197747. lajstromszámú szabadalom • Eljárás purin-származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
197747 képletü vegyület — ahol n, m, R4, Rs és Ar jelentése megadott — teljes képződése mutatható ki. A XX általános képletü vegyületet tartalmazó reakciókeveréket azután vízzel hígítjuk és nátrium-nitrittel kezeljük ecetsav jelenlétében. A nitrites kezelés hatására X általános képletü nitrozovegyületet — ahol n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott — kapunk, amit színváltozás és csapadékképződés jelez. A kezelést szobahőmérsékleten hajtjuk végre. A X általános képletü vegyületet tartalmazó reakciókeveréket ezután nátrium-ditionittal hozzuk érintkezésbe oldószerelegyben, mint formamid és hangyasav elegyében, 60— 90°C, előnyösen 70—80°C hőmérsékleten. A hőmérsékletet ezután az oldószereiegy forráspontjáig emeljük, mintegy 130—140°C-ra melegítjük legfeljebb 1 óráig, előnyösen legalább 20 percig, vagy a fent leírt, nitrozovegyületet tartalmazó keverék színének eltűnéséig és szervetlen só kiválásáig. E reakció terméke a IV általános képletü vegyület, ahol n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott. Ezután a IV általános képletü vegyületet szárítjuk és vízmentes oldószerben, mint metanolban, etanolbnan vagy hasonlóban szuszpendáljuk. A szuszpenziót vízmentes savval, mint HCl-dal kzelve IVa általános képletü savaddíciós sót kapunk, ahol n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott, vagy a kezeléshez használt savnak megfelelő sót. A IVa általános képletü sót tömény ammónium-hidroxid-oldat és 97% hidrazin keverékével meglúgosítva IVb általános képletü bázist kapunk, ahol n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott. A bázis bomlékony, szárítását például vákuumban foszfor-pentaoxid felett végezzük. A száraz IVb általános képletü szabad bázist RgOOCNCS általános képletü vegyület oldatához adjuk, ahol Re jelentése megadott. Az R6OOCNCS-oldat előállítása céljából kálium-tiocianátot oldószerben, mint acetonitrilben szuszpendálunk és az ekvivalensnél valamivel kisebb mennyiségű C!COOR6 általános képletü vegyülettel — ahol R6 jelentése megadott — kezeljük visszafolyatási hőmérsékleten 1 óráig, lehűtjük, majd keverjük, hogy a IVb általános képletü bázis hozzáadása előtt az összes alkil-klór-formiát reagáljon. A IVb általános képletü száraz szabad bázis és az RgOOCNCS. általános képletü vegyület reakciójának teljes lezajlásáról vékonyréteg-kromatográfia útján győződünk meg szilikagél-lemezeket és 20% metanolt tartalmazó metilén-klorid eluenst használva. II általános képletü vegyületet kapunk, ahol R6, n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott. A II általános képletü vegyület és valamely kapcsoló reagens, mint N,N’-diciklohexil-karbodiimid keverékét oldószerben, mint vízmentes dimetil-formamidban, szobahőmérsékleten addig keverjük, amíg vékonyréteg-kromatográfiáva) a reakció tökéletes végbe-7 menését tapasztaljuk. A III általános képletü vegyületet kapjuk, ahol R6, n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott. A III általános képletü vegyületet és vízmentes kálium-karbonátot tartalmazó reakciókeveréket oldószerben, mint vízmentes metanolban szuszpendáljuk és visszafolyatás közben addig forraljuk, amíg a rétegkfomatográfia az I általános képletü vegyület — ahol R, -OH csoportot, R3'NHCOOR6 általános képletü csoportot jelent, melyben R6 jelentése megadott és n, m, R4, R5 és Ar jelentése megadott — létrejöttét ki nem mutatja. Az I általános képletü vegyületet — ahol R, -OH csoportot jelent és Rj’jelentése NHCOOR6 általános képletü csoport — kívánt esetben ismert eljárásokkal olyan I általános képletü vegyületté alakítjuk át, ahol R3 -NHR általános képletü csoportot jelent, melyben R a -COR6 általános képletü csoporttól eltérő jelentésű. Hasonlóan az I általános képletü vegyületet, ahol Rt -SH csoportot jelent, ismert eljárásokkal olyan I általános képletü vegyületekből állíthatjuk elő, melyekben R, -OH csoportot jelent. A IV, II, III és I általános képletü vegyületeket egy azonos lombikban állíthatjuk elő. Kívánt esetben azonban a IV, II, III vagy I általános képletü vegyületet szokványos módszerekkel szeparálhatjuk és tisztíthatjuk Általában a találmány szerinti eljárások — amint a 3. reakcióvázlat — C. módszer szemlélteti — a következők: 2-Amino-6-k!ór-purin, kálium-karbonát és a 2 általános képletü kiindulóanyag — amely általában kereskedelmileg kapható vagy ismert eljárásokkal előállítható — keverékét nitrogénatmoszférában 2—48 órán át keverjük. 4 és 5 általános képletü 7- és 9-sz.ubsztituáli klór-purinok keverékét kapjuk. A 4 általános képletü vegyületet szeparáljuk és vizes savval, mint sósavval kezeljük, majd bázis, mint nátrium-hidroxid híg oldatát adjuk hozzá. A keveréket melegítjük a semlegesítés biztosítása céljából, majd a várt I általános képletü vegyületet — ahol R3 hidrogénatomot jelent — szokványos módon elválasztjuk. A 7 és 8 általános képletü vegyületeket eredményező reakciókat feltüntettük az 1. reakcióvázlat — B. módszerben. A találmány szerinti vegyületek jelentős enzimbénító és sejtmérgező hatással rendelkeznek. A purin nukleozid foszforiláz (PNP-4) enzim próbájában teljes gátlás érhető el egyes találmány szerinti vegyületek mintegy 300 mikromolnál kisebb koncentrációjával. A PNP-4 aktivitást radiokémiái úton határoztuk meg a C'4-inozinból képződött C'4-hipoxaníín mennyiségét mérve (Biomedicine 33, 39 (1980)), enzimforrásként emberi vörösvérsej+eket használva. Ugyanezen vegyületek standard próbában (HTBA-1) [Science 214, 8 5 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
