197596. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás antraciklin származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
197596 Termelő tenyészet tápközegének összetétele desztillált víz 1 liter pH 7,0 Habzásgátlóként 0,025% mennyiségben Desmorphon-t adagolunk. A fenti összetételű tápközegből 10 litert 15 literes fermentorba töltünk. A közeget közvetlen és közvetett fűtéssel 121°C-on 28 percen át sterilizáljuk, lehűtjük, és az oltótenyészettel inokuláljuk. A tenyészetet 27°C-on (± 0,51°C) keverés közben 170—180 perc-' fordulatszám mellett 48—56 órán át fermentáljuk. A tenyészetet 0,6—0,8 1/1 tenyészlé mennyiségű levegővel levegőztetjük. A fermentálás 28 órájában adagolunk inhibitorként 25 ml tömény nátrium-azid-oldatot (20 mg/ml). 48 óra fermentálás után, amikor az antibiotikum komplex koncentrációja 30—50 pg/ /ml, és a tenyészlé pH-értéke 5,5 és 6,0 között van, a fermentálást befejezzük. A centrifugált sejttérfogat ilyen körülmények között 11— 13 ml/100 ml tenyészlé. 2. példa A fermentálást az 1, példában leírtak sze5 rint végezzük, az alábbi tápközegekkel. Oltótenyészet tápközege Csicseriborsóliszt 10,0 g dextróz 10,0 g NaCI 5,0 g CaCOg 3,0 g desztillált víz 1 liter pH (28°C-on 72 órán át). 7,0 Termelő tenyészet tápközege Keményítő 10,0 g glükóz 10,0 g malátakívonat 7,5 g pepton 7,5 e NaCI 3,0 g MgS04.7H20 1,0 g kh2po4 2,0 g CuS04.5H20 7,0 mg FeS04.7H20 1,0 m g MnS04.4H20 8,0 mg ZnS04.7H20 2,0 mg desztillált víz 1 liter pH 7,0 A fermentálás 24—32. órájában a 6—8. példákban leírtak szerint adagoljuk az inhibitort. 48—56 órás fermentálás után a fermentort leállítjuk. Az antibiotikum komplex koncentrációja 20—40 pg/ml, a tenyészlé pH-értéke 5,8 és 6,2 közé esik. A leülepített sejttérfogat 11 —13 ml/100 ml tenyészlé. 3. példa A fermentálást az 1. példában leírtak szerint végezzük az alábbi tápközegekkel. Oltótenyészet tápközege malátakívonat 10,0 g élesztőkivonat 4,0 g glükóz 4,0 g 6 Oltótenyészet tápközege desztillált víz 1 liter pH (28°C-on 72 órán át). A termelő tenyészet tápközege 7,0 keményítő 10,0 g glükóz 10,0 g szójaliszt 15,0g k2hpo4 1,0 g MgS04.7H20 1,0 g NaCI 3,0 g CuS04.5H20 7,0 mg FeS04.7H20 1,0 mg MnCl2.4H20 8,0 mg ZnS04.7H20 2,0 mg desztillált víz 1 liter pH 7,0 A fermentálás 24—32. órájában a idagoljuk az inhibitort (6—8. példa szerint). A fermentálást 48—52. órában megszakítjuk. 4. példa Az 1. példa szerint járunk el, de tápközegeket alkalmazzuk. Törzsfenntartó agar összetétele az alábbi zabliszt 20,0 g FeS04.7H20 0,1 mg ZnS04.7H20 0,1 mg MnCl2.4H20 0,1 mg desztillált víz 1 liter PH 7,2 Oltótenyészet tápközege glükóz 10,0g keményítő 10,0g szójaliszt 15,0g NaCI 3.0 g MgS04.7H20 1,0 g k2hpo4 1.0 g CuS04.5H20 7,0 mg FeS04.7H20 1,0 mg MnCl2.4H20 8,0 mg ZnS04.7H20 2,0 mg desztillált víz 1 liter pH (28°C-on 72 órán át). 7,2 A termelő tenyészet tápközege Szacharóz 20,0 g CaC03 2,5 g KNOg 1.0 g k2hpo4 0,5 g MgS04.7H20 0,5 g NaCI 0.5 g FeS04.7H20 1,0 mg desztillált víz 1 liter pH 7,0 A fermentálás során 24—32 óra elteltével a kémiai inhibitort adagoljuk a 6—8. példákban leírtak szerint. 48—52 órán át folytatott fermentálás után a fermentort leállítjuk, amikor is az antibiotikumok koncentrációja 25— 40 pg/ml és a tenyészlé pH értéke 6,3—6,4. A leülepített sejttérfogat 5,0—6,0 ml/100 ml. 5 IC 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65-4
