197758. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az L 17392 antibiotikum (deglukoteikoplanin) előállítására
197758 gél oszlopra (200 g, 0,06—0,2 mm, Merck 60), amelyet 1%-os vizes ammóniumformiáttal hoztunk egyensúlyba. 300 ml vizet engedünk át az oszlopon és az eluátumot elvetjük. Az oszlopot ezután lineáris grádiens alkalmazásával fejlesztjük ki (acetonitril vízben, 10—40%), 70 ml/óra sebességgel, 30 órán át. 7 ml-es frakciókat és ezeket HPLC-vel követjük. Az L 17392 antibiotikumban dús frakciókat (221—238.) összeöntjük és 24 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A szilárd csapadékot szűréssel összegyűjtjük, kismennyiségű (10 ml) acetonitrillel, majd (100 ml) etiíéterrel mossuk és 80:20 /térf./térf./ víz:acetonitrii elegyből átkristályosítjuk. Az így kapott kristályos szilárd anyagot szűréssel öszszegyűjtjük, etiléterrel mossuk és végül vákuumban (2,66-102 Pa) 3 napon át szárítjuk. 0,55 g kristályos tiszta L 17392 antibiotikumot kapunk (színtelen tűk). 4. példa: Az L 17392 antibiotikum-hidroklorid előállítása 130 mg, az előző példa szerint előállított kristályos tiszta L 17392 antibiotikumot 12 ml 2:3 (térf./térf.) acetonitrikvíz elegyben szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz 0,2 ml IN sósavat adunk. 15 ml n-butanol beadagolása után a kapott oldatot kis térfogatra (kb. 2 ml) töményítjük be, csökkentett nyomáson) kb. 26,6• 102 Pa) 40°C-on. A maradékhoz 10 ml etilétert adunk és a keletkezett csapadékot szűréssel összegyűjtjük, etiléterrel mossuk és csökkentett nyomáson egy éjjelen át kb. 50°C-on szárítjuk. 107 mg L 17392 antibiotikum -hidrokloridot käpunk. A kiindulási anyagok előállítása: A deglukoteikoplanin antibiotikum benzilészter hidroklorid előállítása a) az L 17046 antibiotikum 1M benzilalkoholos sósavval való kezelésével 10 mmól, 18 g lényegében tiszta L 17046 antibiotikumot 600 ml benzilalkoholos 1M sósavban szuszpendálunk és a szuszpenziót 6Q°C-on keverjük. 15 perc után tiszta oldat keletkezik, amelyet további 3 órán át ugyanezen a hőmérsékleten keverünk, majd az oldatot 15°C-ra hűtjük le és a keverést további 12 órán át szobahőmérsékleten folytatjuk. 4 liter 4:3 (térf./térf.) n-hexán:éter elegy hozzáadása után szilárd csapadék válik ki, amelyet összegyűjtünk, 1 liter éterrel mosunk és 150 ml metanolban újra feloldunk. Az oldatot 1 liter vízzel hígítjuk és pH 2,5-n kétszer extraháljuk 2 liter etiiacetáttal. A szerves rétegeket egyesítjük és hozzáadjuk 10 ml IN sósav és 200 ml n-butanol elegyét, majd az oldatot kis térfogatra töményítjük be. 1 liter 3:2 (térf./ /térf.) n-hexán:éter elegy hozzáadására szilárd csapadék válik ki, amelyet összegyűjtünk, éterrel mosunk és vákuumban 40°C-on 8 órán át szárítunk. 8,5 g deglukoteikoplanin-benzilészter-hidrokloridot kapunk (elemzési 15 eredmények: deglukoteikoplanin-benzilészter-hidroklorid 70%, víz és oldószerek 15%, meghatározatlan szennyezések 15%). b) az L 17054 antibiotikum 90%-os benzilalkoholos 1M sósavval való kezelésével 10 g lényegében tiszta L 17054 antibiotikumot 90 ml benzilalkoholban oldunk és 40°C- on 10 ml 37%-os sósavat adagolunk. A reakcióelegyet 70°C-ra melegítjük fel és a keverést 30 percen át folytatjuk, majd a vizet vákuumban (kb. 26,6-102 Pa) 70°C-on (fürdő-hőmérséklet) teljesen eltávolítjuk. Benzolt adagolunk, majd a keveréket csökkentett nyomáson bepároljuk, a vizes maradványok azeotróp desztilláció segítségével való eltávolítására. A keveréket ezután 100 ml 1M sósavval hígítjuk, amelyet — az előbbiek szerint — vizes benzilalkohollal készítettünk el. A kapott tiszta oldatot 6 órán át 65°C-on keverjük, majd 15°C-ra hűtjük le és az a) pontban leírtak szerint feldolgozzuk. 4,85 g deglukoteikoplanin-benzilészter-hidrokloridot kapunk (elemzési eredmények: deglukoteikoplanin-benzilészter-hidroklorid 75%, víz és oldószerek 15%, nem azonosított szennyezések 10%). c) a teikoplanin 2M — 80%-os vizes benzilalkohollal elkészített — sósavval, vákuumban végzett kezelésével, benzol és 37%os sósav ismételt hozzáadása mellett 10 g teikoplanint (a teikoplanin komponensek mennyisége 85%) 80 ml benzilalkoholban szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz keverés közben 40°C-on 20 ml 37%-os sósavat adunk. A keveréket kb. 60 percen át vákuumban (kb. 26,6-102 Pa) tartjuk, hőmérsékletét kb. 65°C-ra (fürdő-hőmérséklet) emelve, majd 50 ml benzolt adunk hozzá és vákuumban kb. 65°C-on bepároljuk. 30 perc elteltével a reakcióelegyhez hozzáadjuk 5 ml 37%-os sósav és 25 ml benzilalkohol elegyét, majd megismételjük a „vákuum alatti" eljárást (kb. 20 Hgmm, kb. 65°C) 30 percen át. Ezután 50 ml benzolt adagolunk és az elegyet az előbbiekben leírtak szerint bepároljuk. 8 órán át, 30 percenként megismételjük a „vákuum alatti" eljárást, 5 ml 37%-os sósav és 15 ml benzilalkohol elegye és 50 ml benzol felváltva való adagolásával. Ekkor 20 ml 37%-os sósavat és 100 ml benzolt adagolunk, a vizet és a benzolt vákuumban eltávolítjuk és a kapott tiszta oldatot szobahőmérsékleten és argon atmoszférában, nyomás alatt 12 órán át keverjük. A reakcióelegyet ezután 1,5 liter éterbe öntjük. A kivált szilárd csapadékot összegyűjtjük, éterrel mossuk és egy éjjelen át szobahőmérsékleten, vákuumban szárítjuk. így 10 g a cím szerinti nyers észtert kapunk. Ezt a terméket 150 ml metanolban oldjuk és erőteljes keverés közben hozzáadjuk 300 ml víz és 300 ml etilacetát elegyét. Néhány perc elteltével további 300 ml vizet, 300 ml etilacetátot és 300 ml 1:2 (térf./térf.) n-butanol:víz elegyet adagolunk. A vizes réteg pH-ját 3,5-re állítjuk be és a szerves fázist elkülönítjük. A vizes fázist kétszer extraháljuk 600—600 ml 16 9 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
