27—

9,29 (aromás CH-k, peptid NH-k és fenolos OH-k) d = dublett s = szingulett m= m u l tip lett

D) Retenciós idő (R/) 0,537 a vankomícin-HCl-hez (Vancocín, Eli Lilly, R(= 16,36 perc) viszonyítva, az elemzést fordított fázisú HPLC-vei a következő körülmények között végezve:

oszlop: Ultrasphere ODS (5 jim) Altex

(Beckman) 4,6 mm (belső átmérő) X 250 mm

elő-oszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 pm) eluálőszer: víz:acetonitril:2-etanolamin-trifluorecetsav 9:1:0,01:0,01 (térf./térf ) áramlási sebesség 1,6 ml/perc UV detektor: 254 nm

belső standard: vankomicin-HCI (R( = = 16,36 perc) (Vancocin, Eli Lilly)

E) Retenciós idő (R/) 0,665 a vankomicin-HCI-hez (Vancocin, Eli Lilly, R( 9,96 perc) viszonyítva, az elemzést fordított fázisú HPLC- vei a következő körülmények között végezve:

oszlop: Ultrasphere ODS (5 pm) Altex (Beckman) 4,6 mm (belső átmérő) X X250 mm

elő-oszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 pm) A eluálószer:

9

CH3CN

2%

2,5 g/( NaH2P04.H20

98%

pH 6,0-ra beállítva

:uá lószer:

v U.CN

70%

2,5 g/1 NaH2P04.H20

30%

pH 6,0-ra beállítva

elu ilás: lineáris grádiens, 5—60% B eluálószer A eluálószerben, 40 perc alatt

áramlási sebesség: 1,6 ml/perc UV detektor 254 nm

6

belső standard: vankomicin.HCl (R/ =

=9,96 perc) Vancocin, Eli Lilly)

F) Elem-analízis, miután a mintát előzetesen kb. 140°C-on közömbös atmoszférában szárítjuk; a következő közelítő (átlagos) százalékos összetételt kapjuk:

10

szén 53,3%

hidrogén 5,9%

nitrogén 7,85%

klór (összes) 4,41%

klór (ionos) 2,22%.

A szervetlen maradék mennyisége 900°C-on levegőn szárítva 0,875%.

G) A sav-bázis titrálási görbe vízben, egy minta 0.05N KOH-dal való titrálása során) amely mintához előzetesen fölös menynyiségben vizes HCI-t adtunk (pKa értékeket mutat 3,2-nél, 7,1-nél és 8,3-nái.

H) R;=0,56 a következő kromatográfiás rendszerben;

(vizes NaCl 87,5 g/1; NaH2P04 0,5 g/l)70% CH3CN 30%

pH 6,0-ra beállítva,

fordított fázisú szilanizált szilikagél lemezeket (RA-18 F264) alkalmazva Előhívás:

— UV fény, 254 nmen;

— sárga szín Pauly reagenssel, azaz diazotált szulfanilsavval (J. Chromatogr. 20. 171,

1965; Z. Physiol. Chem. 292, 99, 1953)

— bioautográfia B. subtilis ATCC 6633 alkalmazásával, minimális Davis-f. táptalajon.

I) Molekulatömeg kb. 1559, az FAB-MS spektrum alapján, amely a M+H+ csúcsot

560-nál mutatja.

Az A 42867 antibiotikum savas és bázisos funkciókkal rendelkezik és amellett, hogy belső sókat képez, megfelelő pH körülmények között a szokásos eljárásokkal belőle szerves és szervetlen ellen-ionokkal sók képezhetők.

Jellegzetes és megfelelő savaddíciós sók képezhetők a találmány szerinti vegyületekből a szokásos reakciókkal, szerves és szervetlen savakkal egyaránt, amilyenek pl. a következők: sósav, hidrogén-bromid, kénsav, foszforsav, ecetsav, trifluor-ecetsav, triklór-ecetsav, borostyánkősav, citromsav, aszkorbinsav, tejsav, maleinsav, fumársav, palmitínsav, kóisav, pamoinsav, nyálkasav, glutamínsav, glikolsav, ftálsav, borkősav, laurinsav, sztearinsav, szalicilsav, metánszulfonsav, benzolszulfonsav, szorbinsav, pikrinsav, benzoesav, fahéjsav stb.

A bázisokra jellegzetes példák: alkálifémvsgy alkáliföldfém-hidroxidok — amilyen a nátrium-, kálium-, kalcium-, magnézium-, bárium-hidroxid —; ammónia; alifás, aliciklusos vagy aromás szerves aminok, pl. a metilamin, dimetilamin, trimetilamin és a pikolir.

A találmány szerinti „nem-só" vegviiletek átalakítása a megfelelő addícíós sóvá és

197769

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65