197327. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kettes helyzetben alfa-hidroxi-csoportot tartalmazó szénlánccal szubsztituált 4-hidroxi-kinolin-3-karbonsav származékok új észtereinek és hatóanyagként a fenti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
15 197327 16 18. példa [ l-{4-Hidroxi-3-[ (2-tiazolil-amino)-karbonil]-8-(trifluor-metil)-2-kinolinil}-propil]-propenoát előállítása. 4 g 4-hidroxi-2-(l-hidroxi-propil)-N-(2- -tiazolil)-8-(trifluor-metil)-kinolin-3-karboxaraidot (amelyet a 896941 számú belga szabadalmi leírás 10. példájának C) lépése szerint álltunk elő) 50 ml diklór-metánnal és 0,9 ml akrilsavval keverünk, majd 2,48 g diciklohexil-karbodiimidet és 0,6 g diraetil-amino-piridint adunk hozzá. Ezután 3 órán ét keverjük, a diciklohexil-karbamidot eltávolítjuk, a szürletet előbb In sósavoldattal, majd vízzel mossuk, szárítjuk; a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert lepároljuk. így 5 g nyersterméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk. Eluálószerként diklór-metán és etil-acetát 8:2 arányú elegyét alkalmazzuk. Az így kapott 3,6 g terméket acetonitrilből átkristélyosítjuk, jéghűtés után szűrjük, és vákuumban megszárítjuk. Az így nyert 2,8 g terméket ismételten szilikagélen kromatografáljuk, ehhez eluálószerként diklór-metán és etil-acetát 95:5 arányú elegyét használjuk. A kapott terméket éterrel pépesítjük, a csapadékot szűrjük, és vákuumban megszáritjuk. így 2 g cím szerinti vegyületet kapunk, olvadáspontja 204 °C. Gyógyszerkészítmények előállítása 19. példa Tabletta előállítása 2. példa szerinti vegyület 50 mg segédanyagok tablettánként 350 mg-ra (Segédanyagként laktózt, talkumot, keményítőt, magnézium-sztearátot használunk.) 20. példa Tabletta előállítása 7. példa szerinti vegyület 50 mg segédanyagok tablettánként 350 mg-ra (Segédanyagként laktózt, talkumot, keményítőt, és magnézium-sztearátot használunk.) Farmakológiai hatás vizsgálata Gyulladésgátló hatás vizsgálata adjuvánssal előidézett krónikus izületi gyulladás esetén (preventív kezelés) Ha a patkányok egyik hátsó mancsába Freund-féle adjuvánst injektálunk, az injektált mancson gyorsan kialakul egy elsődleges gyulladásos elváltozás, majd egy 13-15 napos lappangási idő után az injekció hatására - különösen a másik hátsó mancson - másodlagos izületi gyulladás «dákul ki. A vizsgálatot 42-50 napos, him patkányokon végezzük, az állatoknak intraplantárisan 0,1 ml Freund-féle adjuvánst (6 mg/ml koncentrációban elölt Mycobacterium butyricumot tartalmazó vazelinolajos szuszpenzió) injektálunk. Az állatokat orálisan kezeljük a találmány szerinti eljárással előállított vegyületekkel, a 0. naptól (az adjuváns injektálásának napja) az állatok leölését megelőző napig, amely a 17. napon történik. Az izületi gyulladásos kontroll és normál kontroll állatok csak hordozóanyagot kapnak orálisan. A vizsgált, vegyületek hatásosságára az injektált mancs térfogatában (elsődleges és másodlagos gyulladás) és a nem injektált mancs térfogatéban (másodlagos gyulladás) észlelt növekedés alapján következtetünk, a normál kontroll állatok átlagos mancstérfogatával való összehasonlítás alapján. Meghatározzuk a DAso, vagyis azt a dózist, amely a kezelt állat mancstérfogatának növekedését a kontroll állathoz, képest 50%-kal csökkenti. Az eredményeket az 1. táblázatban adjuk meg. 1. táblázat Vegyület DAso (példa száma) (mg/kg) 2. 0.8 7. 1.3 6 1.0 Gyomorfekélyt kiváltó hatás vizsgálata A vizsgálatot 120-150 g-os nőstény patkányokon végezzük, az állatoknak a kezelést megelőzően 24 órán át csak vizet adunk, és statisztikusíin csoportokra osztjuk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket orálisan adjuk az állatoknak. A kezelés után 7 órával az állatokat leüljük, gyomrukat a nagyobb görbület mellett felnyitjuk, izotóniás nátrium-klorid-oldattal mossuk és azonos oldattal átitatott vattacsomóval letörölve szétnyitjuk. A fekélyes elváltozások fokát, azok számát és nagyságát tekintve 0 és 3 közötti skálán értékeljük, becsléssel, a becsléseket két olyan megfigyelő végzi, akik nem ismerik a kezelési rendet. Az 1-es szám azt jelenti, hogy egy határozott fekély észlelhető, vagy számos pontszerű fekély «dákul ki. A fenti módon, figyelembe véve a fekélyes állatok %-os arányát is (a fekélyesedés mértéke nagyobb, mint 0,5, a vérbőségre vagy pontszerű vérzésre utaló megfigyelések gyakoriak az éheztetett kontroll állatokban is) a fekélyesedési indexet az alábbi képlet 9 5 • 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
