197570. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új imidazokinolin származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
197570 értéke 4,9 mg/kg. A különböző I általános képlett! vegyületekre kapott értékeket az I. Táblázatban tüntettük fel. Gyűrűs AMP foszfodiészteráz gátlása Ezt a meghatározást lényegében a Thompson és munkatársai által (Methods in Enzymology, 38, 205—212 (1974)) leírt módon végeztük. Ticiummal jelzett gyűrűs adenozin-monofoszfátot (cAMP) emberi vérlemezkéből kapott olyan foszfodiészteráz (PDE) enzimmel együtt inkubáltunk, amely a tenyészcsőben a cAMP egy részét 5’AMP-vé alakítja. Ezt a reakciót úgy állítottuk le, hogy a csövet forró vízfürdőbe merítettük, majd jégre tettük és minden csőbe valamennyi kígyómérget tettünk. Ez a második inkubálás alatt az 5’AMP-t adenozinná alakította. A megmaradó gyűrűs AMP megkötésére ioncserélő gyantát adtunk az elegyhez. A csöveket a gyanta elválasztására centrifugáljuk. A tiszta felülúszó tartalmazta a radioaktív adenozint. Ennek egy részét folyadék szcintillációs számlálóban megviszgáltuk. A vizsgálati anyag cAMP foszfodiészteráz gátló hatását úgy határoztuk meg, hogy a PDE enzim készítményt a vizsgálandó anyaggal előinkubáltuk. A dózis-válasz görbéket felvettük és a vizsgálandó vegyület hatását a vegyület azon moláris koncentrációjaként adtuk 11 meg, amely a PDE hatását (IC50) 50%-ban gátolja. Ebben a vizsgálatban a milrinone, amely ismert inotrop szer IC50 értéke 2X X10~7 mól volt. A különböző, I általános 5 képletű vegyületekre vonatkozó értékeket az I. táblázatban adtuk meg. In vivo inotrop hatás Ezt a vizsgálatot görényekkel, és a következőképpen végeztük. 10 Eheztetett, érzéstelenített görényeket olyan műszerekkel láttunk el, amelyek lehetővé tették a hemodinámiás paraméterek, valamint a jobb ventrikuláris összehúzódásierő (RVCF) 15 Walton-Brodie nyitott áramú gauge arch készülék segítségével való vizsgálatát. A vegyületeket intraduodenálisan dimetil-szulfoxiddal készült (1 ml-nyi vagy kevesebb) oldat formájában adagoltuk, és a beadás után a mio- 20 kardiális összehúzódási erőre és más paraméterekre gyakorolt hatást 60 percig követtük. A vegyülettel való kezelés hatására az öszszehúzódási erőben bekövetkező változásokat a dózis előtti kontroll százalékos változásá- 25 ban fejeztük ki. Ebben a viszgálatban a milrinone 3 mg/ /kg dózisnál az RVCF 52%-os növekedését okozta. A különböző, (I) általános képletű vegyületekre kapott értékeket a II. Táblázat- 30 ban foglaltuk össze. 12 I. Táblázat Vérlemezke aggregáció és cAMP foszfodiészteráz gátlása Példaa) gátlás( In vitro - nyúl PRP EC50 Cmcg/ml) vs.ADP vs.kollagén Ex vivo vs.ADP EC50 (mg/kg) cAMP^ Poszfodiészteréz Humán vériemézkék IC50 (M) 4 0,3 0,1 3,4 5 x 10 “9 6 32 32 6 x 10"7 8 32 32 5 x 10 "9 9 32 32 8 x 10~7 7 7 CD I O i—1 X 10 0,02 0,006 4,4 4 X M O r-a 11 0,6 0,08 15,7 7 x 1 O“6 13 0,3 0,03 10 3 x 10"8 14 3 0,2 5 x 10“6 12 8 2,5 2 x 10 “6 30 0,002 0,001 2,4 2 x 10 “9 31 0,02 0,018 2,1 2 X f—' o I 32 0,003 0,0008 3,8 2 x 10 "9 7
